- •План практических занятий по медицинской генетике, 2013 гг. (Лечебное дело)
- •Вопросы для подготовки к зачету по медицинской генетике.
- •1. К общим показаниям для проведения клинико-генеалогического метода относятся:
- •2. Амплификация -многократное копирование определённого участка днк (участка гена) при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro).
- •III. Биохимический метод.
- •2 Этап: уточнение диагноза с использованием высокочувствительных методик биохимического анализа (газовая, жидкостная хроматография, масс-спектрометрия и др.).
- •3 Этап: окончательный диагноз нбо основан на результатах днк-типирования.
- •IV. Популяционно-статистический метод (псм).
- •V. Близнецовый метод.
- •3) Анкетирование близнецов (при масштабных популяционных исследованиях);
- •V. Mc. Kusick.
- •1. Клинико-генеалогический метод:
- •4. Компьютерные диагностические программы.
- •5 Пациентов скончались в ходе проведения генотерапии(в сша).
- •1 Этап
- •3 Этап периконцепционной профилактики
2. Амплификация -многократное копирование определённого участка днк (участка гена) при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro).
ПЦР , в зависимости от условий, позволяет синтезировать сравнительно небольшие последовательности ДНК – от 3000 до 40000 п.н.
Например, геном человека состоит примерно из 3 млрд. пар нуклеотидов.
3. Электрофорез амплифицированного участка в геле (от «-» к «+»).Окрашивание препарата этидия бромидом
и анализ типа внутригенной перестройки, либо ее исключение при визуализации в ультрафиолетовом свете.
В некоторых вариантах методов возможна автоматическая регистрация результатов.
Разновидности ПЦР:
«Вложенная» ПЦР (Nested PCR) — применяется для уменьшения числа побочных продуктов реакции.
«Инвертированная» ПЦР (Inverse PCR) — используется в том случае, если известен лишь небольшой участок внутри нужной последовательности.
ПЦР с обратной транскрипцией(Reverse Transcription PCR, RT-PCR) — используется для амплификации, выделения или идентификации известной последовательности из библиотеки РНК.
Асимметричная ПЦР ( Asymmetric PCR) — проводится тогда, когда нужно амплифицировать преимущественно одну из цепей исходной ДНК.
Количественная ПЦР(Quantitative PCR, Q-PCR) — используется для быстрого измерения количества определенной ДНК, кДНК или РНК в пробы.
Количественная ПЦР в реальном времени (Quantitative real-time PCR
III. Биохимический метод.
Применяется для оценки биохимического фенотипа: область протеомики, исследования структуры различных групп биологически активных веществ (белков, углеводов, липидов, метаболитов) и продуктов клеточного метаболизма, а также их взаимодействия (метаболомика).
1 этап: применяются ориентировочные биохимические тесты, являющиеся основой массового скрининга всех новорожденных (ФКУ, ВГ, АГС, Гал, МВ), либо селективного "просеивания" в группах риска.
в медико-генетических консультациях широко применяется большая группа селективных тестов для раннего выявления наследственной патологии обмена. К ним относятся:
- исследование плотности, прозрачности, реакции и цвета мочи:
снижение плотности утренней мочи взятой натощак до 1006 и ниже наблюдается при несахарном диабете,
кислая реакция мочи – при аминоацидопатиях,
изменение прозрачности, цвета:
черно-коричневая окраска мочи при добавлении щелочи имеет место при алкаптонурии,
молочно-белый – при липурии,
красный – при порфирии, гемоглобинурии,
коричневый – при метгемоглобинурии, порфирии, билирубинурии;
- проба Селиванова: выявляет избыток фруктозы (при фруктоземии);
- тест на кетоновые кислоты: выявление алкаптонурии, фенилкетонурии, болезни «мочи с запахом кленового сиропа», гистидинемии, болезни «сушеного хмеля»;
- иодозидная проба на цистин, гомоцистин: при гомоцистинурии, цистинурии, болезни Вильсона-Коновалова, синдрома де Тони-Дебре-Фанкони;
- проба Пантуса на ионы хлора: при гипо- гиперальдостеронизме, тубулопатиях;
- тест на пролин: при б. Вильсона-Коновалова, синдромах Жозефа,
де Тони-Дебре-Фанкони;
- проба Бенедикта на сахара, фенольные кетокислоты: при галактоземии, с-ме де Тони-Дебре-Фанкони, цистинозе, врожденной непереносимости лактозы, почечном и сахарном диабете;
- проба Гайнеса аналогична предыдущей, но более информативна в отношении сахаров;
- тест с толуидиновым синим на выявление гликозоаминогликан при мукополисахаридозах;
- проба Сулковича на ионы кальция:
при идиопатической гиперкальциемии;
- тест Милона на тирозин: при тирозинозе, синдроме Хартнапа, галактоземии, б.Вильсона-Коновалова, цистинозе;
- проба Легаля на кетоновые тела: при сахарном и почечном диабете, гликогенозах;
- проба Альтгаузена: при гликогенозах
- проба на медь: при болезни Вильсона-Коновалова.