Классификация питательных сред

Питательные среды можно разделить:

А) По происхождению на:

1) естественные - натуральные продукты питания (мясо, молоко, картофель) и

2. искусственные - приготовленные специально для выращивания микробов.

Искусственные питательные среды, в свою очередь, делятся на:

а) среды из естественных продуктов (мясная вода, мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), не имеющие постоянного состава;

б) синтетические питательные среды - растворы строго определенных количеств солей, аминокислот, азотистых оснований, витаминов в дистиллированной воде - имеют постоянный состав, используются для выращивания микроорганизмов и культур клеток при получении вакцин, иммунных сывороток и антибиотиков.

Б) По назначению:

1) общего назначения (МПБ, МПА) - на них растет большинство микробов;

2) элективные - избирательно способствующие росту одного вида микробов из смеси (например, желточно-солевой агар для стафилококков);

3) дифференциально-диагностические - позволяющие отдифференцировать по внешнему виду колоний один вид микроба от других (Эндо, Левина для кишечной группы микробов).

Кроме того, по назначению выделяют среды в зависимости от целей использования в схеме выделения чистых культур на:

1) среды обогащения - подавляют рост в смеси микробов, сопутствующих возбудителю,

2) среды для получения изолированных колоний,

3. среды накопления чистой культуры.

В) По консистенции среды подразделяются:

1) жидкие;

2) полужидкие (при добавлении агар-агара в концентрации 0,5%);

3) плотные - выше 1%.

Культуральный метод исследования

Культуральный (бактериологический) метод исследования - совокупность методик, направленных на выделение и идентификацию чистых культур микроорганизмов (бактерий) с помощью культивирования на питательных средах.

Чистая культура - совокупность микроорганизмов одного вида.

Чаще всего чистую культуру получают путем отбора и культивирования изолированной колонии (потомство одной микробной клетки).

ЭТАПЫ МЕТОДА:

I. Забор материала для исследования.

II. Выделение чистой культуры и ее идентификация.

III. Заключение.

I. Забор материала для исследования

Вид исследуемого материала зависит от цели исследования (диагностика - от больного;

эпиданализ - из внешней среды, продуктов питания, больного и/или бактерионосителя).

II. Выделение чистой культуры включает 3 или 4 этапа

1. Посев материала (после предварительной микроскопии) на чашку с плотной питательной средой (лучше дифференциально-диагностической или селективной) с целью получения изолированных колоний. Посев производят чаще всего методом механического разобщения. В некоторых случаях (например, кровь) материал предварительно засевают в жидкую среду обогащения, с последующим пересевом на чашку с агаровой средой. Иногда до посева проводят селективную обработку материала (с учетом свойств выделяемого микроорганизма; например, обработка кислотой или щелочью для выделения устойчивых бактерий). Культивируют чаще всего при 37 50 0C 18-24 часа . Время культивирования для разных видов бактерий может колебаться.

2(3):

а) Изучение колоний на чашке с агаром по культуральным признакам, отбор наиболее типичных;

б) Приготовление мазков из этих колоний с окраской (по Граму или другими методами);

в) Отсев остатка исследованной колонии на среду накопления и выращивание в термостате при оптимальной температуре.

3(4). Изучение чистоты культуры, полученной на среде накопления. С этой целью готовят мазок, окрашивают (чаще по Граму), микроскопически изучают морфологическую и тинкториальную однородность (в разных полях зрения). 4(5). Идентификация чистой культуры.

III. Заключение

По совокупности признаков в сравнении со свойствами эталонных (типовых) штаммов указывается вид выделенного из материала микроорганизма.

Оценка метода: 

Достоинства: относительно высокая чувствительность и точность, возможность определить численность микробов в исследуемом материале, а также чувствительность к антибиотикам.

Недостатки: относительная длительность, метод дорогостоящий.