- •Частная микробиология
- •Противомикробные мероприятия.
- •Стерилизация
- •Дезинфекция
- •Антисептика
- •Асептика
- •Классификация питательных сред
- •Культуральный метод исследования
- •Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •Микроорганизмов к воздействию внешних факторов.
- •Ферменты-токсины
- •Оксидо-редуктазы
- •Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •Метод серийного разведения антибиотик в бульоне
- •Ускоренные методы
- •Методы генетического анализа микроорганизмов
- •Методы изучения нормальной микрофлоры
- •Диагностика брюшного тифа, паратифов а и в сальмонеллезов.
- •Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза
- •IV этап - Учет результатов и выдача окончательного ответа.
- •Оценка результатов
- •Лабораторная диагностика газовой гангрены
- •Бактериологический метод исследования.
- •Биологический метод исследования.
- •Лабораторная диагностика ботулизма
- •Диагностика столбняка
- •Лабораторная диагностика холеры
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Лабораторная диагностика хламидиозов
- •Лабораторная диагностика
- •1. Бактериоскопический метод - выявление хламидий, их морфологических структур и антигенов в пораженных клетках (клиническом материале).
- •Микоплазмы. Микоплазмозы
- •Выделение вирусов и методы их индикации
- •Принципы диагностики вирусных инфекций
- •Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •Лабораторная диагностика спида
- •Возбудители мадуромикоза
- •Возбудитель пневмоцистоза
- •Возбудитель донованоза
- •Возбудитель язвы бурули
- •Возбудитель мелиоидоза
Метод серийного разведения антибиотик в бульоне
Готовят ряд убывающих разведений антибиотика в пробирках с бульоном (кратные 2). В пробирки добавляют испытуемую культуру Контролем служит пробирка с бульоном и культурой без антибиотика.
Через сутки инкубации в термостате определяют МПК, которая соответствует концентрации препарата в последней пробирке с видимой задержкой роста. Для определения бактерицидного действия из нескольких пробирок с задержкой роста делают высев петлей на сектора чашки Петри с МПА. За бактерицидную концентрацию принимают концентрацию препарата в последней пробирке, высев из которой не дал роста.
Метод серийных разведений в плотной
питательной среде.
Этот метод более чувствителен и точен. Каждый антибиотик испытывают в трех концентрациях (исходя из уровней чувствительности микроорганизмов), которые добавляют к расплавленному и охлажденному агару. Агар с антибиотиками разливают в три чашки Петри (по одной чашке на каждую концентрацию). Контролем служит чашка с агаром без антибиотика. Посев производят петлей или лучше штампом-репликатором, который позволяет одновременно определить чувствительность к трем концентрациям антибиотика 25-50 культур (в зависимости от числа лунок в штампе). Учет производят спустя сутки роста в термостате. Культура считается чувствительной, если на месте посева нет ни одной колонии. Микроорганизмы, рост которых подавлен всеми 3 концентрациями, рассматривают как чувствительные (в этом случае можно применять антибиотик в терапевтической дозе) - 2-й и 3-й концентрациями, как среднечувствительные (антибиотик можно применять только в увеличенной дозе) - 3-й; как умеренно-устойчивые микроорганизмы (антибиотик можно применять только местно), растущие на всех трех концентрациях относят к устойчивым (антибиотик нельзя применять).
Для примера приведем схему определения чувствительности культуры к пенициллину.
|
|
Концентрация, в ед/мл |
|
МПК |
Оценка |
||
|
Антибиотик |
|
|
|
Контроль |
|
чувствительности |
|
|
0.25 |
16 |
128 |
|
в ед/мл |
культуры |
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ПЕНИЦИЛЛИН |
- |
- |
- |
+ |
7, 00, 25 |
Чувствительная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
- |
- |
+ |
16 |
Средне |
|
|
|
|
|
|
|
чувствительная |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
+ |
- |
+ |
128 |
Умеренно |
|
|
|
|
|
|
|
устойчивая |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
+ |
+ |
+ |
> 128 |
Устойчивая |
|
|
|
|
|
|
|
|
(+) - есть рост микроба, (-) - нет роста