130 Активность фермента высокая при остром миелобластном лейкозе, слабая — при остром монобластном и отсутствует — при остром лимфобластном лейкозе.

НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ЭСТЕРАЗЫ. Труп

па ферментов, гидролизующих эфиры карбоно-

вых кислот; отличаются небольшой специфич-

ностью. Локализуются в цитоплазме клеток,

главным образом в лизосомах. Наибольшая

активность обнаружена в моноцитах крови. Для

определения активности ферментов используют

различные субстраты (а-нафтилацетат, нафтол-

AS-ацетат, нафтол-АS-D-хлорацетат, b-нафтил-

ацетат и др.).

а-Нафтилацетат-эстераза (метод Леффле-

ра). П р и н ц и п . Соединение а-нафтилацетата

при определенных рН и температуре под влия-

нием неспецифических эстераз гидролизуется

с образованием свободного нафтола, который

с солями диазония дает цветное окрашивание.

Р е а к т и в ы . 1. Формалин промышленного

производства (40%). 2. а-Нафтилацетат. 3.

Ацетон х. ч. 4. 0,1 М раствор фосфатного буфера

(рН 7,8—8,0). 5. Прочный синий ВВ (или проч-

ный красный ТР). 6. Ядерный краситель (гема-

лаун кислый, метиловый зеленый и пр.). 7. Ин-

кубационная среда: 10 мг а-нафтилацетата, рас-

творенного в 0,2 мл ацетона; 40 мл буферного

раствора (реактив № 4), встряхивают до раст-

ворения; 50 мг соли диазония (реактив № 5),

встряхивают до растворения и фильтруют.

С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е . 1.

Весы. 2. Эксикатор.

Ход о п р е д е л е н и я . Свежеприготовлен-

ные и высушенные на воздухе мазки фиксируют

в парах формалина 4 мин (фиксированные

препараты можно сохранять в холодильнике

несколько недель или 2 сут при комнатной тем-

пературе). Инкубируют в инкубационной среде

при комнатной температуре 30 мин. Промывают

в проточной воде (2—3 мин). Докрашивают

кислым гемалауном 8 мин. Промывают дистил-

лированной водой 15 мин. Активность фермента

выявляется в виде коричнево-черных (при упот-

реблении прочного синего) или красно-коричне-

вых (при употреблении прочного красного) гра-

нул в цитоплазме клеток.

Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы . В моноци-

тах периферической крови активность фермента

содержится в виде мелкой обильной зернистости.

СЦК в моноцитах составляет 0,95±0,01. Не-

большое количество лимфоцитов (18,0±0,4 %)

содержит активность фермента в виде единич-

ных гранул в цитоплазме; в тромбоцитах пери-

ферической крови фермент выявляется в виде

мелких гранул, в сегментоядерных нейтрофилах

его активность ничтожна.

Среди костномозговых элементов наиболь-

шую активность имеют промиелоциты, миело-

циты, мегакариоциты, моноциты, ретикулярные

клетки. В моноцитах периферической крови и

костного мозга с помощью двойной инкубации

и добавления фторида натрия (NaF) в коли-

честве 1,5 мг/мл показан NaF — чувствитель-

ный фермент.

К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е . Снижение

активности фермента в моноцитах и увеличение

в лимфоцитах обнаружено при диффузных пора

жениях печени. Значительная активность фер-

мента выявлена в миеломных клетках при плаз-

моцитоме, в властных клетках при остром мо-

нобластном (гистиомонобластном) лейкозе и

при промиелоцитарном лейкозе, в то время как

при остальных формах острых лейкозов актив-

ность фермента в бластных клетках ничтожна.

При хроническом лимфолейкозе активность фер

мента в лимфоцитах резко снижена. Фермента-

тивная активность нейтрофилов при острых лей-

козах, особенно при остром миелобластном,

снижена.