- •Микробиологическая диагностика сепсиса
- •Сепсис - инфекционная заболевание,
- •Сепсис может быть вызван различными микроорганизмами преимущественно бактериальной природы (стафилококки, стрептококки, пневмококки, менингококки,
- •В последние годы реже стали выделяться грамположительные кокки и чаще грамотрицательные палочки, в
- •Возникновение сепсиса обусловлено не столько свойствами самого возбудителя, сколько состоянием макроорганизма, в частности
- •Для каждого возбудителя характерны свои особенности эпидемиологических предпосылок. Можно выделить лишь случаи внутрибольничной
- •Предположительная этиология сепсиса в зависимости от локализации первичного очага:
- •Брюшная полость
- •После спленэктомии
- •Микробиологическая диагностика сепсиса основана на исследовании крови, то есть на установлении бактериемии. Бактериемия
- •В то же время, оценка клинической значимости полученных результатов посева крови является весьма
- •Существуют следующие показания для посева крови:
- •Объем засеваемой крови - один из наиболее важных моментов при микробиологической диагностике бактериемии.
- •Соотношение крови и питательной среды во флаконе – это также немаловажный фактор. Оптимальное
- •Флаконы с засеянной в них кровью (гемокультура) следует доставлять в лабораторию немедленно, а
- •Инструкции для процедурной медсестры по забору крови для микробиологического исследования:
- •Надеть на руки стерильные водонепроницаемые перчатки.
- •Флаконы с кровью следует доставить в лабораторию немедленно. Транспортировка флаконов должна осуществляться только
- •Стафилококк золотистый ( Staphylococcus aureus) —
- •Антибиотикоустойчивые формы
- •Бактерия имеет около 2600 генов и 2.8 миллиона пар оснований в ДНК в
- •Метициллинрезистентный стафилококк — бактерия, вызывающая сложно вылечиваемые заболевания у людей, такие как заболевания
- •Метициллинрезистентный стафилококк адаптировался к выживанию в присутствии метициллина, диклоксациллина и оксациллина. Наиболее часто
- •Метициллинрезистентный стафилококк часто относят к возбудителям внебольничных метициллинрезистентных стафилококковых инфекциий или медико-санитарносвязанных метициллинрезистентных
- •Лабораторная диагностика
- •Нaemophilus influenzae
- •. Образцы крови, помещенные во флаконы с двухфазной или жидкой средой, инкубируют в
- •После промежуточного субкультивирования следует продолжить инкубирование флаконов. Через 24 ч инкубации независимо от
- •H.influenzae отличается высокой прихотливостью при культивировании на искусственных питательных средах. Обязательным условием для
- •Pseudomonas aeruginosa - это грамотрицательная подвижная бактерия палочковидной формы, является облигаторным (строгим) аэробом.
- •Чрезвычайно устойчива к большинству антибиотиков за счет барьера, создаваемого липосахаридами внешней мембраны, а
- •По данным CDC (The Centers for Disease Control and Prevention) - Агентства по
- •В микробиологическом отношении синегнойная палочка нетребовательна, растет на различных искусственных средах (ЭНДО, Клиглера,
- •Имеются родственные с P. aeruginosa МО, такие как S. maltophilia и B. cepacia,
Антибиотикоустойчивые формы
С момента открытия пенициллина и активного его использования против стафилококка, под давлением естественного отбора в популяции закрепилась мутация, в связи с которой, в настоящее время, большинство штаммов устойчивы к этому антибиотику, благодаря наличию у золотистого стафилококка пенициллиназы — фермента, расщепляющего молекулу пенициллина. Для борьбы с бактерией широко применяют метициллин — химически модифицированный пенициллин, который пенициллиназа не разрушает. Но сейчас встречаются штаммы устойчивые и к метициллину, в связи с чем штаммы золотистого стафилококка делят на
метициллин-чувствительные и метициллин-устойчивые штаммы золотистого стафилококка (MRSA),
также выделяются ещё более устойчивые штаммы: ванкомицин- резистентный (VRSA) и
гликопептид-резистентный (GISA).
Бактерия имеет около 2600 генов и 2.8 миллиона пар оснований в ДНК в своей хромосоме, длина которой 0.5-1.0 мкм.
В 2008 году Федеральное агентство по охране окружающей среды США (US EPA) установило активное выраженное подавляющее воздействие на метициллин-устойчивые штаммы стафилококка золотистого поверхностей из меди и сплавов меди
Метициллинрезистентный стафилококк — бактерия, вызывающая сложно вылечиваемые заболевания у людей, такие как заболевания крови, пневмонии. Так же его называют: золотистый стафилококк с множественной лекарственной устойчивостью, или оксациллинустойчивый золотистый стафилококк. Метициллинрезистентный стафилококк — любой штамм бактерии золотистого стафилококка, который устойчив к большой группе антибиотиков — бета-лактамов (включают в себя пенициллины и цефалоспорины).
Метициллинрезистентный стафилококк адаптировался к выживанию в присутствии метициллина, диклоксациллина и оксациллина. Наиболее часто именно с ним связанны внутрибольничные (нозокомиальные) инфекции. В больницах, больные с открытыми ранами и с ослабленной иммунной системой подвергаются большему риску инфицирования, чем другие пациенты. Персонал больницы, который не соблюдает надлежащие санитарные правила, может передавать бактерии от пациента к пациенту. Посетителям с инфекцией метициллинрезистентного стафилококка рекомендуется следовать протоколу инфекционной больницы: использовать перчатки, халаты и маски при наличии показаний. Посетители, в том числе медицинские работники, которые не следуют таким протоколам, способствуют распространению бактерии в столовых, ванных комнатах, лифтах и в различных других помещениях.
Метициллинрезистентный стафилококк часто относят к возбудителям внебольничных метициллинрезистентных стафилококковых инфекциий или медико-санитарносвязанных метициллинрезистентных стафилококковых инфекций, хотя это различие носит сложный характер. Первые случаи внебольничных метициллинрезистентных стафилококковых инфекций описали в середине 1990-х годов в Австралии, Новой Зеландии, Соединенных Штатов, Соединенного Королевства, Франции, Финляндии, Канады, особенностью было то, что заболевали люди, которые не пребывали в медицинских учреждениях. Внебольничные новые штаммы метициллинрезистентного стафилококка, быстро стали самой распространенной причиной кожной инфекции среди лиц, обращающихся за медицинской помощью в городских районах Соединенных Штатов. Эти штаммы также часто вызывают инфекции кожи у спортсменов, заключенных и солдат. Однако во многих случаях заболевали и дети, которые нуждались в госпитализации. От метициллинрезистентной стафилококковой инфекции умирает около 18000 американцев ежегодно.
Лабораторная диагностика
Выявление вспышек метициллинрезистентной стафилококковой инфекции проводится диагностическими микробиологическими и референтными лабораториями. Существуют экспресс-методы, позволяющие определить вид и охарактеризовать штамм возбудителя. Такие методы как ПЦР в реальном времени или количественный ПЦР все чаще применяются в клинических лабораториях для быстрого обнаружения и идентификации штаммов метициллинрезистентного стафилококка.
Другой широко используемый лабораторный тест — это тест латекс- агглютинации, позволяющий определить β-лактам-резистентный пенициллинсвязывающий белок (англ.) PBP2a, который придает золотистому стафилококку устойчивость к метициллину и оксациллину.
Нaemophilus influenzae
Представляет собой мелкую грамотрицательную коккобациллу (0,3 мкм в диаметре), для своего роста требует наличия содержащихся в эритроцитах термолабильного фактора V (НАД) и термостабильного фактора X (гемин).
По культуральным свойствам (продукция индола, активность уреазы и др.) разделяется на 7 биотипов (от I до VII). Часть выделенных со слизистых оболочек палочек инфлюэнцы имеет капсулы. Известно 6 антигенно различающихся капсульных типов, обозначаемых от А до F. Наибольшее значение в патологии человека имеет Haemophilus influenzae type b. Данный серотип отличается от других наличием 8 генов, ответственных за образование фимбрий, которые способствуют улучшению адгезивных и пенетрантных свойств. Также, в отличие от других серотипов, гемофилюс инфлюэнцы типа b – единственно способная проникать в кровеносное русло.
. Образцы крови, помещенные во флаконы с двухфазной или жидкой средой, инкубируют в течение 18–24 ч при температуре 35–37оС. Из- за слабого роста гемофильной палочки в жидкой среде может отсутствовать выраженное помутнение среды. Поэтому рекомендуется проводить "слепое" субкультивирование или приготовление и окрашивание мазка через 6–12 ч после начала инкубации из флакона без видимого роста. Предпочтение отдается субкультивированию, так как разрешающая способность световой микроскопии (104–105 КОЕ/мл) незначительно превосходит плотность, при которой становится видимым рост во флаконе (106– 107 КОЕ/мл).
Для субкультивирования асептически забирается несколько капель предварительно тщательно перемешанной среды и распределяется по поверхности шоколадного агара. Чашки инкубируются при температуре 35–37оС и 5–10% СО2 в течение 24–48 ч.