22.5. Исследование минерального состава кости

При действии на кость соляной кислоты минеральная часть кости растворяется, остаток состоит в основном из белков. Кости заливают 5%-ным раствором соляной кислоты и остав­ляют на сутки или более. Затем солянокислую вытяжку, содер­жащую минеральные соли, сливают, органическую часть кости (оссеин) заливают водой. Органическую часть кости, представляющую собой в основ­ном костный коллаген, вынимают из воды, измельчают ножом и промывают длительное время водой. Затем кипятят с водой и получают, поскольку был исключен процесс золки, техническую желатину. В солянокислой вытяжке, полученной при мацерации кости, содержатся кальций, магний, железо, фосфорная кислота, калий, натрий, фтор. Больше всего содержится кальция и фосфорной кислоты.

22.5.1. Реакция на кальций

Открытие кальция основано на нерастворимости щавелево­кислого кальция, образующегося при воздействии на раствори­мые соли кальция щавелевокислым аммонием. В солянокислой вытяжке кальций находится в виде хлористого кальция

CaCl₂ + (NH₄)₂C₂O₄ = CaC₂O₄ + 2NH₄Cl.

Реактивы и материалы: солянокислая вытяжка, 5% раствор щавелево-кислого аммония.

Оборудование и посуда: пробирки, пипетки.

Порядок выполнения работы

В пробирку с 5 мл солянокислой вытяжки приливают 2—3 мл 5%-ного раствора щавелево-кислого аммония, встряхивают и на­блюдают за образованием белого осадка щавелевокислого каль­ция.

22.5.2. Реакция на магний

Открытие магния основано на образовании двойной фосфорноаммонийной магниевой соли в фильтрате после удаления каль­ция в виде щавелевокислой соли (СаС₂О₄ отфильтровывают). Так как магний бывает связан главным образом с фосфорной кислотой, то обычно достаточно добавить только гидрат аммония

MgHPO₄ + NH₄OH → MgNH₄PO₄ + H₂O.

В фильтрате после удаления кальция в виде щавелевокислого кальция (СаС₂О₄) и магния в виде фосфорноаммонийномагниевой соли (MgNH₄PO₄) открывают оставшуюся фосфорную кислоту. Для этого к фильтрату добавляют магнезиальную смесь, выпадает осадок (MgNH₄PO₄).

Реактивы и материалы: для приготовления магнезиальной смеси берут 11 г MgCl₂, добавляют 14 г NH₄Cl, затем 25 мл NH₄OH (плотность 0,91) и 175 мл воды.

Оборудование и посуда: пробирки, водяная баня.

Порядок выполнения работы

Наличие фосфорной кислоты в полученном осадке проверяют молибденовокислым аммонием (NH₄)MoO₄ Осадок растворяют в небольшом количестве 10%-ного раствора азотной кислоты и нагревают с 3 мл (NH₄)MoO₄ на водяной бане. В присутствии фосфорной кислоты после охлаждении выпадает осадок фосфорномолибденовокислого аммония.

Работа № 23. Биохимия мышечного сокращения

23.1. Разделение белков мышечной ткани

В солевой вытяжке из мышечной ткани содержатся следую­щие белки: миоген, миоальбумин, актомиозин, глобулин X и миоглобин. Миоген, миоальбумин и миоглобин можно извлекать также водой.

При разбавлении солевой вытяжки водой в осадок выпа­дают актомиозин и глобулин X.

Реактивы и материалы: дистиллированная вода, солевая вытяжка, кристаллический хлористый натрий, насыщенный раствор сернокислого аммония (¹/₃ насыщения), насыщенный раствор сернокислого аммония (²/₃ насыщения).

Оборудование и посуда: пробирки, капельницы, пипетки, стеклянная палочка, химический стаканчик, воронка, фильтровальная бумага.