- •1. Белковые молекулы как основа жизни. Биологические функции белков.
- •2. История изучение белков. Теория строения белков Мульдера. Пептидная теория строения белков.
- •3. Аминокислоты, входящие в состав белков, их строение, классификации, свойства. Понятие о заменимых и незаменимых аминокислотах.
- •4. Молекулярная масса белков. Размеры и форма белковых молекул. Белки глобулярные и фибриллярные, свойства, представители.
- •5. Физико-химические свойства белков: ионизация, гидратация, растворимость. Факторы стабилизации белков в коллоидном состоянии.
- •6. Белок как амфотерный коллоид. Заряд белковой молекулы, факторы, его определяющие.
- •7. Понятие об изоэлектрической точке и изоэлектрическом состоянии белков. Белки нейтральные, кислые, основные.
- •8. Понятие о дифильности белков. Гидратация белков и факторы, ее определяющие.
- •9. Типы осадочных реакций на белки. Механиз обратимого осаждения. Дробное высаливание, условия высаливание альбуминов и глобулинов плазмы крови.
- •10. Необратимое осаждение белков. Механизм и признаки денатурации белков. Использование реакций необратимого осаждения белков в клинической практике.
- •11. Уровни структурной организации белков. Первичная структура, типы связей, стабилизирующих первичную структуру, характеристика первичной структуры. Варианты первичной структуры.
- •12. Чередование радикалов аминокислот как основа многообразие физико-химических свойств и функций белков.
- •13. Зависимость биологических свойств белков от первичной структуры. Видовая специфичность первичной структуры, ее закономерности.
- •14. Расшифровка первичной структуры белков, используемые методы, значение расшифровки структуры. Значение расшифровки первичной структуры.
- •15. Вторичная структура белка и ее варианты. Роль водородных связей в стабилизации вторичной структуры. Характеристика а-спирали и в-структуры. Ломанная спираль.
- •16. Понятие о третичной структуре белков, разновидности. Связи, характерные для третичной структуры. Зависимость биологических свойств белков от третичной структуры.
- •17. Мозаичность третичной структуры белков. Понятие о фолдинге, роль шаперонов в этом процессе. Лабильность пространственной структуры белков и их денатурация.
- •19. Четверичная структура белков. Протомеры и субъединицы. Зависимость биологической активности от четверичной структуры белков.
- •20. Особенности строения и функционирования олигомерных белков на примере гемоглобина. Кооперативные изменения конформации протомеров на примере гемоглобина.
- •21. Доменная структура и ее роль в функционировании белков
- •23. Активный центр белка и специфическое взаимодействие белка с лигандом
- •28. Классификация белков по химическому составу. Понятие о гомо- и гетеро-
- •29. Альбумины и глобулины, краткая характеристика
- •30. Коллагеновые белки. Особенности аминокислотного состава, строения,
- •31. Сложные белки. Определение, классификация по простетической группе.
- •32. Классификация белков по семействам. Иммуноглобулины, особенности строения, избирательность взаимодействия с антигеном. Понятие об антигенсвязывающих участках иммуноглобулинов, их многообразие.
- •33. Классы иммуноглобулинов, особенности строения каждого класса, биологические функции.
- •42. Принцип и использование метода ионообменной хроматографии.
- •43. Понятие об афинной хроматографии, значение метода.
- •44. Гельфильтрация, принцип, значение метода.
- •45. Электрофорез как метод разделения белков. Принцип, значение для клиники.
- •46. Нуклеопротеины. Химический состав, локализация в клетке. Общая характеристика белковых и нуклеопротеидных комплексов.
- •47. Типы нуклеиновых кислот. Химический состав днк и рнк. Молекулярная
- •48. Химический состав мононуклеотидов днк, уровни структурной организации днк. Первичная структура днк, ее закономерности. Вторичная структура днк.
- •49. Строение хромосом. Уровни компактизации днк в хромосомах, понятие о нуклеосомной частице и нуклеосоме.
- •50. Роль гистоновых белков в компактизации молекул днк в хромосоме.
- •51. Рнк, химический состав, особенности структурной организации, типы рнк,
- •52. Липопротеины. Химический состав, строение, представители, биологическая роль.
- •53. Фосфопротеины, химический состав, представители, биологическая роль.
- •54. Хромопротеины, химический состав, представители, биологическая роль.
- •55. Гемсодержащие хромопротеины. Основные представители, биологическая роль.
- •56. Металлопротеины, многообразие представителей, роль в процессах жизнедеятельности.
- •57. Гликопротеины, понятие, химический состав. Особенности строения углеводной части гликопротеинов. Представители. Биологические функции.
42. Принцип и использование метода ионообменной хроматографии.
Метод основа на разделении белков, различающихся суммарным зарядом при определенных значениях рН и ионной силы раствора. При пропускании раствора белков через хроматографическую колонку, заполненную твердым пористым заряженным материалом, часть белков задерживается на нем в результате электростатических взаимодействий.
В качестве неподвижной фазы используют ионообменники - полимерные органические веществ, содержащие заряженные функциональные группы.
43. Понятие об афинной хроматографии, значение метода.
Это наиболее специфичный метод выделения индивидуальных белков, основанный на избирательном взаимодействии белков с лигандами, прикрепленными к твердо мы носителю. В качестве лиганда может быть использован субстрат или кофермент, если выделяют какой-либо фермент, антигены, для выделения антител и т.д. Через колонку, заполненную иммобилизированным лигандом, пропускают раствор, содержащий смесь белков. К лиганду присоединяется только белок, специфично взаимодействующий с ним; все остальные белки выходят с элюатом. Белок, адсорбированный на колонке, можно снять, промыв ее раствором с измененным значением рН или измененной ионной силой.
44. Гельфильтрация, принцип, значение метода.
Метод разделения белков с помощью гель-фильтрационной хроматографии основан на том, что вещества, отличающиеся молекулярной массой, по-разному распределяются между неподвижно и подвижной фазами. Хроматографическая колонка заполняется гранулами пористого вещества. В структуре полисахарида образуются поперечные связи и формируются гранулы с "порами", через которые легко проходят вола и низкомолекулярные вещества. В зависимости от условий модно формировать гранулы с разной величие ой "пор".
Неподвижная фаза - жидкость внутри гранул, в которую способны пронизать низкомолекулярные вещества и белки с небольшой молекулярной массой. Смесь белков, нанесенную на хроматографическую колонку, вымывают, отпуская через колонку растворитель. Вместе с фронтом растворителя движутс и самые крупные молекулы.
Более мелкие молекулы диффундируют внутрь гранул сефадекса и на некоторое время попадают в неподвижную фазу, в результате чего их движение задерживается. Величина пор определяет размер молекул, способных проникают внутрь гранул.
45. Электрофорез как метод разделения белков. Принцип, значение для клиники.
Метод основа на том, что при определенном значении рН и ионной силы раствора белки двигаются в электрическом поле со скоростью, пропорциональной их суммарному заряду. Белки, имеющие суммарный отрицательный заряд, двигаются к аноду (+), а положительно заряженные белки - к катоду (-).
Электрофорез проводят на различных носителях: бумаге, крахмальном геле, полиакриламидном геле и др. В отличии от электрофореза на бумаге, где скорость движения белков пропорциональная только из суммарному заряду, в полиакриламидном геле скорость движения белков пропорциональна их молекулярным массам.
46. Нуклеопротеины. Химический состав, локализация в клетке. Общая характеристика белковых и нуклеопротеидных комплексов.
Нуклеопротеины состоят из белков и нуклеиновых кислот. Последние рассматриваются как простетические группы. В природе обнаружено 2 типа нуклеопротеинов, отличающихся друг от друга по составу, размерам и физико-химическим свойствам,– дезоксирибонуклеопротеины (ДНП) и рибонуклеопротеины (РНП). ДНП преимущественно локализованы в ядре, а РНП – в цитоплазме. В то же время ДНП открыты в митохондриях, а в ядрах и ядрышках обнаружены также высокомолекулярные РНП.