- •3.3.9. Цитохимические исследования
- •Эритроцитов
- •Фетальный гемоглобин. Метод Ветке.
- •3.4.5. Цитохимические исследования
- •35 Мл буферного раствора.
- •1969, № 1, С. 377—383; Шубич м. Г., Нестеро-
- •Пероксидаза (миелопероксида-
- •5 П/р в. В. Меньшикова 129
- •Кислая а-нафтилацетат-эстераза.
- •Нафтол-as ацетат-эстераза. Метод
- •Нафтол-as d-хлорацетат-эстера-
- •Метод Пигаревского (модифицированный).
- •Метод с бромфеноловым синим (по м. Г. Шу-
- •Окраска судаком 111 (метод Гольдмана).
- •0,9 % Раствора хлорида натрия. 2. 0,1 % вод-
Окраска судаком 111 (метод Гольдмана).
П р и н ц и п . Растворение жиров и окраска су-
даном I I I в оранжевый цвет.
Р е а к т и в ы . 1. Формалиновый спирт
(1 часть формалина и 4 части 96% спирта).
2. 70 % этиловый спирт (к 100 мл 96 % спирта
прибавить 39,18 мл дистиллированной воды).
3. сх-Нафтол. 4. Раствор Судана (к 100 мл 70 %
спирта добавляют 20 мл дистиллированной
воды, 1,2 г а-нафтола и в избытке судан III.
Раствор кипятят в течение 10 мин и фильтруют).
5. Краситель Романовского — Гимзы.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е не
требуется.
Х о д о п р е д е л е н и я . Мазки крови фик-
сируют в формалиновом спирте в течение 1 —
3 мин. Красят в растворе Судана I I I в течение
10 мин. Помещают в 70 % этиловый спирт на
1 мин. Докрашивают красителем Романовско-
го — Гимзы или гематоксилином в течение 5—
10 мин. Промывают дистиллированной водой.
Липиды выявляются в виде оранжевых зерен.
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы . В мазках
периферической крови липиды содержатся в ци-
топлазме нейтрофилов в виде обильной зернис-
тости. Большинство нейтрофилов (69—80%) у
здоровых людей красятся интенсивно (+ + +).
18—36 % дают окраску средней интенсивности
( + + ) и 10% слабо окрашены ( + ). СЦК
липидов в неитрофилах 2,65,033. В мазках
костного мозга в миелобластах обнаружено не-
большое содержание липидов, в промиелоцитах
их больше и по мере созревания нейтрофилов
содержание липидов увеличивается.
К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е . Повыше-
ние содержания липидов в неитрофилах наблю-
дается при острых лейкозах и обострении хрони-
ческих лейкозов. При острых лейкозах липиды
в властных клетках обнаружены у больных при
миелобластном и монобластном вариантах и не
выявлены при лимфобластном остром лейкозе.
При недифференцированном остром лейкозе
властные клетки лишь в небольшом количестве
(2,2Ѓ}0,82 %) содержат липиды. Уменьшение
липидов в неитрофилах выявлено при ревматиз-
ме, воспалительных процессах.
Л и т е р а т у р а . Роскин Г. И., Левин-
сон Л. Б. Микроскопическая техника.— М.,
1957, с. 257.
ТЕСТ ВОССТАНОВЛЕНИЯ НИТРОСИНЕ-
ГО ТЕТРАЗОЛИЯ (НСТ-тест) дает возмож
ность судить о фагоцитарной и метаболической
функции гранулоцитов по образованию в цито-
плазме гранул формазана.
Метод Парка с соавт. в модификации
Ю. И. Бажоры И соавт. П р и н ц и п . Погло-
щение гранулоцитами нитросинего тетразолия
и восстановление его в формазан, выявляемый
в виде гранул синего цвета.
Р е а к т и в ы . 1. Гепарин (20—25 ЕД/мл).
2. 0,15 М фосфатный буфер рН 7,2. 3. 0,2 % рас-
твор нитросинего тетразолия. 4. Изотонический
раствор хлорида натрия. 5. Метанол. 6. 2 % рас-
твор метилового зеленого.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е . 1.
Термостат. 2. Полистироловые пластинки (при-
меняемые для РТГА).
Х о д о п р е д е л е н и я . В лунку пластинки
вносят 0,025 мл раствора гепарина и 0,1 мл кро-
ви, 0,05 мл фосфатного буфера и 0,05 мл рас-
твора тетразолия. Содержимое лунки перемеши-
вают с помощью пипетки. Пластинку накры-
вают фильтровальной бумагой, смоченной изо-
тоническим раствором хлорида натрия и стек-
лянной пластинкой соответствующих размеров.
Для создания влажной камеры стеклянную пла-
стинку прижимают с помощью пружинных за-
жимов. Инкубируют в термостате при 37 °С в те-
чение 15 мин, затем при комнатной температуре
в течение 15 мин. После каждого этапа инку-
бации смесь перемешивают пастеровской пипет-
кой (продувая воздух). Готовят мазки, высуши-
вают, фиксируют метанолом и докрашивают
метиловым зеленым.
В о с п р о и з в о д и м о с т ь м е т о д а . Ко-
эффициент вариации у здоровых 9,2 %, у боль-
ных — 6,6 % (не превышает допустимый).
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы . У здоро-
вых гранулы формазана обнаруживают в 7,2 Ѓ}
+ 1,2% нейтрофилов.
Метод Стюарта и соавт. в модификации
Б. С. Нагоева. П р и н ц и п см. Метод Парка.
Р е а к т и в ы . 1. Гепарин — 10 ЕД в 1 мл