2.3. Очистка скелетов зверьков при разном способе консервации материала

В настоящее время в практике используются несколько способов очистки скелетных структур от мягких тканей:

- рутинный, заключающийся в срезании мышц и соединительных тканей с костей предварительно отваренных тушек;

- биологический, заключающийся в использовании лабораторных колоний различных беспозвоночных (муравьев, кожеедов и др.); использование опарышей допускается при очистке любых частей скелета, но не черепа.

- биохимический, заключающийся в применении различных ферментов, например, папаина, стимулирующего разложение мышечных белков;

- химический, заключающийся в применении неорганических соединений для разложения мышц и соединительных тканей.

Все способы имеют свои достоинства и недостатки, связанные с длительностью процесса очистки, необходимостью создавать особые физико-химические условия среды, иметь очищаемые объекты только определенного качества и др. Ниже приводится достаточно простой и относительно быстрый способ обработки массовых (до несколько тысяч) сборов мелких млекопитающих, независящий от способа фиксации исходного материала (Ильяшенко, Онищенко, 1999). Его применение позволило создать остеологическую коллекцию скелетов мелких млекопитающих, включающую около 80 000 единиц хранения, представленную черепами и комплектами элементов посткраниального скелета (кости поясов и свободных конечностей).

В лабораторных условиях тушки животных без шкурки и внутренностей варят в водяной бане или другой подходящей ёмкости. Для этого тушки соответствующим образом должны быть этикетированы и завернуты в марлю. Чтобы при кипячении тушки не разворачивались и не бились об стенки емкости и нагревательный элемент, их следует поместить в тканевый мешочек. Как вариант, каждую этикетированную тушку для отваривания помещают в отдельную пробирку.

Исходя из практического опыта очистки скелетов, можно порекомендовать комплекты номерков со сквозной нумерацией, изготовленные заранее из тонкого алюминиевого листа с выдавленным шариковой ручкой порядковым номером, или номерки из фотопленки с процарапанным иглой номером. Использовать бумагу для этикеток нежелательно, так как она при кипячении размокает и обозначения становятся неразборчивыми. Разовая загрузка тушек для обработки не должна превышать 100 экземпляров. Лучше всего, если количество одновременно сваренных тушек соответствует емкости штатива (-ов), куда впоследствии будут помещаться пробирки с частями тушек.

Время варки зависит от фиксатора, применявшегося при сборе материала. Если экземпляры свежеотловленные, высушенные или хранились в солевом растворе или сухой соли, то время кипячения составляет 15 минут. Если при фиксации применялся спиртовый раствор, то время кипячения увеличивается до 20 минут. Практика показывает, что даже при небольшом сроке хранения тушек в формалине кости посткраниального скелета деформируются, от заформалиненных экземпляров удается получить только череп удовлетворительного качества. Его очищают без предварительной варки.

После варки череп отделяют от тушки и очищают от мышц традиционными методами. Мозг у мелких млекопитающих обычно вытекает во время варки, поэтому очищать череп от мозга не всегда целесообразно. Череп нужно поместить в емкость для временного хранения, которую соответствующим образом маркируют, чтобы в дальнейшем объединить с вычищенным посткраниальным скелетом. Оставшуюся часть тушки для окончательной очистки скелета животного помещают в пробирку и заливают 10% раствором NaOH. Если тушки варились в пробирках, то перед заливкой щелочи из них удаляют остатки воды.

При заливании щелочного раствора в пробирки важно проследить, чтобы в них не оставалось воздушных прослоек, из-за которых нарушается равномерность обработки материала. Время выдержки в щелочном растворе при комнатной температуре (20° С) – 12 часов. Как правило, за это время происходит полное или почти полное растворение мышц. Для ускорения процесса очистки скелетов можно повысить температуру до 50-60° С, поместив пробирки в сосуд с горячей водой или термостат, или периодически встряхивать их.

Для окончательной очистки содержимое пробирки выливают в неглубокую посуду с белым непрозрачным дном и осторожно промывают проточной водой. Лучше всего для этой цели использовать обычные фарфоровые тарелки. При этом остатки мышц и внутренних органов вымываются водой, а кости скелета выпадают в осадок. После удаления излишков воды промытые кости помещают на фильтровальную бумагу или в бумажный вкладыш спичечного коробка. После обсыхания скелет помещают вместе с соответствующим черепом в пробирки или коробочки для длительного хранения.

Такой способ очистки посткраниальных скелетов занимает меньше времени, чем очистка черепа. Он может быть применен при очистке скелетов насекомоядных, летучих мышей, мелких куньих. При очистке скелета мышевидных грызунов, учитывая истонченность краев ряда костей (лопатка, безымянные кости), необходима коррекция этого метода по времени выдержки, температуре и концентрации щелочного раствора.