50.Факторы патогенности стафилококков.

Ппатогенные стафилококки синтезируют и секретируют высокоактивные экзотоксины и ферменты. К гематоксинам относятся альфа-бетта-гемма-и дельта-гемолизины. Все стафилококковые гемозизины способны лизироватьмембарны клеток эукариотов. Альфа-гемолизин вызывает лизис эритроцитов овец, свиней, собак, обладает летальным и дерматонекротическим действием, разрушает лейкоциты, агрегирует и лизируеттромбоциты.Бета-гемолизин лизирует эритроциты человека, овец, крс. Летален для кроликов. Гамма-гемолизин обнаруживают у штаммов, выделенных от человека. Дельта-гемолизин вызывает лизис эритроцитов человека, лошадей, овец, кроликов, ращрушает лейкоциты. Дейкоцидин-негемолитический экзотоксин, вызывает дегрануляию и разрушение лейкоцитов. Энетротоксины-термостабильные полипептиды, образуются при размножении энтеротоксигенных штаммов стафилококков в питательных средах. Энтеротоксины вызывают пищевые отравления у человека, к ним чувствительны кошки особенно котята. К факторам патогенности стафилококков таке же относятся: коагулаза(свертвыает плазму крови), гиалуронидаза, фибринолизин, днказа. К стафилококкам чувствительны лошади, крс и мрс, свиньи, утки , гуси, куры, индейки, кролики и белые мыши.

51.Лабораторная диагностика рожи свиней.Возбудитель-бактерияErysipelothrixrhusiopathiae.тонкая прямая(слегка изогнутая)палочка.не подвижна.нет спор и капсул.грамм +.в лаб.направляют труп животного целиком или сердце,печень,селезенку,почку,трубчатую кость.при подозрении на хроническое-сердце обязательно.выявляют при помощи РА,РИФ.микроскопия:мазки-отпечатки окрашивают по грамму.в положит.в мазках грамм+ палочки одиночно,попарно,сколениями.при хроническом-длинные переплетающиеся нити.Посев на питат.среды:из крови св мпб,мпа,бульон Хоттингера.посев инкубируют приt37,в течении 18-24ч.при отсутствии роста еще сутки.выделеную культуру иденфицируют по морфологич.сво-вам,а так же в реакции аглютинации с позитивной сывороткой.биохимич.активность определяют на средах гисса с глюкозой,сахарозой,манитом.одновременно определяют образование сероводорода и каталазы.Реа-ция аглютинации:РА с гипериммуной сывороткой.на предмет.стекло капля сыворотки в разведении 1:50,петлей вносят суточную агаровую культуру,чательно растирают.в положительном случии аглютинация наступает быстро,аглютинат имеет вид плотных мелких комочков.Культуру выделяющую сероводород,не образующую каталазу,разлагающую глюкозу,не ферментирующую маннит,сахарозу,дающую +РА относят к возбудителю рожи.для обнаружения рожистых бактерий в пат.материале,индификации выделенныхкультур используют метод флюоресцирующих антител.

52.Лабораторная диагностика листериоза человека и животных.видListeriamonocytogenesполиморфная палочка,в мазках одиночно,V.нет спор и капсул.Бактериологическая:диагноз на основании выделения культуры листерий из пат.материала.в лаб,.отправляют трупы мелких,или голову(мозг)паринхиматозные органы,абортированый плод и его оболочку.для прижизненой диагностики кровь или сыворотку с целью серологического исследования,истечения из половых органов обортившихся, молоко из пораженных долей выменипроводят микроскопическое исследование мазков-отпечатков которые по грамму окрашивают,а так же с использованием флюоресцирующих антител.из органов и мозга обильные посевы на питат.среды,на кровяной агар,на селективные среды.посевы инкубируют приt37,ежедневно просматривая 3-4 дня,если нет роста – 2 нелели.выделеные культуры иследуют на подвижность,изучают сво-ва на средах Гисса,проба на каталазу.ставят капельную РА на стекле с поливалентной листериозной аглютинирующей сывороткой.спецефич.св-ва проверяют также с помощью конъюктивальной пробы на морских свинках.конъюктивальная проба:на конъюктиву морской свинки наносят 2 капли испытуемой культуры.на 2-4 сутки вирулентные листерии вызывают гнойный конъюктивит.Серологическая:сыворотку иследуют на РА,РСК.для РА применяют 2 антигена. РА + если при наличии аглютинации с оценкой не менее чем два креста в разведении сыворотки 1:200 для овец,лошадей,коз, для крс 1:400, кролики 1:50.

53.Дифференциация возбудителя рожи свиней от возбудителя листериоза.Подвижность:Листерии подвижны,рожа не подвижны.Проба на каталазу:листерия положительная,рожа отрицательная.Салицин:листерия разлогает,рожа не разлогает.Индикаторные среды:листерия обесцвечивает,рожа не обесцвечивает.РА с позитивной листериозной сывороткой:листерия положительная,рожа отрицательная.Конъюктивная проба на морских свинках:листерия положительная,рожа отрицательная.

54.Лабораторная диагностика туберкулеза животных и человека.Для людейMycobacteriumtyberculosis.Для животныхMycobacteriumbovis.микробактерия кислото-спирто-щелочиустойчивая.не подвижна.нет спор и капсул.в чистом виде выделить трудно.пат. материал-пораженые органы и ткани,кровь,эксудат,гной,молоко,мочу,фекалии,почву,воду,соскоб с различных обьектов животновод.помещений.для освобождения от посторонней микрофлоры материал обрабатывают 10% р-ром серной кислоты.для обработки жидкого,полужидкого и соскобов используют метод флорации(материал взбалтывают в колбе с углеводородами)

55.Дифференциация микобактерий.Микроскопический метод:бычийвид-длина 1,5 толщина до 0,5.так же встречаются в виде овоидных и коковидных форм.палочковидные чаще прямые или изогнутые,с округлыми концами и зернистостью.человческий вид-более длинные,тонкие.птичьи и мышиные-короткие и длинные полиморфные палочки.Культуральный метод:вирулентные культуры бычьего вида на питат.средах растут очень медленно в видк сферических гладких и шероховатых колоний,чаще в виде сухих крошек.человеческого-сфеерические колонии,встречаютсяR,Sформа.птичьи-свежевыделенные растут быстрее.рост хорактерезуется образованием гладких,мелких,круглых,белых,блестящих с ровными краями колоний,могут распологатся еденично,скоплениями,сплошным слизистым налетом.Биологический:сущность в определении патогености культуры для морских свинок,кроликов,птиц и др.лаб.животных.которые отличаются восприимчевостью к различным микробактериям туберкулеза.дифференциацию выделеных культур проводят на двух кроликах,в краевую вену уха вводят суспензию культуры микробактерий в физ.рас-ре(первому 0,1,второму 0,01)возбудитель бычьего вида на протяжении 3 мес.вызывает генерализованное поражение,человеческий-нетипичные туберкулезные очажки регрессивного характера,птичьего-септическую форму болезни без образования спецефических патологических изменени в органах и тканях с летальным исходом через 2-3 недели.паралельное заражение 2х морских свинок такими же дозами позволяет дефференцировать возбудителя птичьего вида(не чувствительны к нему)человечьего и бычьего вызывает у них прогресивные туберкулезные изменения.Биохимический:основан на проявлении различной ферментативной активности микробактерий разных видов.наиболее демонстративны тесты: ниациновый,реакция востановления нитратов,амидазная проба,рост на среде с салицилатом натрия,разрушение салицилата натрия,ПАСК,устойчивость к 5%хлориду натрия и пикриновой кислоте.Серодиагностика:для ранней диагностики,для определения антигенного родства между истиными и атипичными микробактериями используют РСК с антигенами,реакцию пасивной или непрямой гемагглютинации,реакцию кольцепреципитации.

56.Лабораторная диагностика паратуберкулеза.хроническая болезнь крс,хорактерезующаяся сначала переодическим,затем постоянным ростройством ЖКТ.Бактериологическийдиагноз:решающий,устанавливают восновном микроскопией испражнений больного.из фекалий собирают комочки слизи и кровяные сгустки,размазывают тонким слоем на предмет.стекле,окрашивают после фиксации по Цилю-Нильсону.если результат отрицательный-повторное иследование через промежуток времени.не меньше 8 препаратов-потому что бактерии Ионе переодически выделяются.культуры атипичных бактерий выростают быстро.для посмертной диагностики в лаб.участки поражонного кишечника и увеличенные брыжеечные лиф.узлы.консервированые в 30% р-ре глицина.кал пересылают в стирильной закрытой посуде.Серодиагностика:при паратуберкулезе,особенно в период его клинического проявления,в сыворотке крови при РСКможно обнаружить комплиментсвязывающие антитела.в качестве антигена испльзуют спиртовые,ацетоные,эфирные экстракты бактерий Ионе,обработаные по спец.методикам.особое диагностическое значение реакция преобретает в связи с тем,что она подтверждает клинические формы патотуберкулеза у 85%.недостаток РСК-отрицательные рузультаты в большенстве случаев в доклинический период,неспецефические реакции у животных,больных туберкулезом,возбудители которого по антигенной структуре близки к бактерии Ионе.

57.Лабораторная диагностика возбудителя сибирской язвы.возбудитель-Bacillusanthracis.при подозрении на сиб.язв.вскрывать трупы нельзя!для лаб.ислед.направляют ухо или толстые нефиксированые мазки крови из надреза сосуда на предметном стекле.при вынужденном убое-кусочки селезенки,печени,измельченые лимф.узлы.от трупов свиней-кусочки отечных тканей в области глотки и заглоточные лимф.узлы.материал должен быть свежим.направляют почву,фураж,воду,шерсть.Бактериоскопия:из пат.материала готовят мазки,часть по грмму красят и обязательно наличие капсулы-по Михину,Ребигеру,Ольту и др.важный диагностический признак-обнаружение типичных по морфологии капсульных палочек.Посев на питат.среды:материал засевают в МПБ и на МПА,инкубируют приt37 в течении 18-24ч.при отсутствии роста еще 2 сут.культуры просматривают,проверяют типичность,готовят препараты,микроскопируют.в мазках культур обнаруживают бескапсульные палочки,расположениые длиными цепочками и споры.Биологическая проба:заражают бел.мышей,морских свинок,кроликов одновременно с посевом материала на питат.среды.бел.мышам подкожно в заднюю часть спины,морским свин.и кроликам – под кожу в область живота.мыши погибают через 2 суток,свинки и кролики-2-4сут.павших животных вскрывают,делают мазки и посевы из крови,сердца,селезенки,печени.Идентификациябациллы антракса:в природе существуют несколько видов анаэробных споровых сибиреязвеноподобных сапрафитовB.cereus,B.megaterium,B.mycoides,B.subtillis.они по морфологии и культуральным признакам во многом сходны с бацилой антракса.идентификацию и дифференциацию культуры проводят на основании главных(патогенность,капсулообразование,определение подвижности,тест»жемчужное ожирелье»,имунофлюрисцентный тест) и дополнительных(тесты на отсутствие гемолиза и лицетиназной активности,образование фосфалитазы) признаков.Проба с бактериофагом:сибиреязвеный фаг,взаимодействуя с гомологичной культурой,вызывает ее лизис.эту реакцию применяют для индефикации бацилы антитракс.Имунофлюоресцентный тест:оринтеровочный метод,требует дополнительного изучения вирулентности,капсулообразования,фагочувствительности.подвижность определяется путем посева на МПА.неподвижные растут только по ходу укола,подвижные-диффузный рост.возбудитель сиб.язв.неподвижен.гемолитич.активность не надежный критерий-бацилы антракса не гемолизируют эритроциты,но этот признак у разных штамов вариабелен.лецитиназная активность низкая-медленно свертывает или вообще не свертывает куриный желток.Серологическое иследование:применяют реакцию преципитации по Асколи.используют для иследования на сиб.язву кожвенного и мехового сырья,загнившего пат.материала.РП по Асколи-достоверный и широко применяемый тест серологической диагностики сиб.язвы.главным образом для изучения антигенного спектора бацилы антракса

58.Дифференциальная диагностика сибирской язвы животных.Для дифференциации возбудителя сибирской язвы от микробов-сапрофитов, близкородственных В. anthracis (В. cereus, В. mycoides, В. thuringiensis и др.), широко распространенных в природе, применяют методы, выявляющие фенотипические различия штаммов, в том числе определение характера роста на различных питательных средах, чувствительность к пенициллину и бактериофагу, образование капсул, тест на образование сибиреязвенного токсина, РП в геле, РИГА в комплексе с другими бактериологическими методами (микроскопия, культивирование, биопроба на лабораторных животных) и др.Для выявления обсемененности спорами сибирской язвы различных объектов внешней среды разработаны Методические указания по индикации возбудителя сибирской язвы в объектах внешней среды и кормах с помощью твердофазного иммуноферментного метода.В настоящее время для проведения более тонкого и углубленного эпизоотологического анализа вспышек болезни разработаны рестрикционный анализ, молекулярная гибридизация, полимеразная цепная реакция (ПЦР).При дифференциальной диагностике у коров необходимо исключить эмфизематозный карбункул, злокачественный отек, пастереллез (отечная форма) и пироплазмидозы, тимпанию незаразного характера, лейкоз. У овец – брадзот, инфекционную энтеротоксемию и пироплазмидозы; у свиней – рожу, чуму, пастереллез; у лошадей – злокачественный отек, сверхострое течение инфекционной анемии, пироплазмидозы, петехиальную горячку, кормовые отравления.Основой дифференциальной диагностики является комплексный метод исследования, в котором результаты лабораторной диагностики имеют решающее значение.

59.Лабораторная диагностика столбняка.возбудитель-C.tetani.в лаб.направляют кусочки тканей из глубоких слоев раненых поражений,гной,выделения из ран.при генерализации процесса-от трупа кусочки печени,селезенки,10мл крови.при возникновении столбняка вследствии родов и абортов-выделения из влагалища и матки,а при подозрении-труп новорожденного животного.мазки окрашивают по грамму.наличие в препаратах грамм+ с круглыми терминальными спорами дает основание подозревать столбняк.материал засевают в среду Китта-Тароцци.микроскопируют,посев на чашки петри с глюкозо-кровяным агаром и выращивают в анаэробных условиях.после появления роста отбирают колонии и производят отсев для выделения чистой культуры.Пробу проводят для обнаружения токсина в пат.материале и культуре.ислед.материал растирают в стирильной ступке с кварцевым песком,добавляют физ.раствор.выдерживают 60мин.при комнатнойt.фильтруют через ватно-марлевый фильтр.фильтрат вводят внутримышечно в бедро 2м мышам(1мл).культуру возбудителя-для накопления токсина выдерживаютt37в термостате до 10сут.фильтруют и вводят в дозе 0,5 2м белым мышам.биопробу можно проводить и на морских свинках.животные погибают обычно в течении от 12ч до 5сут.так же можно обнаружить при реакции нейтрализации и непрямой гемагглютинации с танизированными эритроцитами.

60.Возбудитель ботулизма (лабораторная диагностика).Возбудитель-C.botulinum.вызывает остропротекающий кормовой токсикоз.болезнь развивается вследствие воздействия ботулинического токсина на организм,хорактерезуется поражением цнс и сопровождается парезами двигательных мышц.биологическое исследование направлено на обнаружение ботулинических токсинов.пробы пат.материала растирают с физ.р-р,затем для экстрагирования выдерживают при комнатнойt2ч,пропускают через ватно-марлевый фильтр или центрифугируют при 3000мин,в течении 30 мин.цитратную кровь и сыворотку не разводят,но иследуют сразу после взятия(токсин разрушается быстро).для постановки биопробы берут 4 бел.мышей.двум ислед.материал внутрибрюшинно или внутривенно.две остаются контрольными.при наличии таксина 2 первые мыши гибнут через 1-4сут.типизацию токсина проводят в реакции нейтрализации с гомологичными антитоксическими сыворотками.

61.Лабораторная диагностика эмфизематозного карбункула животных.возбудитель-C.chauvoei.пат.материал-кусочки пораженных мышц,отечный эксудат,кровь,взятые тут же после гибели.запрещено вскрытие трупов!кусочки мышц отбирают юез полного вскрытия трупасхема ислед.:микроскопия мазков,посевы на питат.среды в анаэробных и аэробных условиях и заражение лаб.животных.мазки окрашивают по Граму и Муромцеву.грамм+ полиморфная,споробразующая,толстая с закруглеными концами палочка.бактерии распологаются одиночно или парами.чистую культуру удается выделить если посевы делаю сразу после гибели животного.но как правило материал сильно загрязнен(применяют ряд методов подавления сопутствующей микрофлоры)материал можно высушить в термостате(споры сохраняют жизнеспособность)рекамендуют проводить пасев в жидкую элективную среду с добавлением фенола. Можно нагреть материал рот 80 в течении 15мин.ислед.материал засевают пипеткой в среду Китта-Тароцци,в МПБ и МПА и глюкозо-кровяной агар в чашках.посевы инкубируют в анаэробных условиях при 37 в течении24-48ч.со среды Китта-Тароцци для выделения чистой культуры делают дробный посев на чашк с глюкозо-кровяным агаром.наличие характерных колоний дают основание для предварительного дианоза.в необходимых случаях изучают сахаролитические и протеолитические св-ва культуры.для окончательного диагноза-биопроба.

62.Возбудители злокачественного отека и его лабораторная диагностика.злокачественный оттек-острая неконтагиозная раневая инфекция,вызываемая группой патогенных клостридий.возбудители-Clostridiumsepticum(анаэробная бактерия,полиморфная,грамм+,бескапсульная,подвижная палочка,споры овальной формы,в азках отдельные палочки,цепочки,нити,в старых культурах грамм-плохо окрашиваются),perfringens(неподвижные,закругленые концы,толстые палочки,в организме образует капсулу,при длит.хранении или пересеве не может образовывать капсулы),novyi(полиморфная,прямая или слегка изогнутая палочка,бактерии составляют короткие цепочки,капсул нет,в молодых культурах подвижны,споры круглые или овальные,молодые грамм+),histolyticum(грамм+,в старых культурах овальные споры,подвижен в свежих культурах,капсул нет),sordellii(полиморфные палочки,бактерии распологаются изолированно,овальные споры,есть жгутики,капсулу не синтезируют,грамм+)материал для лаб.иследования при злокачественном оттеке-тканевый эксудат,кусочки поражонных мыщц,паринхиматозные органы.овцы-еще часть сычуга и тонкого кишечника с содержимым.при иследовании проводят микроскопию мазков,посевы на питат.среды,зарожение лаб.животных.мазки окрашивают по Грамму иМуромцеву.свежий материал пипеткой в среду Китта-Тароции,МПА,МПБ.если материал не свежий-готовят суспензию в физ.р-ре и производят посевы.для выделения чистой культуры с жидкой питат.среды посевы в чашки с глюкзо-кровяным агаром.наличие хорактерных колоний и крупных грамм+ палочек в мазках служит основанием для постановки предварительного диагноза.подтверждают биологическим исследованим,проводят подкожное или внутримышечное зарожение морских свинок взвесью из пат.материала в дозе 1мл и наблюдают 8сут.животные погибают через 16-48ч.для определения вида возбудитедля применяют реакцию нейтрализации с гомологичными антитоксическими сыворотками.

63.Возбудители брадзота овец, инфекционной анаэробной энтеротоксемии овец и крупного рогатого скота (лабораторная диагностика).Овцы:развиваетс в результате всасывания из кишечника токсинов,синтезируемых возбудителем.возбудитель-C.pefringens(B.ovitoxicus)переболевшие и оставшиеся живы приобретают иммунитет до 10мес.для активной профилактики применяют полианатоксин и поливалентную вакцину.с целью пассивной иммунизации и спецефического лечения используют антитоксическую сыворотку против анаэробной дезентирии ягнят и инфекционой энтеротоксемии овец.Крс:тяжелая остропротекающая болезнь,чаще болеют новорожденые,возникает спонтанно.обитает в жкт.возбудитель-сероварыA.B.C.D,EиC.perfringens.особая опасность серовар А тяжело протекающая и массовая гибель. СероварC,D-обычно вызывает болезнь у более старших телят.микробиологический диагноз включает в себя обнаружение токсина в содержимом кишечника и определение его токсичности.при обнаружении токсина ставят реакцию нейтрализации с антитоксическими сыворотками сероваров на бел.мышах.для спецефической профилактики используют антитоксическую сыворотку против дезентерии ягнят и инфекционой энтротоксимии овец.Брадзот-острая некантагиозная болезнь овец,хорактерезующаяся геморагическим воспалением сычуга и 12перстной кишки.возбудитель-C.septicum.в лаб.направляют перевязанную часть сычуга и 12перстной кишки с срдержимым,паренхиматозные органы,мышцы,отечную ткань,трубчатую кость.пригоден только свежий материал(в кишечнике быстрое размножение после гибели анаэробных бактерий)результат исследования от несвежих трупов не учитываются.для профилактики применяют поливалентную концентрированую гидроокисьалюминевую вакцину против брадзота.

51.Лабораторная диагностика рожи свиней.Возбудитель-бактерияErysipelothrixrhusiopathiae.тонкая прямая(слегка изогнутая)палочка.не подвижна.нет спор и капсул.грамм +.в лаб.направляют труп животного целиком или сердце,печень,селезенку,почку,трубчатую кость.при подозрении на хроническое-сердце обязательно.выявляют при помощи РА,РИФ.микроскопия:мазки-отпечатки окрашивают по грамму.в положит.в мазках грамм+ палочки одиночно,попарно,сколениями.при хроническом-длинные переплетающиеся нити.Посев на питат.среды:из крови св мпб,мпа,бульон Хоттингера.посев инкубируют приt37,в течении 18-24ч.при отсутствии роста еще сутки.выделеную культуру иденфицируют по морфологич.сво-вам,а так же в реакции аглютинации с позитивной сывороткой.биохимич.активность определяют на средах гисса с глюкозой,сахарозой,манитом.одновременно определяют образование сероводорода и каталазы.Реа-ция аглютинации:РА с гипериммуной сывороткой.на предмет.стекло капля сыворотки в разведении 1:50,петлей вносят суточную агаровую культуру,чательно растирают.в положительном случии аглютинация наступает быстро,аглютинат имеет вид плотных мелких комочков.Культуру выделяющую сероводород,не образующую каталазу,разлагающую глюкозу,не ферментирующую маннит,сахарозу,дающую +РА относят к возбудителю рожи.для обнаружения рожистых бактерий в пат.материале,индификации выделенныхкультур используют метод флюоресцирующих антител.

52.Лабораторная диагностика листериоза человека и животных.видListeriamonocytogenesполиморфная палочка,в мазках одиночно,V.нет спор и капсул.Бактериологическая:диагноз на основании выделения культуры листерий из пат.материала.в лаб,.отправляют трупы мелких,или голову(мозг)паринхиматозные органы,абортированый плод и его оболочку.для прижизненой диагностики кровь или сыворотку с целью серологического исследования,истечения из половых органов обортившихся, молоко из пораженных долей выменипроводят микроскопическое исследование мазков-отпечатков которые по грамму окрашивают,а так же с использованием флюоресцирующих антител.из органов и мозга обильные посевы на питат.среды,на кровяной агар,на селективные среды.посевы инкубируют приt37,ежедневно просматривая 3-4 дня,если нет роста – 2 нелели.выделеные культуры иследуют на подвижность,изучают сво-ва на средах Гисса,проба на каталазу.ставят капельную РА на стекле с поливалентной листериозной аглютинирующей сывороткой.спецефич.св-ва проверяют также с помощью конъюктивальной пробы на морских свинках.конъюктивальная проба:на конъюктиву морской свинки наносят 2 капли испытуемой культуры.на 2-4 сутки вирулентные листерии вызывают гнойный конъюктивит.Серологическая:сыворотку иследуют на РА,РСК.для РА применяют 2 антигена. РА + если при наличии аглютинации с оценкой не менее чем два креста в разведении сыворотки 1:200 для овец,лошадей,коз, для крс 1:400, кролики 1:50.

53.Дифференциация возбудителя рожи свиней от возбудителя листериоза.Подвижность:Листерии подвижны,рожа не подвижны.Проба на каталазу:листерия положительная,рожа отрицательная.Салицин:листерия разлогает,рожа не разлогает.Индикаторные среды:листерия обесцвечивает,рожа не обесцвечивает.РА с позитивной листериозной сывороткой:листерия положительная,рожа отрицательная.Конъюктивная проба на морских свинках:листерия положительная,рожа отрицательная.

54.Лабораторная диагностика туберкулеза животных и человека.Для людейMycobacteriumtyberculosis.Для животныхMycobacteriumbovis.микробактерия кислото-спирто-щелочиустойчивая.не подвижна.нет спор и капсул.в чистом виде выделить трудно.пат. материал-пораженые органы и ткани,кровь,эксудат,гной,молоко,мочу,фекалии,почву,воду,соскоб с различных обьектов животновод.помещений.для освобождения от посторонней микрофлоры материал обрабатывают 10% р-ром серной кислоты.для обработки жидкого,полужидкого и соскобов используют метод флорации(материал взбалтывают в колбе с углеводородами)

55.Дифференциация микобактерий.Микроскопический метод:бычийвид-длина 1,5 толщина до 0,5.так же встречаются в виде овоидных и коковидных форм.палочковидные чаще прямые или изогнутые,с округлыми концами и зернистостью.человческий вид-более длинные,тонкие.птичьи и мышиные-короткие и длинные полиморфные палочки.Культуральный метод:вирулентные культуры бычьего вида на питат.средах растут очень медленно в видк сферических гладких и шероховатых колоний,чаще в виде сухих крошек.человеческого-сфеерические колонии,встречаютсяR,Sформа.птичьи-свежевыделенные растут быстрее.рост хорактерезуется образованием гладких,мелких,круглых,белых,блестящих с ровными краями колоний,могут распологатся еденично,скоплениями,сплошным слизистым налетом.Биологический:сущность в определении патогености культуры для морских свинок,кроликов,птиц и др.лаб.животных.которые отличаются восприимчевостью к различным микробактериям туберкулеза.дифференциацию выделеных культур проводят на двух кроликах,в краевую вену уха вводят суспензию культуры микробактерий в физ.рас-ре(первому 0,1,второму 0,01)возбудитель бычьего вида на протяжении 3 мес.вызывает генерализованное поражение,человеческий-нетипичные туберкулезные очажки регрессивного характера,птичьего-септическую форму болезни без образования спецефических патологических изменени в органах и тканях с летальным исходом через 2-3 недели.паралельное заражение 2х морских свинок такими же дозами позволяет дефференцировать возбудителя птичьего вида(не чувствительны к нему)человечьего и бычьего вызывает у них прогресивные туберкулезные изменения.Биохимический:основан на проявлении различной ферментативной активности микробактерий разных видов.наиболее демонстративны тесты: ниациновый,реакция востановления нитратов,амидазная проба,рост на среде с салицилатом натрия,разрушение салицилата натрия,ПАСК,устойчивость к 5%хлориду натрия и пикриновой кислоте.Серодиагностика:для ранней диагностики,для определения антигенного родства между истиными и атипичными микробактериями используют РСК с антигенами,реакцию пасивной или непрямой гемагглютинации,реакцию кольцепреципитации.

56.Лабораторная диагностика паратуберкулеза.хроническая болезнь крс,хорактерезующаяся сначала переодическим,затем постоянным ростройством ЖКТ.Бактериологическийдиагноз:решающий,устанавливают восновном микроскопией испражнений больного.из фекалий собирают комочки слизи и кровяные сгустки,размазывают тонким слоем на предмет.стекле,окрашивают после фиксации по Цилю-Нильсону.если результат отрицательный-повторное иследование через промежуток времени.не меньше 8 препаратов-потому что бактерии Ионе переодически выделяются.культуры атипичных бактерий выростают быстро.для посмертной диагностики в лаб.участки поражонного кишечника и увеличенные брыжеечные лиф.узлы.консервированые в 30% р-ре глицина.кал пересылают в стирильной закрытой посуде.Серодиагностика:при паратуберкулезе,особенно в период его клинического проявления,в сыворотке крови при РСКможно обнаружить комплиментсвязывающие антитела.в качестве антигена испльзуют спиртовые,ацетоные,эфирные экстракты бактерий Ионе,обработаные по спец.методикам.особое диагностическое значение реакция преобретает в связи с тем,что она подтверждает клинические формы патотуберкулеза у 85%.недостаток РСК-отрицательные рузультаты в большенстве случаев в доклинический период,неспецефические реакции у животных,больных туберкулезом,возбудители которого по антигенной структуре близки к бактерии Ионе.

57.Лабораторная диагностика возбудителя сибирской язвы.возбудитель-Bacillusanthracis.при подозрении на сиб.язв.вскрывать трупы нельзя!для лаб.ислед.направляют ухо или толстые нефиксированые мазки крови из надреза сосуда на предметном стекле.при вынужденном убое-кусочки селезенки,печени,измельченые лимф.узлы.от трупов свиней-кусочки отечных тканей в области глотки и заглоточные лимф.узлы.материал должен быть свежим.направляют почву,фураж,воду,шерсть.Бактериоскопия:из пат.материала готовят мазки,часть по грмму красят и обязательно наличие капсулы-по Михину,Ребигеру,Ольту и др.важный диагностический признак-обнаружение типичных по морфологии капсульных палочек.Посев на питат.среды:материал засевают в МПБ и на МПА,инкубируют приt37 в течении 18-24ч.при отсутствии роста еще 2 сут.культуры просматривают,проверяют типичность,готовят препараты,микроскопируют.в мазках культур обнаруживают бескапсульные палочки,расположениые длиными цепочками и споры.Биологическая проба:заражают бел.мышей,морских свинок,кроликов одновременно с посевом материала на питат.среды.бел.мышам подкожно в заднюю часть спины,морским свин.и кроликам – под кожу в область живота.мыши погибают через 2 суток,свинки и кролики-2-4сут.павших животных вскрывают,делают мазки и посевы из крови,сердца,селезенки,печени.Идентификациябациллы антракса:в природе существуют несколько видов анаэробных споровых сибиреязвеноподобных сапрафитовB.cereus,B.megaterium,B.mycoides,B.subtillis.они по морфологии и культуральным признакам во многом сходны с бацилой антракса.идентификацию и дифференциацию культуры проводят на основании главных(патогенность,капсулообразование,определение подвижности,тест»жемчужное ожирелье»,имунофлюрисцентный тест) и дополнительных(тесты на отсутствие гемолиза и лицетиназной активности,образование фосфалитазы) признаков.Проба с бактериофагом:сибиреязвеный фаг,взаимодействуя с гомологичной культурой,вызывает ее лизис.эту реакцию применяют для индефикации бацилы антитракс.Имунофлюоресцентный тест:оринтеровочный метод,требует дополнительного изучения вирулентности,капсулообразования,фагочувствительности.подвижность определяется путем посева на МПА.неподвижные растут только по ходу укола,подвижные-диффузный рост.возбудитель сиб.язв.неподвижен.гемолитич.активность не надежный критерий-бацилы антракса не гемолизируют эритроциты,но этот признак у разных штамов вариабелен.лецитиназная активность низкая-медленно свертывает или вообще не свертывает куриный желток.Серологическое иследование:применяют реакцию преципитации по Асколи.используют для иследования на сиб.язву кожвенного и мехового сырья,загнившего пат.материала.РП по Асколи-достоверный и широко применяемый тест серологической диагностики сиб.язвы.главным образом для изучения антигенного спектора бацилы антракса

58.Дифференциальная диагностика сибирской язвы животных.Для дифференциации возбудителя сибирской язвы от микробов-сапрофитов, близкородственных В. anthracis (В. cereus, В. mycoides, В. thuringiensis и др.), широко распространенных в природе, применяют методы, выявляющие фенотипические различия штаммов, в том числе определение характера роста на различных питательных средах, чувствительность к пенициллину и бактериофагу, образование капсул, тест на образование сибиреязвенного токсина, РП в геле, РИГА в комплексе с другими бактериологическими методами (микроскопия, культивирование, биопроба на лабораторных животных) и др.Для выявления обсемененности спорами сибирской язвы различных объектов внешней среды разработаны Методические указания по индикации возбудителя сибирской язвы в объектах внешней среды и кормах с помощью твердофазного иммуноферментного метода.В настоящее время для проведения более тонкого и углубленного эпизоотологического анализа вспышек болезни разработаны рестрикционный анализ, молекулярная гибридизация, полимеразная цепная реакция (ПЦР).При дифференциальной диагностике у коров необходимо исключить эмфизематозный карбункул, злокачественный отек, пастереллез (отечная форма) и пироплазмидозы, тимпанию незаразного характера, лейкоз. У овец – брадзот, инфекционную энтеротоксемию и пироплазмидозы; у свиней – рожу, чуму, пастереллез; у лошадей – злокачественный отек, сверхострое течение инфекционной анемии, пироплазмидозы, петехиальную горячку, кормовые отравления.Основой дифференциальной диагностики является комплексный метод исследования, в котором результаты лабораторной диагностики имеют решающее значение.

59.Лабораторная диагностика столбняка.возбудитель-C.tetani.в лаб.направляют кусочки тканей из глубоких слоев раненых поражений,гной,выделения из ран.при генерализации процесса-от трупа кусочки печени,селезенки,10мл крови.при возникновении столбняка вследствии родов и абортов-выделения из влагалища и матки,а при подозрении-труп новорожденного животного.мазки окрашивают по грамму.наличие в препаратах грамм+ с круглыми терминальными спорами дает основание подозревать столбняк.материал засевают в среду Китта-Тароцци.микроскопируют,посев на чашки петри с глюкозо-кровяным агаром и выращивают в анаэробных условиях.после появления роста отбирают колонии и производят отсев для выделения чистой культуры.Пробу проводят для обнаружения токсина в пат.материале и культуре.ислед.материал растирают в стирильной ступке с кварцевым песком,добавляют физ.раствор.выдерживают 60мин.при комнатнойt.фильтруют через ватно-марлевый фильтр.фильтрат вводят внутримышечно в бедро 2м мышам(1мл).культуру возбудителя-для накопления токсина выдерживаютt37в термостате до 10сут.фильтруют и вводят в дозе 0,5 2м белым мышам.биопробу можно проводить и на морских свинках.животные погибают обычно в течении от 12ч до 5сут.так же можно обнаружить при реакции нейтрализации и непрямой гемагглютинации с танизированными эритроцитами.

60.Возбудитель ботулизма (лабораторная диагностика).Возбудитель-C.botulinum.вызывает остропротекающий кормовой токсикоз.болезнь развивается вследствие воздействия ботулинического токсина на организм,хорактерезуется поражением цнс и сопровождается парезами двигательных мышц.биологическое исследование направлено на обнаружение ботулинических токсинов.пробы пат.материала растирают с физ.р-р,затем для экстрагирования выдерживают при комнатнойt2ч,пропускают через ватно-марлевый фильтр или центрифугируют при 3000мин,в течении 30 мин.цитратную кровь и сыворотку не разводят,но иследуют сразу после взятия(токсин разрушается быстро).для постановки биопробы берут 4 бел.мышей.двум ислед.материал внутрибрюшинно или внутривенно.две остаются контрольными.при наличии таксина 2 первые мыши гибнут через 1-4сут.типизацию токсина проводят в реакции нейтрализации с гомологичными антитоксическими сыворотками.

61.Лабораторная диагностика эмфизематозного карбункула животных.возбудитель-C.chauvoei.пат.материал-кусочки пораженных мышц,отечный эксудат,кровь,взятые тут же после гибели.запрещено вскрытие трупов!кусочки мышц отбирают юез полного вскрытия трупасхема ислед.:микроскопия мазков,посевы на питат.среды в анаэробных и аэробных условиях и заражение лаб.животных.мазки окрашивают по Граму и Муромцеву.грамм+ полиморфная,споробразующая,толстая с закруглеными концами палочка.бактерии распологаются одиночно или парами.чистую культуру удается выделить если посевы делаю сразу после гибели животного.но как правило материал сильно загрязнен(применяют ряд методов подавления сопутствующей микрофлоры)материал можно высушить в термостате(споры сохраняют жизнеспособность)рекамендуют проводить пасев в жидкую элективную среду с добавлением фенола. Можно нагреть материал рот 80 в течении 15мин.ислед.материал засевают пипеткой в среду Китта-Тароцци,в МПБ и МПА и глюкозо-кровяной агар в чашках.посевы инкубируют в анаэробных условиях при 37 в течении24-48ч.со среды Китта-Тароцци для выделения чистой культуры делают дробный посев на чашк с глюкозо-кровяным агаром.наличие характерных колоний дают основание для предварительного дианоза.в необходимых случаях изучают сахаролитические и протеолитические св-ва культуры.для окончательного диагноза-биопроба.

62.Возбудители злокачественного отека и его лабораторная диагностика.злокачественный оттек-острая неконтагиозная раневая инфекция,вызываемая группой патогенных клостридий.возбудители-Clostridiumsepticum(анаэробная бактерия,полиморфная,грамм+,бескапсульная,подвижная палочка,споры овальной формы,в азках отдельные палочки,цепочки,нити,в старых культурах грамм-плохо окрашиваются),perfringens(неподвижные,закругленые концы,толстые палочки,в организме образует капсулу,при длит.хранении или пересеве не может образовывать капсулы),novyi(полиморфная,прямая или слегка изогнутая палочка,бактерии составляют короткие цепочки,капсул нет,в молодых культурах подвижны,споры круглые или овальные,молодые грамм+),histolyticum(грамм+,в старых культурах овальные споры,подвижен в свежих культурах,капсул нет),sordellii(полиморфные палочки,бактерии распологаются изолированно,овальные споры,есть жгутики,капсулу не синтезируют,грамм+)материал для лаб.иследования при злокачественном оттеке-тканевый эксудат,кусочки поражонных мыщц,паринхиматозные органы.овцы-еще часть сычуга и тонкого кишечника с содержимым.при иследовании проводят микроскопию мазков,посевы на питат.среды,зарожение лаб.животных.мазки окрашивают по Грамму иМуромцеву.свежий материал пипеткой в среду Китта-Тароции,МПА,МПБ.если материал не свежий-готовят суспензию в физ.р-ре и производят посевы.для выделения чистой культуры с жидкой питат.среды посевы в чашки с глюкзо-кровяным агаром.наличие хорактерных колоний и крупных грамм+ палочек в мазках служит основанием для постановки предварительного диагноза.подтверждают биологическим исследованим,проводят подкожное или внутримышечное зарожение морских свинок взвесью из пат.материала в дозе 1мл и наблюдают 8сут.животные погибают через 16-48ч.для определения вида возбудитедля применяют реакцию нейтрализации с гомологичными антитоксическими сыворотками.

63.Возбудители брадзота овец, инфекционной анаэробной энтеротоксемии овец и крупного рогатого скота (лабораторная диагностика).Овцы:развиваетс в результате всасывания из кишечника токсинов,синтезируемых возбудителем.возбудитель-C.pefringens(B.ovitoxicus)переболевшие и оставшиеся живы приобретают иммунитет до 10мес.для активной профилактики применяют полианатоксин и поливалентную вакцину.с целью пассивной иммунизации и спецефического лечения используют антитоксическую сыворотку против анаэробной дезентирии ягнят и инфекционой энтеротоксемии овец.Крс:тяжелая остропротекающая болезнь,чаще болеют новорожденые,возникает спонтанно.обитает в жкт.возбудитель-сероварыA.B.C.D,EиC.perfringens.особая опасность серовар А тяжело протекающая и массовая гибель. СероварC,D-обычно вызывает болезнь у более старших телят.микробиологический диагноз включает в себя обнаружение токсина в содержимом кишечника и определение его токсичности.при обнаружении токсина ставят реакцию нейтрализации с антитоксическими сыворотками сероваров на бел.мышах.для спецефической профилактики используют антитоксическую сыворотку против дезентерии ягнят и инфекционой энтротоксимии овец.Брадзот-острая некантагиозная болезнь овец,хорактерезующаяся геморагическим воспалением сычуга и 12перстной кишки.возбудитель-C.septicum.в лаб.направляют перевязанную часть сычуга и 12перстной кишки с срдержимым,паренхиматозные органы,мышцы,отечную ткань,трубчатую кость.пригоден только свежий материал(в кишечнике быстрое размножение после гибели анаэробных бактерий)результат исследования от несвежих трупов не учитываются.для профилактики применяют поливалентную концентрированую гидроокисьалюминевую вакцину против брадзота.

64. Лабораторная диагностика некробактериоза (фузобактериоз) животных. РодFusobacterium, видF.necrophorum. Это хроническая инфекционная болезнь, хар-ся гнойно-некротическими поражениями кожи, слизистых оболочек и конечностей. Восприимчивы все виды животных, включая птиц и человека.Методы диагностики: 1)Бактериологический метод. Материал для исследования: при жизни берут соскобы на границе здоровой и некротизированной ткани; посмертно – трупы мелких дивотных, пораженные ткани, паренхиматозные органы с некротическими очагами. Микроскопия: а) метод окраски: простой метод, по Граму, по Муромцеву. б) мик. Картина: возбудитель в виде кокков, палочек(маленьких) и нитей, Гр(-), сопор нет, капсул нет, неподвижны. Культивирование: а) посев на питательные среды: МППБ, сывороточный сахарный агар; б) особенности выделения возбудителя: строгий анаэроб; в)культуральные свойства: на МППБ – интенсивное помутнение, слабое газообразование; на сывороточном сахарном агаре – мелкие росинчатые колонии. Биопроба: заражают п/к кроликов в наружную поверхность уха, происходит некроз уха; заражают п/к мышей в область хвоста, на 8 день припухлость и нагноение, хвост отпадает. 2) Серологические и аллергические методы не применяются.

65. Лабораторная диагностика колибактериоза животных и человека. Колибактериоз(кишечная палочка) - Escherichia coli. В мазках вид длинных палочек с закругленными концами. Спор нет, капсул нет, за искл. 3х серовариантов. Обладает подвижностью, жгутики располагаются перетрехиально. По Гр(-). Культуральные свойства: является факультативным анаэробом; на МПА через 24 часа колонииS- формы, средние, круглые, серо-белого цвета; на МПБ интенсивное помутнение с образованием осадка, который легко разбивается при встряхивании и увеличивает мутность бульона. Для культивирования чаще всего используют среду Эндо, Плоскирева и Левина. На Эндо: колонии 2х типов 1) средние,S- формы, с розовым ободком по краю и малиновым центром; 2)средние,S- формы, круглые, темно-вишневого цвета с металлическим блеском. На Плоскирева: колонии кирпично-красного цвета. На Левина: колонии темно-фиолетовые. Биохимические св-ва: не разжижает желатин, на пиптонной воде не выделяет сероводород, расщепляет глюкозу с образованием кислоты и газа, расщепляет лактозу и манит, +посев на среду с мочевиной, +посев на цитрат Симонса (при кишечной палочке рез-тат отрицательный). Биопроба: суточная микроб. Культура, выращенная на агаре – делают несколько раз смыв, разводят пока концентрация не будет = 500 млн. микроб. Клеток на 1 мл. Проверяют по стандарту мутности и вводят в/б. Кишечная палочка считается патогенной, если за 5 суток погибает 2-3 цыпленка.

66. Лабораторная диагностика сальмонеллеза животных, птиц, человека. РодSalmonella, виды:S.Enteritidis– у телят,S.Choleraesuis– у поросят,S.Typhisuis– у свиней,S.Abortusequi– аборты кобыл,S.Abortusovis– у овец,S.Pullorum– у птиц.1)Бактериологический метод. Материал для исследования: при жизни – кал, сыворотка крови; посмертно – трупы мелких животных и птиц, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, абортированный плод. Микроскопия: а) метод окраски: простой метод, по Граму; б) микрокартина: палочки с закругленными концами, располагаются одиночно или попарно, Гр(-), спор нет, капсул нет, подвижны (искл.S.Pullorum). Культивирование: а) посев на: МПА, МПБ, Эндо, Левина; б) факультативный анаэроб; в) культуральные св-ва: на МПБ- интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка; на МПА – сочные, круглые с ровными краями серо-белого цвета колонии; на Эндо – бесцветные или розоватые колонии; на Левина – светло-фиолетовые колонии, после выделения чистой культуры проводят р-ю Агглютинации. г) биохимические св-ва: обладают высокой сахаролитичсекой активностью, не разжижают желатин, образуют сероводород, не образуют индол; д) биопроба: в необходимых случаях заражают п/к белых мышей.2)Серологический метод:РА с сывороткой крови – ри диагностировании аборта кобыл; РИФ. 3) аллергический метод не применяют.

67. Дифференциация кишечной палочки от сальмонелл. Местом обитания сальмонелл является кишечник человека, животных, птиц, рептилий. В отличие от кишечной палочки сальмонеллы не являются составной частью нормальной микрофлоры кишечника и их присутствие в кишечнике свидетельствует об отклонении состава микрофлоры от нормы.

	К.п	сал
Рост на среде Сименса	-	+
Сбр лактозы	+	-
Образ индола	+	-
Образ H2S	+/-	+
Сверт молока	+	-
Редукция синьки в молоке	+	-
Р-я Фогес-Проскауэра	-	+
Р-я с Коли-сыворотками	+	-

«+» - интенсивынй рост, «-» - отрицательный рост.

68. Лабораторная диагностика казеозного лимфаденита (псевдотаберкулез овец). Казеозный лимфаденит – хронически протекающая инфекционная болезнь МРС, хар-ся гнойно-некротическими воспалениями соматических и висцеральных лимфатических узлов, а также органов и тканей. Наблюдается гематогенное рассеивание возбудителя с локализацией в органах, прежде всего в различных лимфатических узлах. Возбудитель –Corynabacteriumpseudotuberculosis, родYersinia, семействоEuterobacteriaceae. Палочковидной, овоидной и кокковой формы, бактерии подвижны, есть капсула, нет спор, Гр(+).Культивирование:Растет в аэробных и анаэробных условиях. Культивируется в МПБ и на МПА с добавлением 20% сыворотки крови. На МПА – колони серо-белого цвета (R- илиS-формы), на кровяном теллуровом агаре – черные колонии с металлическим блеском. В МПБ – тонкая серо-белая пленка, которая при встряхивании ломается и оседает на дно, среда становится прозрачной, на дне – осадок в виде хлопьев.Лабораторная диагностика: Включает в себя микроскопию, выделение на чистой культуры, биопробу и гистологическое исследование. Пат. Материал – инкапсулированные очаги, пораженные лимфатические узлы. В лаборатории очаг освобождают от окружающих тканей и обеззараживают наружную поверхность капусулы фламбированием. Из гнойного содержимого готовят суспензию, из которой делают мазки одновременно посев на питательные среды. Выделяют чистую культуру возбудителя, изучают биохимические свойства и проводят биопробу. Биопробу ставят на морских свинках, кроликах. Заражают в/м: при положительной реакции – гибель через 5-20 суток. Встречаются трудности при идентификации С.pseudotuberculosisчеловека и животных, т к они имеют общие признаки.

69. Лабораторная диагностика пастереллеза животных. СемействоPasteurellaceae, РодPasteurella, ВидP.multocida. Пастерреллез – инфекционная болезнь, хар-ся септицемией, воспалительно-геморрагичсекими процессами во внутренних органах, на серозных и слизистых оболочках.Методы диагностики: 1) бактериологический метод. Материалы для исследования – паренхиматозные органы, кровь, головной мозг, трубчатая кость – посмертно. Микроскопия: а)методы окраски: простой метод (метиленовая синь), по Граму, Романовскому –Гимзе; б) микрокартина: короткие палочки до 1,5 мкм, расположенные одиночно, в пат . материале окрашиваются биполярно метиленовой синью, в мазках из культур – кокковидные палочки, расположенные одиночно, попарно, реже цепочками. Гр(-), спор нет, образуют капсулу, неподвижные. 2)Культивирование: а) посев на питательные среды МПА и МПБ с сывороткой крови; б) особенности выделения: факультативный анаэроб, температура = 37, в) на плотных средах – мелкие, прозрачные, с ровным краем колонии; на жидких средах – умеренное помутнение, на дне слизистый осадок, при встряхивании поднимаются в виде косички; г) биохимические св-ва: не разжижают желатин, образуют индол, гемолиз не вызывают, обладают каталазной активностью; д)биопроба: заражают п/к белых мышей и кроликов, в/м голубей. 3)Серологические и аллергические методы: не получили применения.

70. Лабораторная диагностика бруцеллеза животных и человека. Род:Brucella, Виды:Br.Melitensis– овцы и козы,Br.Abortus- КРС,Br.Suis- свиньи,Br.Canis- собаки,Br.Ovis– инфекционный эпидидимит баранов. Бруцеллез – хроническая инфекционная болезнь, у животных протекает в скрытой форме, происходят массовые аборты, задержание последа, метриты.Методы диагностики: Материал для исследования: абортированный плод с оболочками, желудок, печень, почки плода, молоко и др. 1) Микроскопия: а)методы окраски: по Граму, по Козловскаму (бруцеллы окрашиваются в красный, ткани и др. бактерии в зеленый); б) микрокартина: мелкие коккобактерии или мелкие палочки, располагаются одиночно, парами и небольшими группами, Гр(-), спор нет, капсул нет, неподвижны. 2) Культивирование: а) посев на питательные среды – МППБ, МППГГА(мясо-пептонный печеночно-глюкозно-глицерниновый агар), печеночно-глюкозный-глицериновый бульон и агар (МГГБ и МГГА) с 10%-ной глюкозой и 2-3%-м глицерином; б) анаэробы –abortus,ovis, остальные –аэробы, оптимальная температура = 37; в) на жидких средах – равномерное помутнение, пристеночное кольцо, незначительный осадок; на плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии; г) сахаролитические св-ва выражены слабо, протолитические – молоко не свертывают, желатин не разжижают, сероводород образуетsuis,abortusв меньшей степени. 3) биопроба: заражают п/к морских свинок, белых мышей. Дифференциацию проводят по морфологическим, культуральным биохимическим св-ам, РА и вирулентности. 4)Серологический метод: РА, РСК, РДСК, РИД-ОПС (РИД с ОПС-антигеном), кольцевую пробу с молоком, Роз-бенгал пробу. 5)Аллергический метод : - для диагностики бруцеллеза у свиней используют аллерген бруцеллин ВИЭВ, - у животных, больных бруцеллезом, на месте введения аллергена –воспалительная реакция.

71. Виды бруцелл и их дифференциация. Род:Brucella, Виды:Br.Melitensis– овцы и козы,Br.Abortus- КРС,Br.Suis- свиньи,Br.Canis- собаки,Br.Ovis– инфекционный эпидидимит баранов.

	Потребность в СО2	Образование Н2О	Рост в среде с фуксином	Рост в среде с тионином	Агглютинация моноспецифич		Лизис фагом Тб
					А	М
B.melitensis	-	-	+	-	-	+	-
B.abortus	+	+	+	-	+	-	+
B.suis	-	+	-	+	+	-	-
B.ovis	+	-	+	+	-	-	-
B.neotomae	-	+	-	-	+	-	-
B.canis	-	-	-	+	-	-	-

«+» - интенсивынй рост, «-» - отрицательный рост.

72. Серологическая диагностика бруцеллеза (РБП). РБП используют для исследования сывороток крови КРС, овец, коз, лошадей, свиней, буйволов, верблюдов и оленей. Реакцию проводят при температуре 18-30⁰Сс бруцеллезным антигеном, окрашенным бенгальским розовым, на пластинках с лунками. При положительной реакции в течении 4 мин появляются мелкие или крупные хлопья агглютинина розового цвета. По мимо РБП применяют пробирочную реакцию агглютинации РА, реакцию связывания комплемента РСК, реакцию длительного связывания комплемента РДСК, кольцевую реакцию с молоком КР.

73. Лабораторная диагностика сапа лошадей. СемействоPseudomonadaceae, РодPseudomonas, ВидPs.Mallei. Сап – преимущественно хроническая инфекционная болезнь, хар-ся образованием специфических сапных узелков во внутренних органах и на слизистой и кожных покровах, при распаде которых образуются язвы.Методы диагностики:1)Бактериологический метод. Материал для исследования: пораженные органы, лимфоузлы, гнойное отделяемое язв. 2) микроскопия: а) метод окраски: простой метод (метиленовая синь), по Романовскому –Гимзе; б) микрокартина: полиморфные палочки прямые или слегка изогнутые, Гр(-), спор нет, капсул нет, неподвижны. 3) Культивирование: а) посев на среды с глицерином МПА, МПБ, картофель; б) аэробы, оптимальная температура= 37; в) на жидких средах – равномерное помутнение среды, образование пристеночного кольца и пленки; на плотных средах – слизистый серовато-белый налет, который приобретает коричневый цвет на глицерновом картофеле – вначале мелкие полупрозрачные с желтоватым оттенком колонии, затем они сливаются, образуя медообразный налет; г) биохимичсекие св0ва: расщепляет углеводы, индол не образует, разжижает желатин. 4)биопроба: заражают 2-3 хомячков п/к, развивается орхит – феномен Штрауса. 5) серологическая диагностика: явл-ся основными методами осуществляются путем постановки РСК. 6) Аллергическая диагностика: нашла применение в виде маллеинизации: маллеин закапывают в конъктивиальный мешок (глазной метод).

74. Методы лабораторной диагностики вибриоза (кампилобактериоза) животных. Кампилобактериоз – инфекционная болезнь КРС, овец, свиней, домашних и диких птиц, комнатных животных. Основные виды: C. fetus subsp.fetus - Крупный рогатый скот, овцы, свиньи, птица, C. Hyointestinalis – Овцы, C. Coli – различные виды животных, человека и птиц и тд.Лабораторная диагностика:в лабораторию направляют абортированный плод с оболочками и голову, желудок, печень, легкие плода, часть плаценты; от коров – слизь из шейки матки, от быков – препунциальную слизь, сперму, секрет придаточных желез; от убитых – матку, яичники, влагалище, лимфоузлы тазовой полости, при поражении жкт – содержимое слепой кишки и тонкого отдела кишечника. Лабораторные методы – микроскопия, получение культур и их ыидовую идентификацию, при необходимости – серологическую типизацию выделенных культур. 1) Микроскопия: мазки окрашивают по Граму разведенным 1:5 фуксином Циля 1-2 мин. При положительном результате – в мазках типичные по морфологии кампилобактеры. 2)Выделение культур: Высеивают в чашки петри с ПЖА, СЖН или другие селективные среды. Чашки помещают в микроанаэростат с 10-15%CO₂, инкубируют при 42 градусах (2-3 суток). Серологическую идентификацию культур осуществляют со стандартными моноспецифическими сыворотками, ориентировочно в пластинчатой РА и окончательно в пробирочной РА. 3) Серологические исследования; у коров проводится при помощи реакции агглютинации с вагинальной слизью (РАВС), а у овец – РА с сывороткой крови. Вагинальную слизь берут тампоном и помещают в 3% -й р-р хлористого натрия. Тампон отжимают пинцетом и жидкость центрифугируют. Супернатант разводят 1:50, 1:100, 1:200 и 1:400. Реакцию ставят с кампилобактериозным антигеном. Оцениваю по 4 балльной системе: положительная – хорошо выраженная агглютинация (1 и 2 пробирки), отрицательная – отсутствие агглютинации во всех пробирках. РА с сывороткой крови овец ставят в разведении 1:100, 1:200 и 1:400. Положительный – в сыворотке 1:200 и выше дают агглютинацию в 4 и 3 креста, сомнительная – 4 и 3 креста в разведении 1:100, отрицательная – агглютинация отсутствует или не выше одного креста в разведении 1:100.

75. Лабораторная диагностика лептоспироза животных. СемействоLeptospiraceae, РодLeptospira, видL.interrogans(патогенные) иL.biflexa(непатогенные). Имеется 18 серрологичсеких групп, в которые входят 170 различных серовариантов. У свиней –Pomona,Tarassovi; у КРС –Hebdomatiens,Pomona,Gripotyphosa,Tarassovi. Лептоспироз – инфекционная природно-очаговая болезнь животных и человека, хар-ся у животных бессимптомным течением, в типичных случаях – кратковременная лихорадка, желтуха, аборты и др.Методы диагностики: 1)Бактериологический метод. Материал для исследования: при жизни – моча, кровь (в период лихорадки); посмертно – моча, кровь, паренхиматозные органы. 2) Микроскопия: а)готовят препарат «раздавленная капля» и микроскопируют с использованием конденсата «темное поле»; на темном фоне – тонкие сереьристо-белые извитые нити, плохо окрашиваются анилиновыми красками, по Романовскому-Гимзе – красные, используют также метод «серебристые» по Левадити; Гр(-), спор нет, капсул нет, подвижные. 3) Культивирование: а) посев на питательные среды, в составе которых дистиллированная вода или водопроводная, или буферный р-р с 5-10% сыворотки кролика; б) факультативные анаэробы, оптимальная температура 28-30 градусов; в) на жидких средах – незначительное помутнение; рост определяется путем микроскопии в «темном поле»; 4) Биопробы: заражают в/б золотистых хомяков или крольчат –сосунов. 5) Серологическая диагностика: используют РМА (р-ю микроагглютинации) и РА. РМА ставят в лунках, компоненты: 1)сыворотка в разведении 1:100, 1:500, 1:2500; 2) антиген – живые культуры лептоспир различных серогрупп в объеме 0,1 мл. Положительная р-я - склеивание лептоспир с образованием «паучков». РА компоненты: 1) исследуемая сыворотка в разведении 1:100; 2) лептоспирозные антигены шести серогрупп.

76. Патогенные микоплазмы (морфология, культивирование, патогенность). Морфология:Микоплазмы – мельчайшие свободноживущие прокариоты без ригидной клеточной стенки. В мазках из пораженных органов и из культур они имеют форму подковообразных, сферических, нитевидных, овоидных, палочковидных или напоминающих кольца образований. Размеры варьируются 120-1400 нм. Существуют морфологические элементы микоплазм, видимые в световом микроскопе. Микоплазмы Гр(-), хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе; для витальной окарски применяют специальный метод Динеса. Ультраструктура микоплазм напоминает субмикроскопическую организацию бактерий, но у них отсутствует ригидная клеточная стенка. Клетки снаружи покрыты трехслойной мембраной, внутри содержится цитоплазма и дифференцированный нуклеотид, представленный замкнутой в кольцо молекулой ДНК, формирующей одну хромосому.Культивирование:предложен ряд сред, основа которых – триптический перевар бычьего сердца, перевар Хоттингера, пептон Мартена, отвар сердечной мышцы. К основной среде добавляют дрожжевой экстракт, нормальную сыворотку крови лошади или КРС, витамины, нуклеиновые кислоты, углеводы. Микоплазмы можно культивировать в мартеновском МПБ и на МПА с добавлением 15-20% сыворотки крови лошади или КРС и 1% глюкозы; широко использую среду Эдварда в основе которой отвар сердца КРС +1% пептон, 20% сыворотки лошади и 10% дрожжевого экстракта, а также полужидкий и плотный агар Эдварда. Большое практическое применение получила среда Хоттингера. В жидких культурах – незначительная опалисценция (первичные культуры), адаптированные к среде дают помутнение. Отдельные виды и штаммы могут образовывать на поверхности бульона едва заметную разбивающуюся маслянистую пленку. В полужидких средах растут по уколу. Биохимические свойства: подразделяются на три группы – ферментативно активные стеролозависимые, ферментативно активные стералонезависимые, ферментативно неактивные. Первые (истинные микоплазмы) – ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, маннозу и гликоген, вторые(ахолеплазмы) – расщепляют с образованием кислоты выше указанные углеводы. Не образуют индола, некоторые штаммы выделяют сероводород и аммиак.Патогенность:У некоторых видов выделены экзотоксины.M.Gallisepticumпродуцирует экзотоксин нейрогенного действия. Небольшие дозы этого экзотоксина вызывают симптомы, указывающее на изменения в мозге и суставах. Экзотоксин образуетM.Neurolyticum. Микоплазмы имеют важное значение в инфекционной патологии животных: они могут поражать отдельные органы, системы органов и вызывать специфические заболевания.

77. Возбудитель контагиозной перипневмонии КРС и его лабораторная диагностика. Перипневмония – контагиозный микоплазмоз КРС, характеризуется экссудативным поражением легких с выраженным серозным воспалением междольчатых перегородок, серозно-фиброзным плевритом, скоплением большого количества экссудата в грудной полости. Возбудитель –M.Mycoidessubsp.Mycoides. МО имеют форму кокков, диплококков, колец, нитей, звезд, дисков или гроздевидные образования. Нитевидные структуры достигают длины 125-240 мкм. Хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе, а также карболовым р-ом анилиновых красителей.Лабораторная диагностика:1)Бактериологическая диагностика: основана на выделении культур микоплазм из плеврального экссудата на специальной сывороточной среде. Проводят 2-3 пассажа. При первичном возникновении болезни рекомендуется ставить пробу на 2-3 здоровых телятах. 2) В серодиагностике используют РСК с сывороткой крови животных – носителейM.Bovigenitaliumи др видов микоплазм. В качестве диагностического теста испытана реакция непрямой гемагглютинации, чувствительность которой с сыворотками, взятыми в острой фазе болезни, выше, чем РСК. Положительные реакции также получены при испытании реакции иммунодиффузии в геле, ингибиции роста и иммунофлюресценции. Предложена кожная аллергическая проба.

78. Лабораторная диагностика инфекционной агалактии мелкого рогатого скота. Это контагиозное заболевание, вызываемоеMycoplasmaagalactiae, хар-ся прекращением секреции молока, поражением молочных желез, суставов и глаз. В мазках шаровидные, овальные, дисковидные, кольцевидные структуры. Хорошо окрашиваются по Романовкому-Гимзе, азур-эозином,не красятся по Граму.Лабораторная диагностика:1) Бактериологическое исследование: материал – молоко, выделения из пораженного глаза, жидкость из суставов и отеков, кровь; от павших – паренхиматозные органы, лимфатические узлы, спинно-мозговая жидкость, головной мозг. Препараты окрашивают по Романовскому-Гимзе. Выделить культуру можно только при условии если доставлен совершенно свежий материал. В жидких питательных среда – рост через 5-6 суток, на плотных – 10- 12 суток в виде одиночных мелких колоний. Часто в первичных культурах отсутствует видимый рост, необходимо проводить не менее 5 пассажей. 2) биопроба: при необходимости ставят на лактирующих козах и козлятах. Заражающий материал вводят п/к или в молочную цистерну в дозе 5-10 мл. Инкуб период составляет 2-14 суток. При заражении кроликов в камеру глаз в положительных случаях через 5-12 суток развивается кератит. 3) методы серологической диагностики не нашли широкого применения.

79. Характеристика патогенных риккетсий. Риккетсии (Rickettsia) – облигатные внутриклеточные парзиты широкого круга животных. Представляют собой плеоморфные МО кокковидной, палочковидной, бациллярной и нитевидной формы. Преобладают кокковидные и палочковидные формы. Гр(-), неподвижные. Хорошо окрашиваются анилиновым красками по Романовскому-Гимзе, Маккиавелло, Здродовскому, Гимнесу Размножаются бинарным делением только живых или переживающих тканях. Содержат РНК и ДНК, белки, углеводы, липиды. Эрлихии(Erlichia) – мелкие полиморфные Мо, размножающиеся в цитоплазме циркулирующих лейкоцитов восприимчивых хозяев. Гр(-), окрашиваются по Романовскому-Гимзе в синий цвет, непожвижны. В бесклетчатых средах и куриных эмбрионах не размножаются. Чувствительны к тетрациклину. Возубдители болезней КРС, лошадей. Коудрии(Cowdria) – плеоморфные кокковидные или эллипсовидные МО. Размножаются в уитоплазме эндотелия сосудов жвачных. Красятся в синий цвет анилиновыми красками по РОманоскаому-Гимзе. Не растут в бесклеточных средах. Чувствительны к сульфанилидным и тетрациклину. Переносятся клещами. Неориккетсии (Neoriskettsia) – мелкие плеоморфные организмы. Размножаются в цитоплазме клеток лимфоидных тканей собак. Гр(-), неподвижные. Красятся анилиновыми красками в синий цвет. Не растут на бесклеточных средах. Чувствительны к тетрациклину. Бартонеллы – паразиты эритроцитов человека и др позвоночных. Округлые и эллипсовидные формы, или тонкие и прямые, или изогнутые палочки внутри эритроцитов. Гр(-). Культивируются на средах без живых клеток.Bartonella– имеют клеточную оболочку, размножаются бинарным делением, имеют жгутики.Grachamella– имеет клеточную стенку, неподвижны, Гр(-). Анаплазмы – облигатные паразиты эритроцитов диких и домашних позвоночных. Палочковидные, сферические, кокковидные или кольцеобразные. Гр(-). По Гимзе окрашиваются в красный цвет.

80.Возбудитель Ку-лихорадки (лабораторная диагностика). Ку-риккетсиоз вызываютCoxiellaburneti, хар-ся развитием ринита, пневмонии, конъюнктивитами и абортами. Болеют КРС, МРС. Другие виды животных, в том числе птицы, могут быть рикетсионосителями. Плеоморфные МО, преобладают кокковидные и палочковидные формы, шириной 0,2-0,4 мкм, длиной 0,4-1,0 мкм. Выявлены 2 фазы существования: 1-естественная форма существования МО, 2- форма существования при пассировании на куриных эмбрионах. Обе фазы Гр(-), но при некоторых условиях окрашиваются по Граму положительно. Неподвижные.Культивирование:хорошо культивируются в желчных мешках куриных эмбрионов, клеточных культурах, органах и тканях лабораторных жив-ых. Размножаются бинарным делением.Лабораторная диагностика:включает в себя – выявление специфических антител в сыворотке крови реакцией длительного связывания комплемента (РДСК). Диагностическим титром антител служит положительная РДСК в разведении исследуемой сыворотки крови 1:10 и выше. Проводят также РА и РИФ. Для лаб. Исследования берут прижизненно – кровь, клещи, собранные с животных, выделения из матки и влагалища, плаценту абортировавшего животного, от павших – кусочки пораженного легкого, головной мозг, селезенка, регионарные лимфатические узлы. Для выделения возбудителя из исследуемого материала готовят суспензию в физиологическом растворе (1:10), в которую добавляют пенициллин (1000 ЕД/мл) и стрептомицин (500ЕД/мл). Через 2-3 часа проверяют на стерильность, путем посева на МПА и в МПБ, среду Сабуро и используют для биопробы. Биопробу ставят на морских свинках/белых мышах/ 6-7 суточных куриных эмбрионах. Вводят в/б. У морских свинок – повышение температуры тела, угнетение, потеря аппетита. На 2-3 сутки производят убой. У мышей – погибаюжт через 4 суток или через 12 суток (если остались в живых) убивают по эфирным наркозом. Куриные эмбрионы – погибают через 4 суток или через 12 суток, вскрывают, извлекают желточные мешки и готовят из них мазки- отпечатки. Мазки окрашивают по: Цилю-Нильсону. Риккетсии имеют вид палочек или кокков красного цвета на синем фоне.

81.Возбудитель орнитоза (пситтакоза животных, птиц и человека).

Орнитоз (пситтакоз) — острая лихорадочная болезнь птиц и че­ловека. Протекает латентно и остро как кишечная инфекция (пти­цы) или с признаками пневмонии (телята, свиньи). У человека от­мечается легочная форма орнитоза. Возбудителя впервые выделил К. Мейер в 1933 г. Хламидии подгруппы В. Элементарные тельца имеют округлую форму размером 250... 350 мкм. Располагаются в цитоплазме макрофагов и клетках (иногда внеклеточно) в виде круп­ных скоплений, цепочками или парами. Окрашиваются по Рома­новскому—Гимзе в сине-фиолетовый или красновато-фиолето­вый цвет. Культивирование. Clamidia psittaci культивируют чаще в желточно мешке куриных эмбрионов, в культуре растущих и перевиваемы клеток: а также на белых мышах путем их заражения интраназальным, внутримозговым и внутрибрюшинны: методами. устойчивость При нагревании д 70 °С погибает в течение 10... 15 мин. В замороженном состояни (—70 °С) сохраняет жизнеспособность до 2...3 лет

. уре инактивируют в течение 3 ч.Патогенность. наиболее чувствительны дикие птицы, у которых болезнь протекает с высокой летальность] (30...50 %). Особенно тяжело болеют дикие и домашние птицы возрасте до 6...8 мес У лабораторных животных (белые мыши) обычно развивает ся пневмония. При заражении высоковирулентными штаммам мыши гибнут на 3...7-е сутки, часть из них может выживать, но легких у них находят очаги воспаленияПатогенез. Орнитоз возникает после проникновения возбудителя через слизистые оболочки верхних дыхательных путей или пищеварительного тракта. При аэрогенном заражении (ос новной путь) первичное развитие хламидий происходит в легких и регионарных лимфатических узлаЛабараторная диагностика для устоновления диагноза используют серологический метод аллергический метод световую флюрисцецию и биопробу

После заболевания возникает не продолжительный иммунитет воз-ны рецедивы болезни ,Биопрепараты для лечения и профилактики не разработаны