Определение мафАнМ в смывах с молочного оборудования

Отбор проб и анализ смывов. Взятие смывов производится с помощью увлажненных стерильных ватных тампонов или салфеток (5 х 5 см), которые готовятся заранее. В день взятия смывов в каждую пробирку наливается по 10 мл стерильного физиологического раствора, а тампон при этом фиксируется над жидкостью, так, чтобы он не прикасался к ней.

Перед взятием смыва тампон погружают в жидкость и смоченным тампоном обтирают исследуемую поверхность, ограниченную трафаретом, затем тампон погружают обратно в пробирку, которая будет служить исходным разведением 1:10.

Первый день исследования

Для определения количества МАФАнМ (мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов) в смывной жидкости, полученной с поверхности оборудования, из основного разведения 1:10 готовят ряд последовательных разведений 1:10^-2, 1:10^-3, 1:10^-4, 1:10^-5, 1:10^-6. Из каждого разведения вносят по 1 мл одновременно параллельно в две чашки Петри, каждую заливают 15-17 мл расплавленного и охлажденного до 50⁰С МПА, аккуратно перемешивают, охлаждают и помещают в термостат вверх дном на 48-72 ч при 30⁰С.

Второй - третий день исследования

Просматривают результаты посева, подсчитывают число выросших колоний, выводят средние арифметические данные, которые умножают на степень разведения и определяют количество МАФАнМ в 1 мл смывной жидкости. Полученные данные сравнивают с ГОСТом.

В 1 мл смыва должно быть не более 50 КОЕ.

Бактериологическое исследование воздуха производственных помещений.

В воздухе помещений, где производится охлаждение, упаковка готового продукта, определяют количество МАФАнМ и количество спор плесневых грибов. Воздух исследуется седиментационным или аспирационным методами. Сущность седиментационного метода заключается в том, что чашки Петри с мясо-пептонным агаром (для определения МАФАМ) и средой Сабуро (для определения колоний плесневых грибов) оставляют открытыми в течение 20 мин в трех местах обследуемого помещения, затем закрывают и инкубируют в первом случае при температуре 30⁰С в течение 72 ч, во втором – при температуре 25⁰С в течение 5 суток.

Воздух считается практически чистым, если на чашках с питательным агаром выросло в среднем до 200 колоний бактерий, а на среде Сабуро – до 20 колоний проросших спор плесневых грибов.

При исследовании воздуха аспирационным методом применяют прибор Кротова. Воздух считается практически чистым, если при просасывании 100 дм³ воздуха на чашках с МПА вырастает, не более 150 колоний бактерий, а на среде Сабуро – 15 колоний проросших спор плесневых грибов.

Задания для самостоятельной работы студентов

1. Овладеть методом взятия смывов с поверхности рук и провести посев смывов в среду Кесслер с целью определения наличия БГКП.

2. Овладеть методами взятия смывов при помощи трафаретов 5х5 см и 10х10 см с поверхности стола, стеллажей в учебном классе и провести посев из разведений 10^-1- 10^–3 с целью определения количества МАФАнМ.

3. Овладеть методами расчета для определения наличия БГКП и количества МАФАнМ в исследуемых объектах.

Список рекомендуемой литературы

1.Ветеринарно-санитарная экспертиза, стандартизация и сертификация продуктов. Т.1,2. Под редакцией проф. К.Е.Елемесова, Н.Ф.Шуклина. Издательский дом «Credo» Алматы-2002.

2. Госманов Р.Г., Колычев Н.М., Барсков А.А. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии. Омск. ОмГАУ, 2001.

3. Калина Г.П. Энтерококки. – В сб.: Методы санитарно-бактериологических исследований внешней среды. М.:Медицина, 1966, с.53.

4. Калина Г.П. Рациональная классификация БГКП в санитарно-показательном аспекте. – Гигиена и санитария, 1968, №5, с.95-98.

5. Калина Г.П, Калина А.П. Энтерококки – В сб: Санитарная микробиология. М.: Медицина, 1969, с.59-75.

6. Колычев Н.М, Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и иммунология. М. КолосС, 2003.

7. Кочемасова З.Н. и др. Санитарная микробиология и вирусология. М. Медицина, 1987.

8. Крупина А.П. Дифференциация стрептококков, встречающихся в пищевых продуктах. Лаб. дело 1963, №1, с.47-48.

9. Санитарная микробиология. Под редакцией проф. С.Я.Любашенко. М.Пищевая промышленность, 1980.

Список сокращений

мкм - микрометр

нм – нанометр

АДФ - аденозиндифосфорная кислота

АТФ – аденозинтрифосфорная кислота

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота

РНК – рибонуклеиновая кислота

Вас. – Bacillus

Cl - Clostridium

Myc. - Mycobacterium

Bact. –Bacterium

СПФ – свободное от патогенных микробов животное

ЕД. - единица действия

Ig–Immunoglobulin

МПБ – мясо-пептонный бульон

МПА – мясо-пептонный агар

МПЖ - МПБ – мясо-пептонный желатин

ПГГБ – печеночно-глюкозный глицериновфый бульон

ПГГА – печеночно-глюкозный глицериновфый агар

МППБ - мясо-пептонный печеночный бульон

МППГГА - мясо-пептонный печеночно-глюкозный глицериновый бульон

ЦНС – центральная нервная система

БГКП – бактерии группы кишечной палочки

ОМЧ – общее микробное число

РП – реакция преципитации

РА – реакция агглютинации

РСК - реакция связывания комплемента

ВИЭВ – Всероссийский институт экспериментальной ветеринарии

КМА – количество мезофильных аэробов

ФАнМ – факультативно-анаэробные микроорганизмы

ГПС – глюкозо-пептонная среда

ВНИИМП – Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности

ОГЛ А В Л Е Н И Е

Введение 3