Инструкция к практическому занятию Пероральный тест на толерантность к глюкозе (сахарная нагрузка)
Диагноз сахарного диабета ставится на основании гипергликемии (концентрация глюкозы в венозной крови натощак >7,8 ммоль/л или концентрация глюкозы в случайно взятом образце крови >11,1ммоль/л). В сомнительных случаях требуется проведение стандартного теста на толерантность к глюкозе.
Показания:
1) Неоднозначные результаты анализов крови на концентрацию глюкозы натощак, сделанных однократно.
2) Необъяснимая глюкозурия, в частности, во время беременности
3)Клинические признаки сахарного диабета или его осложнений при нормальной концентрации глюкозы в крови
Методика
Пациент получает нормальную диету, содержащую около 250г углеводов в день, в течение 3 дней. Берется анализ крови для определения исходной концентрации глюкозы натощак. Затем пациенту дается 75г глюкозы, растворенной в воде, для приема внутрь. Пробы крови для определения концентрации глюкозы берутся через 30, 60 и 120 мин.
Полученные результаты используют для построения сахарных кривых. Для этого в каждой пробе определяют концентрацию глюкозы (см. Инструкцию к практическому занятию «Исследование действия гормонов поджелудочной железы и ЖКТ. Механизм нарушения обмена веществ при сахарном диабете») и строят график зависимости концентрации глюкозы от времени взятия пробы.
В норме после нагрузки глюкозой ее концентрация в крови возрастает в течение первого часа на 50-80%. Через 2 часа уровень глюкозы снижается (часто ниже исходного), а через 2.5-3 часа возвращается к исходному. В случаях нарушения толерантности к глюкозе (НТГ) значительное (до 10,0 ммоль/л) повышение концентрации глюкозы после нагрузки сохраняется более 3 часов.
Критерии ВОЗ для постановки диагноза сахарный диабет и НТГ:
Диагноз Время взятия крови Концентрация глюкозы в венозной цельной крови
ммоль/л
Сахарный диабет натощак >6,7
2 ч после нагрузки >10,0
НТГ натощак <6,7
2 ч после нагрузки 6,7 - 10,0
Примечания
Стандартный тест на толерантность к глюкозе выполняется только в том случае, когда имеются сомнения в диагнозе. Если диагноз ясен по клиническим проявлениям и подтвержден измерением концентрации глюкозы в крови натощак или после еды, тест на толерантность является излишним.
Принцип метода.Арсено-молибденовый метод основан на свойстве глюкозы окисляться медным реактивом.
Материальное обеспечение:изотонический раствор, вольфрамат натрия, арсено-молибденовый пеактив, пробирки, штативы, водяная баня.
Ход работы:В 7 центрифужных пробирок наливают по 3,75 мл изотонического раствора и по 0,2 мл раствора вольфрамата натрия. Затем в опытные пробирки добавляют по 0,1 мл крови, а в 7-ю (стандарт) - 0,1 мл стандартного раствора глюкозы. Все пробирки центрифугируют 10 мин. Для дальнейшего исследования берут по 1 мл центрифугата (надосадочной жидкости) в обычные пробирки, добавляют по 1 мл медного реактива (готовят перед опытом, смешивая 5 мл медного реактива А и 0,2 мл медного реактива В)для окисления глюкозы, закрываютватойи 10 мин кипятят на водяной бане. Пробирки охлаждают под струей воды, затем в каждую осторожно добавляют по 3 мл арсено-молибденового реактива , встряхивают и оставляют на 10 мин. Колориметрируют пробы при красном светофильтре, в кювете шириной 1 см против контроля.
Содержание сахара в крови рассчитывают по формуле:
5,6 · Еоп
С = ----------------- (ммоль/л),
Ест
где
С - концентрация глюкозы в опытной пробе
5,6 ммоль/л - концентрация глюкозы в стандартной пробе
Еоп - экстинция опытной пробы
Ест - экстинция стандартной пробы
Полученные результаты заносятся в таблицу:
|
Время взятия крови (в минутах) |
Концентрация глюкозы в опытной пробе ( в ммоль/л ) |
|
0 |
|
|
30 |
|
|
60 |
|
|
90 |
|
|
120 |
|
|
150 |
|
Построение сахарной кривой
Конц.
глюкозы
(в ммоль/л)
Время в минутах
ВЫВОДЫ:
Подпись преподавателя:
Приложение 1