Лабораторная диагностика.

Для постановки окончательного диагноза от больных птиц берут кровь и очины вырванных перьев, от трупов селезенку, печень, тимус и опухолевые образования В лаборатории проводят гистологические исследования

Вирусный антиген в эпителии перьевых фолликулов обнаруживают в РДП. Вирус болезни Марека может быть выделен из патологического материала на куриных эмбрионах и культуре клеток, идентифицирован в РДП, патогенность его изучена на суточных цыплятах. Антитела в сыворотке крови больной птицы обнаруживают в РДП.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции.

Главный источник болезни - больная птица. Входные ворота - респираторные пути. Больная птица выделяет вирус через дыхательный и пищеварительный тракты, с шелушащимся эпителием перьевых фолликулов и перхотью (клеточно-свободный вирус). При остром течении болезни процент гибели птицы варьирует в широких пределах и иногда превышает 10-15%. При классическом заболевании поражает­ся обычно 10-30% поголовья, а смертность, как правило, ниже. Вирус БМ среди цыплят распространяется путем прямого и косвенного контакта, а также по воздуху (51, 181). Зара­жение происходит путем вдыхания инфекционного материала (перья, перхоть и пыль поме­щения). Пыль и перо длительное время остаются инфицированными. При температуре 17, 22 и 4⁰C инфекционность вируса сохраняется по меньшей мере 10 мес (срок наблюдения). В условиях термостата (37⁰C) он выживает 5 мес (9). Кожные чешуйки и сухие перья сохра­няют инфекционность 55 дн (188). В пыли птицеводческих помещений вирус в высушенном состоянии сохраняется до 1,5 лет (99). Инфекционны также подстилка и помет инфициро­ванных цыплят. Обратная связь между содержанием влаги и инфекционностью подстилки (198) может указывать на то, что инфекционный материал переходит в аэрозоль и вызывает инфекцию, либо на большую устойчивость вируса в сухом состоянии. Обе гипотезы прием­лемы, поскольку пыль птичников, которая содержит легко аэрозолирующие частицы и очень мало влаги, также является источником инфекции (46, 111). Экспериментальное примене­ние выпадающих при линьке перьев или пыли путем ингаляции и трахеального введения вызывало заболевание птиц (63). Помимо подстилки и помета инфекционной оказалась пыль, собранная с вентиляционной системы, поверхности электрооборудования и подокон­ников. Начиная со 2 или 3-й нед после заражения, цыплята выделяют вирус во внешнюю среду. Десквамированные клетки кожи, и перхоть птичников оболочек пера, являясь основ­ными компонентами пыли, служат основным средством передачи вируса (62,109,170).

Сохранение вируса в окружающей среде и его передача аэрогенным путем - причина высокой контагиозности заболевания. Цыплята в основном заражаются через респиратор­ный путь. Описана овариальная передача, но есть сведения, отрицающие это. Наблюдалось, что большие группы коммерческих цыплят, выращенных в изоляторе, не заражаются. Это указывает, очевидно, на то, что передача через яйцо - редкий феномен (81). Таким образом,'эпителий респираторного тракта - ворота для проникновения вируса. Наличие вирусспеци-фического ИФ AT в эпителии легких подтверждает эту возможность. Передача инфекцион­ного вируса по воздуху вызвана с 1-й нед жизни цыпленка-донора и продолжается в течение 3-х нед пребывания в контакте со здоровой птицей Наибольшее число случаев респиратор­ного заражения отмечено на 2-3-й нед жизни цыплят-доноров (81).

Птицы, выращенные в новых помещениях, часто тяжело заболевали. Это явление из­вестно как "синдром нового помещения". Иногда результаты выращивания птиц были луч­ше при весьма негигиенических условиях: на старом помете или небольших количествах его Это называлось "контролируемым воздействием" Обычно отход среди кур-несушек в период роста составлял 10-15%, иногда до 50% Среди молодок, начинающих нестись, от­ход бьш небольшой, около 1 % в мес, но к концу 18-мес, только половина птиц несла яйца

Птицы-носители непатогенного (природноослабленного) ВБМ пожизненно остаются источником инфекции. Интересно, что наличие патогенных шт ВБМ возрастает с увеличе­нием возраста популяции птиц Исход БМ зависит от вирулентности эпизоотического штамма, возраста зараженной птицы и её генетически обусловленной резистентное™.

В последние годы было обнаружено изменение в распространении БМ Происходит оп­ределенная эволюция этой болезни- с 1968 г процент стад с зарегистрированным заболева­нием был стабильным -от 5,8 до 8,0% в разные годы. Хотя заболевание распространено и в некоторых хозяйствах носило эндемический характер, наблюдается заметное снижение ле-• тальности и потерь. У бройлеров БМ диагностируется редко. У ремонтного поголовья сред­ний процент летальности от этой болезни в инфицированных стадах достигает 3-6 и только ¹ в некоторых случаях наблюдались потери до 20-25(8).

Поскольку вирус содержится в пыли помещений где содержится больная птица, этот ма­териал долго остается инфекционным¹ перхоть - 4 нед, пыль - 6 и подстилка - до 16 нед. Ви­рус также может передаваться жуком-чернотелкой Alphiobrus diapermus, имаго и личинки которого обнаружены не только в соломенной подстилке помещений бройлеров, но и в под­кожной клетчатке больной птицы (88). Свободно летающие дикие птицы - возможные пере­носчики вируса Из суспензии органов (печень, почки, селезенка) 164-х исследованных птиц, относящихся к 12 видам, вирус выделен у 4 от 3-х ворон обыкновенных и 1-го сквор­ца рода майна. При внутрибрюшинной инокуляции суточным цыплятам суспензии из на­пившихся кровью комаров через 4 нед обнаружили БМ у (9 из 14 и у 1 из 16)(55).

Что касается вертикальной передачи БМ, то есть сведения, что цыплята, полученные из | яиц неблагополучных хозяйств и выращенные в изоляции, не заболевали (101) При зара­жении у них появились антитела и многие цыплята погибали. Эти результаты свидетельст­вуют об отсутствии передачи с яйцом от матери потомству

Спектр патогенности вируса в естественных условиях. В естественных условиях БМ диагностирована у кур, индеек, перепелов, фазанов, уток, лебедей и куропаток Вирус изо­лирован от птиц 10 видов, относящихся к роду Callus. Установлена также и чувствитель­ность японских перепелов (117, 104) Однако данных о распространении инфекции у этого вида и о том, каково эпизоотологическое значение этого естественного резервуара вируса нет Вылупившиеся японские перепела (Coturnix coturnix Japomca) устойчивы к вирулент­ному ВБМ (64). Изменения, сходные с поражениями при БМ, отмечены у фазанов (98, ПО), уток (82), сов (97), перепелов (167), лебедей (54), куропаток (108), но этиологическая спе­цифичность этих изменений осталась не установленной. Вирус выявлен в тканевых гемоге-натах от 3 ворон и 1 скворца (176). К видам, устойчивым к лабораторному заражению ВБМ, относятся воробьи (117), голуби (149) и различные млекопитающие (64, 75), однако у уток имеются AT к вирусу. (45). Не выявлены ПА к ВБМ у цесарок, уток и городских голубей (28). Только куры являются основным, хотя и не единственным, резервуаром инфекции

Опубликованы интересные экспериментальные данные о проявлении феномена клеточ­ной связанности степени патогенности шт ВБМ, вида ткани в зависимости от метода зара­жения и сроков исследования птицы после её инфицирования. Изучали сравнительный патогенез БМ у цыплят, экспериментально зараженных высокопатогенным шт. HPRS-16, атте-нуированным YHRS-16 и природноослаблзнным (апатогенным) HPRS-26 (156). Было уста­новлено в мозге, нервных сплетениях, легких, печени, почках, гонадах, тимусе, селезенке, бурсе, коже, эпителии перьевых фолликулов, что пик накопления клеточно-ассоцииро-ванного вируса приходился на первые 2 нед после заражения. Наибольшая концентрация всех 3-х штаммов ВБМ обнаружена в легких, селезенке, печени. Первоначально клеточно-ассоциированный вирус выделяли через 1 дн после заражения в селезенке (патогенный шт HPP-16), через 4 дня - в легких, тимусе, селезенке, печени (аттенуированный шт НРР-16) В наиболее высокой концентрации обнаруживался патогенный шт. НРР-16, тогда как для ана­логичного аттенуированного она была самой низкой Интересно, что перьевые фолликулы и бурса становились позитивными в отношении ВБМ только после того, как последний был выявлен в легких, селезенке и тимусе (62). В отличие от этих результатов выявлена наи­большая концентрация клеточно-связанного вируса в эпителии перьевых фолликулов у птиц, инфицированных контактно или внутрибрюшинно Изучены сроки созревания в перь­евых фолликулах патогенного (Jd-I) и апатогенного (HN) штаммов ВБМ при двойной ин­фекции цыплят. Оба штамма одновременно вводили 2-нед цыплятам (породы белый лег­горн C-WH и высокочувствительной к данному вирусу линии WSU-VS) подкожно и путем контакта. В результате подкожного заражения оба штамма были обнаружены через 2, 4, 6 нед в крови всех кур линии WSU-VS и 50% кур линии C-WH. Через 2 нед после заражения оба вируса были обнаружены в перьевых фолликулах птиц обеих линий. Куры могут не только одновременно инфицироваться двумя вирусами различной степени патогенности, но иметь виремию в сроки, зависящие от генетической чувствительности их к ВБМ

Факторы резистентности птицы

Влияние возраста. Возраст птицы - важный фактор природной резистентности. Не­смотря на то, что опухоли у кур возникают незадолго до зрелого возраста, наиболее чувст­вительными птицы не в этот период. Только что вылупившиеся из яйца цыплята более чув­ствительны к экспериментальному заражению, чем цыплята 4 или 12 нед. При изучении распространения БМ в Индии показали, что наибольшая заболеваемость наблюдалась в группе кур 26-нед возраста (80,08%), к 71-й нед заболеваемость составляла 11,7% (172) Не у всех пород кур чувствительность к ВБМ снижается с возрастом одинаково; у некоторых она сохраняется в течение 8 нед, а затем резко падает. Возрастная резистентность не зависит от бурсоэктомии, не исчезает она и при тимэктомии. Это подтверждает, что возрастная ре­зистентность не обусловлена Т-клетками (154).

Влияние условий содержания. Условия, в которых выращиваются птицы, могут иг­рать определенную роль в уровне природной резистентности; любые случаи стресса могут считаться причиной эпизоотических форм опухоли. Переезды на дальние расстояния, изме­нения режима питания, принудительное воздействие искусственным светом, подрезка клюва с целью избежания несчастных случаев и даже перемещения в другие клетки относятся к факторам, снижающим резистентность птицы к ВБМ

Естественная вакцинация природноослабленными штаммами. Наряду со "спонтан­ным" иммунитетом, который может передаваться птицам по родительской линии, существу­ет и природноприобретенный иммунитет В некоторых стадах, где процент смертности от БМ низок, можно выделить вирус герпеса более низкой патогенности по сравнению с родо-начальным вирусом, вызывающим 100%-ную смертность. Куры из подобных стад, благода­ря их естественному заражению природноослабленным эпизоотическим вирусом приобре­тают резистентность к повторному заражению патогенным вирусом. Некоторые больные птицы, зараженные вирусом со средней патогенной способностью (30-60% смертности), мо­гут выздороветь клинически Такая возможность редка и обычно птицы, пораженные кли­ническими формами болезни, погибают. Но среди птиц со слабыми гистологическими изме­нениями определенное число выздоравливает полностью, без дальнейшего проявления кли­нических признаков. Это утверждение основывается на высокой частоте выявления гистологических изменений во время убоя партий зараженной птицы, взятых наугад. Частота таких изменений с возрастом уменьшается. Таким образом, купирование гистологических измене­ний является возможно после заражения слабопатогенным вирусом, что позволяет предпо­лагать наличие постинфекционного иммунитета к БМ.

Генетически обусловленная устойчивость. Изучение такой устойчивости начали с ау-тобредных стад цыплят промежуточной чувствительности. Удалось в 2-х генерациях путем селекции чувствительных и устойчивых пород получить стада птиц, различающихся по чув­ствительности к БМ (80). Средний падеж от БМ у генетически устойчивых, или N-линии, составлял 6%, а у генетически чувствительной или Р-линии, - 94%. Этот метод селекции был быстро заимствован птицеводческой промышленностью.

Изучали сравнительную чувствительность некоторых инбредных кур (CW, CXW, Fl) в ВШ(47). В итоге установлено различие в чувствительности к БМ и в способности продуци­рования специфических антител. Среди птиц линии Ц наблюдалась наибольшая выживае­мость после заражения. Леггорны, по-видимому, более устойчивы (летальность 6,1%), тогда как у помесей леггорн и родайденд более высокий процент (12) летальных исходов (38).

Интересные результаты были получены при изучении влияния различных доз ВБМ на развитие виремии, время выживания и смертность у цыплят 2-х линий: высокочувствитель-, ной (красный родайленд) и умеренно-резистентной (светлый Суссекс). У цыплят чувстви-¹ тельной линии доза вируса не влияла на частоту заболевания, но падеж быстрее наступал у птиц, которые получили более высокую дозу вируса (159). При изучении механизма генети­ческой резистентности выяснилось, что у резистентных птиц ниже уровень виремии, и больше уровень BHA₁ чем у чувствительных. Однако AT, очевидно, не ответственны за ре-штентность, поскольку бурсэктомия не влияла на развитие резистентности (154). ВБМ мо­жет вызывать прогрессирующие опухоли на месте введения. Рост или регрессия трансплан­тируемых опухолей не зависит от генетической чувствительности птиц к БМ. Частота воз­никновения опухолей у хозяина зависит от генетической чувствительности его к БМ (91),