4.6. Диагностика колибактериоза

Диагноз на колибактериоз телят сложен, поскольку болезнь проявляется в разных формах, часто осложняется другими инфекционными возбудителями или сочетается с неинфекционными заболеваниями.

Для прижизненной бактериологической диагностики в лабораторию направляют фекальные массы от больных и здоровых телят, а также взятую с соблюдением требований стерильности кровь из яремной вены (1-2 мл) в пробирку с 8-9 мл физиологического раствора или жидкой питательной среды от 3-4 животных, не подвергавшихся лечению противобактериальными препаратами. Для посмертной диагностики используют труп животного или следующий патологический материал: перевязанный участок тощей (подвздошной) кишки с брыжеечными лимфатическими узлами; сердце, сосуды которого перевязаны лигатурой; трубчатую кость при отсутствии механических повреждений эпифизарных хрящей (плечевая кость); сустав с ненарушенной капсулой (скакательный и др.); селезенку, почку, доли печени с желчным пузырем; кусочек легких; измененные участки с окружающей тканью; пуповину.

Пробы патологического материала для микробиологических исследований нужно отбирать от больных телят сразу после их гибели, лучше - от убитых в атональный период. Идентификацию бактериальных культур проводят по культуральным и биохимическим свойствам, а также по патогенным факторам.

Все изоляты E.coli, выделенные из содержимого тощей или подвздошной кишок, а также из фекалий, исследуют на способность к синтезу адгезивных фимбрий. На энтеротоксигенность (наличие термолабильного или термостабильного энтеротоксина) обычно исследуют только адгезинположительные E.coli. На патогенные факторы исследуют 3-10 бактериальных культур от каждого животного. При диагностике энтеротоксической формы колибактериоза важное значение имеет количество возбудителя либо в пробах фекалий (при жизни животного), либо в 1 г содержимого тощей или подвздошной кишок (при контрольном убое или гибели животного), либо в 1 г соскоба слизистой оболочки этих кишок, или же количество адгезированных бактерий на 1 см² слизистой оболочки тонкого отдела кишечника здоровых и больных телят, а также способность синтезировать энтеротоксины и адгезивные фимбрии. При такой форме болезни число энтеротоксигенных E.coli на слизистой оболочке кишечника (5 см длиной) обычно достигает в медиальном сегменте тощей кишки 3х10⁸ клеток (в 1 мл содержимого 10⁴), каудальном - 2х10⁷ (в 1 мл содержимого 10⁷-10^х), в ободочной - 6х10⁷ бактериальных клеток; на одном энтероците - 20-30 клеток, в 1 г соскоба слизистой оболочки подвздошной кишки - более 10⁵.

Сам по себе факт выделения E.coli от больных телят, а также выявление адгезивных фимбрии или способности к синтезу энтеротоксинов без учета количества бактерий в содержимом кишечника не могут служить достоверным критерием для постановки диагноза на энтеротоксическую форму колибактериоза. Положительный бактериологический диагноз при исследовании патматериала на эту форму колибактериоза телят ставят при обнаружении в пробах фекалий или содержимого тон­кого отдела кишечника (тощая или подвздошная) обильного количества E.coli с адгезивными фимбриями и способностью к синтезу энтеротоксинов.

В основе микробиологического метода исследования при диагностике септической формы колибактериоза лежит выделение чистой культуры возбудителя из крови, паренхиматозных органов, синовия суставов, мозга трубчатой кости и изучение его культурально-биохимических свойств и факторов вирулентности. Диагноз на септическую форму колибактериоза считают установленным при обильном выделении чистой культуры E.coli из крови и паренхиматозных органов, а также при наличии клинических симптомов и патологоанатомических изменений, типичных для болезней с признаками сепсиса. Титр жизнеспособных E.coli в крови телят, больных септической формой колибактериоза, может достигать 10⁴ бактериальных клеток в 1 мл.

Критерии диагностики энтеротоксемической и энтероинвазивной форм колибактериоза телят разработаны недостаточно.

Серотипирование E.coli является малоинформативным критерием при постановке диагноза на колибактериоз телят. Однако проведение его параллельно с другими тестами может быть использовано работниками научных лабораторий для подбора штаммов E.coli при изыскании и новых специфических средств профилактики и лечения, при проведении экспериментальных работ, при изучении патогенеза колибактериоза и других болезней, в этиологии которых участвуют E.coli, а также для сравнительной характеристики состава микробной популяции естественных полостей организма животных.

Длительность классического микробиологического метода исследования патологического материала не всегда отвечает потребностям практики, что относится в основном к болезням с симптомокомплексом острого расстройства пищеварения. В качестве дифференциальной экспресс-диагностики таких заболеваний рекомендуют делать мазки-отпечатки из слизистой подвздошной кишки павших или специально убитых телят; окрашивать их по Граму и исследовать под иммерсией обычного светового микроскопа. Оценка результатов делается по следующим показателям: в поле зрения микроскопа имеется почти чистая культура грамотрицательных мелких толстых палочек с закругленными концами, расположенных кучками. Ориентировочный диагноз - кишечная форма колибактериоза.