- •«Биологическая химия» для бакалавров направления 111100.62 «Зоотехния»
- •Содержание Введение
- •Цели и задачи дисциплины
- •2. Объем дисциплины и виды учебной работы
- •3. Формы и содержание текущего и итогового контроля
- •Система рейтинговой оценки
- •Система итоговой оценки знаний
- •4. Рекомендуемая литература
- •Организация работы студента
- •II. Работа с веществами и растворами
- •III. Обращение с нагревательными приборами
- •Занятие № 1. «Основы физической и коллоидной химии»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 2. «Углеводы и липиды как биогенные соединения»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 3. «Строение и физико-химические свойства аминокислот и белков»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 4. «Ферментный катализ»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 5. «Роль витаминов в метаболизме»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 6. «Гормональная регуляция обмена веществ»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 7. Коллоквиум I: «Уровни организации биогенных соединений. Ферменты. Витамины. Гормоны»
- •Занятие № 8. «Обмен веществ и энергии»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 9. «Цикл трикарбоновых кислот»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 10. «Обмен углеводов (часть 1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 11. «Обмен углеводов (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 12. «Обмен липидов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 13. «Липиды и биологические свойства клеточных мембран»
- •Экспериментальная работа.
- •X - содержание холестерина в калибровочном растворе, ммоль/л
- •Занятие № 14. «Белковый обмен»
- •Экспериментальная работа.
- •Расчетные методы определения биологической ценности белка.
- •Содержание незаменимых (для человека) аминокислот в некоторых видах продуктов, г на 100 г белка
- •Занятие № 15. «Биохимическая детоксикация»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 16. Коллоквиум II: «Обмен веществ и энергии»
- •Физиологические показатели обмена веществ у домашних и сельскохозяйственных животных.
- •Контрольные вопросы по курсу «Биологическая химия»
- •Биологическая химия
Занятие № 9. «Цикл трикарбоновых кислот»
Цель занятия: изучить механизм некоторых реакций цикла Кребса. Освоить метод количественного определения пировиноградной кислоты в моче.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
Окислительное декарбоксилирование пирувата как предварительный этап цикла лимонной кислоты. Перечислите витамины и коферменты, задействованные в этом процессе.
Реакции цикла лимонной кислоты. Что определяет общее направление реакций в цикле? В какой части клетки протекает этот процесс? Почему?
Какие коферменты и витамины участвуют в цикле Кребса? Объясните, как они работают, с указанием конкретных реакций.
Расскажите о реакциях цикла Кребса, в результате которых образуются НAДH2 и ФAДН2. Какова дальнейшая судьба этих соединений?
Функции цикла трикарбоновых кислот. Объясните, какое значение для цикла лимонной кислоты имеет анаплеротическая реакция?
Энергетический выход цикла трикарбоновых кислот. Сколько молекул ATФ образуется в ходе оборота через цикл одной молекулы лимонной кислоты? Все ли молекулы ATФ, образующиеся при полном окислении активного ацетила, синтезируются путем окислительного фосфорилирования. Как регулируется скорость цикла?
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Одним из методов количественного анализа в биохимии является фотокалориметрия. Метод основан на измерении оптической плотности окрашенных растворов, которые получают при взаимодействии субстрата с различными химическими агентами. Концентрация субстрата пропорциональна степени окрашивания раствора.
Опыт 1. Определение концентрации пировиноградной кислоты (ПВК) в моче или сыворотке крови.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Фотоколориметр.
4. Кюветы, 0,5 см.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2. Моча.
3. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
4. 2,4-динитрофенилгидразин, раствор.
В три пробирки внесите реактивы согласно следующей таблице:
Раствор |
Опытная проба, мл |
Калибровочная проба, мл |
Контрольная проба, мл |
Исследуемый образец |
2 |
- |
- |
Калибровочный раствор пирувата |
- |
2 |
- |
Дистиллированная вода |
- |
- |
2 |
2,4-динитрофенилгидразин |
0,8 |
0,8 |
0,8 |
Содержимое пробирок на 15 мин поместите в темное место при комнатной температуре.
В каждую пробирку внесите по 1 мл 10%-го раствора NаOH и через пять минут измерьте оптическую плотность при длине волны 620 нм опытной пробы против контрольной (О) и калибровочной пробы против контрольной (К).
Расчет проведите по следующей формуле:
Концентрация ПВК =
Расчет проведите и по готовому калибровочному графику.
Калибровочный график зависимости величины оптической плотности раствора (D) от концентрации ПВК в пробе.
Сравните полученные значения с нормальными величинами. Каковы причины повышенного содержания пировиноградной кислоты в сыворотке крови и моче?
Опыт 2. Определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Ступка с пестиком.
4. Водяная баня.
Реактивы. 1. Мышечная ткань.
2. Янтарная кислота, 5%-ный раствор.
3. Метиленовая синь, 0,01%-ный раствор.
4. Растительное масло.
5. Стеклянный песок.
Взвесьте 1 г мышечной ткани.
Поместите ткань в ступку, тщательно разотрите со стеклянным песком, добавляя 3-4 мл раствора 5%-ной янтарной кислоты.
Полученный гомогенат перенесите поровну в 2 пробирки.
Содержимое одной пробирки кипятите в водяной бане в течение 3-5 минут.
Затем в обе пробирки добавьте по 1 капле раствора метиленовой сини, перемешайте и залейте поверхность жидкости 0,5 мл растительного масла для изоляции от кислорода воздуха. Обе пробирки инкубируйте в водяной бане (40оС) в течение 10 минут.
Дайте объяснение наблюдаемым явлениям. Какова функция метиленовой сини в данном эксперименте? На какое соединение эта функция возлагается в живой клетке?
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________