biohimiyа
.pdfОбъясните причины изменения окраски растворов.
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Опыт 2 . Сравнение солевого состава слюны студентов.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2.Пипетки.
3.Стаканчики 100-150 мл.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2.Хлорид железа (III), 3%-ный раствор..
3.Соляная кислота, 5%-ный раствор.
1.Тщательно прополощите рот.
2.Для получения раствора слюны поместите в рот приблизительно 25 мл дистиллированной воды на 1 минуту. Полученный раствор сплюньте в стаканчик.
3.Примерно 5 мл раствора слюны поместите в пробирку. Добавьте 1 мл 5%-ного раствора соляной кислоты (до кислой реакции).
4.Добавьте в пробирку несколько капель 3%-ного раствора хлорида же-
леза (III).
5.Появление красно-бурой окраски свидетельствует о том, что в растворе есть роданиды - соли роданистоводородной кислоты (у курильщиков в слюне мало амилазы, роданидов, напротив, больше обычного).
Запишите полученные Вами результаты. Сравните с результатами, полученными другими студентами группы.
Опыт 3 . Определение рН растворов.
Для нормального протекания биологических процессов большое значение имеет активная кислотность. Это концентрация свободных ионов водорода в растворе. Активная кислотность зависит от степени диссоциации, находящихся в растворе кислот или других кислореагирующих веществ и характеризуется величиной рН. От величины рН зависит протекание биохимических процессов.
11
В настоящее время большое значение приобрел потенциометрический метод определения рН растворов, который позволяет быстро и точно ( 0,1 pH) определять значения pH даже при исследовании мутных и окрашенных растворов.
Приборы. 1. Пластиковые стаканчики. 2. рН – метр.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2.Моча.
3.Молоко.
4.Раствор яичного белка, 1%-ный.
1.Определение рН-метром проводите в пластиковых стаканчиках. Налейте по 20 мл исследуемых жидкостей в стаканчики.
2.Измерьте рН следующих биологических жидкостей: вода, моча, молоко, раствор яичного белка. Запишите полученные значения в таблицу.
3.Добавьте во все исследуемые жидкости по 1 мл дистиллированной воды и снова измерьте рН. Запишите полученные значения в таблицу.
4.Во все исследуемые жидкости (20 мл) добавьте по 4 капли 0,1 н раствора соляной кислоты. Измерьте рН и запишите полученные величины в таблицу.
5.Во все исследуемые жидкости (20 мл) добавьте по 4 капли 0,1 н раствора гидроксида натрия. Измерьте рН и запишите полученные величины в таблицу.
|
Вид биологической |
|
рН после |
рН после |
рН после |
|
№ п/п |
рН |
добавления |
добавления |
добавления |
||
жидкости |
||||||
|
|
воды |
кислоты |
щелочи |
||
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Что такое буферная емкость? Какая из исследуемых жидкостей обладает наибольшей буферной емкостью? По отношению к каким веществам (кислоте или щелочи) выражена больше буферная емкость у биологических жидкостей и почему? Почему так важно поддерживать кислотно-основное равновесие внутренней среды организма?
12
Опыт 4. Коагуляция органических коллоидов.
Белки, сложные углеводы являются органическими коллоидами. Они обладают электрическим зарядом и гидратационной оболочкой. Если органические коллоиды лишить электрического заряда и гидратационной оболочки, то произойдет коагуляция – процесс агрегации коллоидных частичек с последующим выпадением их в осадок.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2.Стеклянная палочка.
3.Набор пипеток.
Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2.Белок куриного яйца, 2%-ный раствор.
3.Сульфат меди, 5%-ный раствор.
4. Сульфат аммония, насыщенный раствор.
5.Ацетон.
1.Возьмите три пробирки. В каждую налейте по 2 мл раствора белка.
2.В первую пробирку налейте 2 мл раствора сульфата меди; во вторую – 2 мл насыщенного раствора сульфата аммония; в третью – 2 мл ацетона.
3.Запишите результаты в таблицу.
4.В каждую пробирку добавьте по 2 мл дистиллированной воды и тщательно перемешайте содержимое.
Сульфат меди |
Сульфат аммония |
Ацетон |
Вид осадка
Вид осадка после добавления воды
Объясните причину выпадения осадка в каждом конкретном случае. Что изменилось после добавления воды? Почему?
13
Опыт 5. Получение эмульсии жира в воде.
Эмульсией называется дисперсная система, состоящая из взаимно нерастворимых жидких фаз. Вещества, образующие различные фазы, должны сильно отличаться по своей полярности. Как правило, эмульсии являются грубодисперсными системами, устойчивыми только в присутствии эмульгаторов (стабилизаторов).
Приборы. 1. Штатив с пробирками. Реактивы. 1. Дистиллированная вода.
2.Растительное масло.
3.Мыло, 5%-ный раствор.
1.Возьмите пробирку. До половины заполните ее дистиллированной водой. Добавьте несколько капель растительного масла.
2.Встряхните пробирку до образования нестойкой (расслаивающейся) эмульсии.
3.Добавьте в пробирку несколько капель раствора мыла. После взбалтывания смеси образуется стойкая (нерасслаивающаяся) эмульсия.
Объясните, почему мыло стабилизирует эмульсию?
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Занятие № 3. «Физико-химические свойства углеводов»
Цель занятия: изучить качественные реакции углеводов, лежащих в основе их количественного определения в биологическом материале.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
1.Функции углеводов. Роль моно-, олиго- и полисахаридов в обеспечении жизнедеятельности организма животного.
2.Классификация углеводов.
3.Строение углеводов.
4.Физико-химические свойства углеводов.
14
5.Строение и свойства гетерополисахаридов. Биологическая роль данных соединений.
Дата выполнения______ Балл _____Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Качественная реакция Молиша на пентозную группировку.
Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток.
Реактивы. 1. Глюкоза, 1%-ный раствор.
2.Сахароза, 1%-ный раствор.
3.Крахмал, 1%-ный раствор.
4.-нафтола, 0,1%-ный раствор.
5.Серная кислота, концентрированная.
6.Яичный белок, 10%-ный раствор.
7.Уксусная кислота, концентрированная.
1.В пробирку налейте 1 мл 1%-ного раствора углевода (глюкозы или сахарозы).
2.Добавьте 2 капли свежеприготовленного 0,1%-ного спиртового раствора -нафтола (или 1%-ного спиртового раствора тимола). Смесь слегка мутнеет из-за выпадения -нафтола в осадок.
3.Осторожно из пипетки по стенке пробирки прилейте 1 мл концентрированной серной кислоты так, чтобы она опустилась на дно, не смешавшись с водным слоем. При наличии в исследуемой пробе углеводов на границе слоев появляется красно-фиолетовое кольцо.
4.Повторите пункт 1-3 с 1 мл раствора яичного белка.
5.Повторите пункт 1-3 с 1 мл раствора муцина слюны. Для получения последнего соберите в пробирку приблизительно 2 мл раствора слюны
ипо каплям (4-5 капель) прилейте концентрированную уксусную кислоту. После осторожного отделения жидкости на дне пробирки остается сгусток муцина.
Объясните результаты опыта.
Опыт 2. Реакция Троммера на редуцирующие сахара.
Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток.
15
Реактивы. 1. Глюкоза, 1%-ный раствор.
2.Сахароза, 1%-ный раствор.
3.Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
4.Сульфат меди, 1%-ный раствор.
1.Возьмите две пробирки.
2.В одну из 2-х пробирок налейте 1 мл 1%-ного раствора глюкозы, во вторую – 1 мл 1%-ного раствора сахарозы.
3.В обе пробирки добавьте по 5 капель 10%-ного раствора гидроксида натрия и 2 капли 1%-ного раствора сульфата меди (II).
4.Нагрейте пробирки до кипения в кипящей водяной бане в течение 1 минуты.
Объясните, почему глюкоза дает положительную пробу Троммера (желтый или красно-коричневый осадок), а сахароза нет?
Опыт 3. Гидролиз крахмала в кислой среде.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2.Набор пипеток.
3.Водяная баня, кипящая.
4.Секундомер.
5.Стеклянная палочка.
Реактивы. 1. Глюкоза, 1%-ный раствор.
2.Дистиллированная вода.
3.Крахмал, 1%-ный раствор.
4.Соляная кислота, концентрированная.
5.Люголя раствор.
1.В пробирку налейте 1 мл 1%-ного раствора крахмала и 3 капли концентрированной соляной кислоты.
2.Поставьте пробирку в кипящую водяную баню.
3.Через 2 минуты возьмите 3 капли раствора пипеткой и вылейте в пробирку с 5-тью мл дистиллированной воды. Сюда же добавьте 1 каплю раствора Люголя. Занесите в таблицу наблюдаемую окраску раствора.
4.Пробирку с раствором крахмала кипятите еще 2 минуты, и снова проведите такую же пробу с йодом.
5.Описанную последовательность действий проводите до тех пор, пока реакция с йодом не будет отрицательной (жидкость окрашивается в желтый цвет).
16
Время с момента начала кипения |
Цвет раствора крахмала с реактивом Люголя |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
6.С гидролизатом крахмала (нейтрализованного по лакмусу) проведите реакцию Троммера (см. опыт 2).
Объясните результаты эксперимента.
Опыт 4. Выделение гликогена из печени.
Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток.
Реактивы. 1. Жир.
2.Сливочное масло.
3.Растительное масло.
4.Хлороформ.
5.Йод, 0,001 н спиртовой раствор
1.Взвесьте 0,5 г печени.
2.Поместите ее в ступку.
3.Добавьте 3 мл 5%-ного раствора ТХУ и растирайте пестиком в течение
10 мин.
4.К полученной массе добавьте 5 мл дистиллированной воды.
5.Суспензию перемешайте и фильтруйте через бумажный фильтр, смоченный водой.
6.С фильтратом проделайте реакцию с раствором Люголя.
7.Объясните полученный результат.
Дата выполнения ______ Балл ______ Подпись преподавателя ____________
17
Занятие № 4. «Физико-химические свойства липидов»
Цель занятия: cформировать знания о физико-химических свойствах липидов.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
1.Биохимические функции липидов в организме животных.
2.Классификация и строение липидов.
3.Физико-химические свойства липидов.
4.Строение и функции фосфолипидов.
5.Строение и функции холестерина и животного воска.
Опыт 1. Образование жирной капли и еѐ экстракция.
Приборы. 1. Фильтровальная бумага. 2. Капилляры.
Реактивы. 1. Диэтиловый эфир.
2.Ацетон.
3.Растительное масло.
4.Хлороформ.
5.Вода дистиллированная.
1.На фильтровальную бумагу нанесите 3 отдельные капли масла, размером около 1 см.
2.К центру первой капли дотроньтесь стеклянным капилляром содержащим диэтиловый эфир (хлороформ), ко второй - ацетон, к третьей - воду.
3.Опишите результаты опыта и сделайте выводы.
Опыт 2. Изучение свойств насыщенных и ненасыщенных жирных кислот.
Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток.
Реактивы. 1. Жир.
2.Сливочное масло.
3.Растительное масло.
4.Хлороформ.
5.Йод, 0,001 н спиртовой раствор.
1.Возьмите три сухие пробирки.
2.В первую пробирку поместите 0,5 мл свиного сала, в другую 0,5 мл сливочного масло, в третью 0,5 мл растительного масла.
18
3.Ко всем пробиркам добавьте по 2 мл хлороформа.
4.Титруйте полученные смеси 0,001 н спиртовым раствором йода до отчетливой розовой окраски.
Запишите число капель йода, пошедшего на титрование каждого вида жира и расположите жиры в порядке убывания степени насыщенности. Объясните принцип определения степени ненасыщенности жиров.
Опыт 3. Эмульгирование жирных масел.
Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток.
Реактивы. 1. Глюкоза, 1%-ный раствор.
2.Дистиллированная вода.
3.Карбонат натрия, 2%-ный раствор.
4.Мыло, 2%-ный раствор.
5.Желчь.
1.Возьмите четыре сухие пробирки.
2.В каждую пробирку внесите по 0,5 мл растительного масла.
3.В первую пробирку добавьте 2 мл дистиллированной воды, во вторую
–2 мл 2%-ного раствора карбоната натрия (соды), в третью – 2 мл 2%- ного раствора мыла, в четвертую – 2 мл воды и несколько капель желчи.
Отметьте и объясните полученные результаты.
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________________________________________
19
Опыт 4. Омыление жиров.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Держатель для пробирок. Реактивы. 1. Сало.
2.Гидроксид натрия, 35%-ный раствор.
3.Вода дистиллированная.
1.Налейте в сухую пробирку 0,5 мл касторового масла и 4 капли 35%- ного раствора гидроксида натрия.
2.Тщательно размешайте смесь стеклянной палочкой до получения однородной эмульсии.
3.Поставьте пробирку на водяную баню и нагревайте, помешивая, до получения однородной, прозрачной, слегка желтоватой жидкости.
4.Затем добавьте 2 мл дистиллированной воды и вновь нагрейте, тщательно перемешивая до полного удаления воды.
5.Что получилось в результате? Объясните, почему Вы сделали такой вывод.
Дата выполнения ______ Балл ______ Подпись преподавателя ____________
Занятие № 5. «Строение и физико-химические свойства аминокислот и белков»
Цель занятия: cформировать знания о физико-химических свойствах аминокислот и белка. Обучить методике выполнения цветных реакций на белки и аминокислоты. Провести реакции осаждения белка и объяснять их механизмы. Сформировать знания о структурной организации белков.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
1.Биологические функции аминокислот, их строение и классификация.
2.Биологические функции пептидов, их классификация.
3.Охарактеризуйте уровни организации белковой молекулы и химические связи их стабилизирующие.
4.Классификация белков. Функции белков различных классов в осуществлении биохимических реакций.
5.Денатурация и ренатурация белков.
Дата выполнения______ Балл _____Подпись преподавателя ____________
20