Ориентировочная основа действий при выполнении практической работы

1. Ознакомиться с назначением подразделений, с оборудованием, режимом работы бактериологической лаборатории, основные подразделения - боксы для работы с микроорганизмами, помещение для серологических исследований, стерилизации, мытья посуды, виварий для животных и оборудованием: термостат, микроанаэростат, сушильные шкафы, холодильники, центрифуги, устройство для подсчета колоний, дистиллятор, рн-метр, аналитические весы, водяные бани, комплект инструментов: штативы, иглы, пинцеты, лабораторная посуда (матрасы, чашки Петри, флаконы, ампулы, колтеровские и глазурованные ступы). Каждое рабочее место оборудовано газовой горелкой, спиртовкой, дезинфицирующим раствором, питательными средами.

Техника безопасности в бактериологической лаборатории:

а) запрещено - курить, принимать пищу.

б) рабочее место должно быть чистым. Личные вещи сохранять в специальных местах.

в) в случае попадания зараженного материала на стол, пол и другие поверхности. Эти места обработать дезинфицирующим раствором.

г) хранение, наблюдение, уничтожение микробов должно быть сделано по спец. инструкции. Регистрация патологических микробов проводится только в стерильном ''''''.

д) по окончанию работ необходимо тщательно вымыть руки, а при необходимости обработать их дезинфицирующим раствором.

В протоколе отметить основные подразделения бактериологической лаборатории.

2. Ознакомиться с основными видами микроскопии:

а) темнопольная микроскопия основана на явлении дифракции света при большом боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частичек. Это достигается с помощью параболоид или кардиоид - конденсатора.

б) фазово-контрастная микроскопия основана на преобразовании изменений, которые возникают при прохождении световой волны через фазовые (прозрачные) объекты, в изменении по амплитуде, которые видны глазом. Положительным фазовым контрастом называют темную окраску объектов в светлом поле зрения, отрицательным фазовым контрастом - светлая окраска объекта на темном фоне. Для фазово-контрастной микроскопии используют обычные микроскопы и фазово-контрастные устройства КФ-1 или КФ-4.

в) Люминесцентная (флюорисцентная) микроскопия основана на явлении фотолюминесценции ( Futen-свет). Люминесцентное излучение веществ возникает после действия на них каких-то источников энергии: света, электрических лучей, ионизирующего излучения. Фотолюминесценция - люминесценция объекта под влиянием света.

Первичная люминесценция - без окрашивания объектов, вторичная - после крашения препаратов специальными красками флюорохромами. Преимущество - возможно выявление живых бактерий в небольших количествах.

г) Электронная микроскопия позволяет выявить объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа (0,2 мкм). Электронный микроскоп используется для изучения вирусов, макромолекулярных структур и других субмикроскопических объектов. Световые лучи в таких микроскопах заменяют потоком электронов, которые имеют длину волны около 0,005 нм., т.е. в 1000000 раз короче длины волны видимого света. Кроме этого используют сканирующие электронные микроскопы, которые позволяют рельефно отобразить поверхности объекта.

Отметить в протоколе основные виды микроскопии и указать физические принципы, на которых они базируются.

3. Рассмотреть под микроскопом готовые фиксированные препараты микроорганизмов.

Микроскопия мазков с помощью иммерсионной системы: на подготовленный мазок наносится капля иммерсионного масла, который укладывается на предметный столик, после чего повернуть револьвер на отметку иммерсионного объектива *90, потом опустить тубус микроскопа до углубления объектива в каплю масла; установить ориентировочный фокус при помощи макровинта, провести окончательную фокусировку предмета макровинтом, возвращая его в пределах только одного оборота. Не допускать сжатия объективом препарата, так как это может вызвать повреждение препарата или фронтальной линзы. После окончания работы с микроскопом специальной тряпочкой протереть масло с иммерсионного объектива и привести револьвер на малый сухой объектив *8.

Записать в протокол этапы микроскопии при использовании микроскопу с иммерсионной системой.