- •4. Произвести бактериоскопическое исследование гноя и определить морфологию и тинкториальные свойства имеющихся микроорганизмов.
- •5. Сделать посев исследуемого материала петлей на жидкую и плотную питательные среды.
- •6. Выполнить 1 этап выделения чистой культуры, оценить культуральные свойства по готовым посевам.
- •7. Произвести посев на косой агар с целью выделения чистой культуры микроорганизмов.
- •13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
- •17. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
- •18. Поставить рпга для определения титра антител в сыворотке больного. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
Взять ряд пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640 и контролями гемолитической системы, антигена и комплемента.
Учет начать с контрольных пробирок. В пробирке контроля гемолитической системы выявить отсутствие гемолиза, в контролях антигена и комплемента – гемолиз. В опытных пробирках определить отсутствие или наличие гемолиза.
При отсутствие гемолиза РСК положительная. При наличии гемолиза РСК отрицательная. В положительном случае дать заключение о наличии в сыворотке больного специфических антител и определить их титр, т.е. наибольшее разведение сыворотки больного, при котором отсутствует гемолиз.
14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.
Взять пробирку и осторожно по стенке внести пастеровской пипеткой около 0,5 мл преципитирующей менингококковой сыворотки. Затем аккуратно наслоить на сыворотку такое же количество ликвора так, чтобы ликвор не смешивался с сывороткой, а образовал над ней верхний слой. Пробирку поставить в штатив. При положительном результате сразу на границе обеих жидкостей образуется мутное кольцо преципитации.
15. Оценить РПГА для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).
Оценивают результаты РПГА по характеру осадка эритроцитов. Отрицательная реакция – осадок компактный в виде колечка с ровными краями, «пуговица», положительная – характерный кружевной осадок в виде зонтика. Титр токсина – предельное разведение фильтрата, дающее положительный результат.
16. Поставить РГА для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
Постановка реакции гемагглютинации для индикации и титрования вируса.
Разведения |
1:5 |
1:10 |
1:20 |
1:40 |
1:80 |
1:160 |
К |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
Физ.раствор |
0,8 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
Аллантоисная жидкость |
0,2 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
- |
Взвесь эритроцитов |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0.4 |
0,4 |
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
Заключение: |
Максимальное разведение аллантоисной жидкости, еще дающее гемагглютинацию (осадок в форме зонтика), принимается за титр гемагглютинирующего вируса.
17. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
Берут 2 ряда пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, К (контроль). Учет начинают с контрольных пробирок, в которых должен быть осадок эритроцитов в виде «зонтика». Затем сравнивают результаты опытных пробирок с контролем. При наличии осадка эритроцитов в виде «пуговки» результат оценивается положительно, при наличии «зонтика» - отрицательно.
Определяют титры антител в двух рядах сыворотки и сравнивают.
Для серологического подтверждения вирусной инфекции титр антител во II-й сыворотке, взятой в конце заболевания, должен возрасти не менее, чем в 4 раза по сравнению с I-й сывороткой больного.