Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Практические навыки микробиология.doc
Скачиваний:
142
Добавлен:
05.02.2016
Размер:
104.96 Кб
Скачать

13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.

Взять ряд пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640 и контролями гемолитической системы, антигена и комплемента.

Учет начать с контрольных пробирок. В пробирке контроля гемолитической системы выявить отсутствие гемолиза, в контролях антигена и комплемента – гемолиз. В опытных пробирках определить отсутствие или наличие гемолиза.

При отсутствие гемолиза РСК положительная. При наличии гемолиза РСК отрицательная. В положительном случае дать заключение о наличии в сыворотке больного специфических антител и определить их титр, т.е. наибольшее разведение сыворотки больного, при котором отсутствует гемолиз.

14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.

Взять пробирку и осторожно по стенке внести пастеровской пипеткой около 0,5 мл преципитирующей менингококковой сыворотки. Затем аккуратно наслоить на сыворотку такое же количество ликвора так, чтобы ликвор не смешивался с сывороткой, а образовал над ней верхний слой. Пробирку поставить в штатив. При положительном результате сразу на границе обеих жидкостей образуется мутное кольцо преципитации.

15. Оценить РПГА для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).

Оценивают результаты РПГА по характеру осадка эритроцитов. Отрицательная реакция – осадок компактный в виде колечка с ровными краями, «пуговица», положительная – характерный кружевной осадок в виде зонтика. Титр токсина – предельное разведение фильтрата, дающее положительный результат.

16. Поставить РГА для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.

Постановка реакции гемагглютинации для индикации и титрования вируса.

Разведения

1:5

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

К

1

2

3

4

5

6

7

Физ.раствор

0,8

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

Аллантоисная жидкость

0,2

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

-

Взвесь эритроцитов

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

0.4

0,4

Результат

Заключение:

Максимальное разведение аллантоисной жидкости, еще дающее гемагглютинацию (осадок в форме зонтика), принимается за титр гемагглютинирующего вируса.

17. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.

Берут 2 ряда пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, К (контроль). Учет начинают с контрольных пробирок, в которых должен быть осадок эритроцитов в виде «зонтика». Затем сравнивают результаты опытных пробирок с контролем. При наличии осадка эритроцитов в виде «пуговки» результат оценивается положительно, при наличии «зонтика» - отрицательно.

Определяют титры антител в двух рядах сыворотки и сравнивают.

Для серологического подтверждения вирусной инфекции титр антител во II-й сыворотке, взятой в конце заболевания, должен возрасти не менее, чем в 4 раза по сравнению с I-й сывороткой больного.