7.1.3 Качественные химические реакции
Для диагностики сырья проводят также качественные реакции на антраценпроизводные. Для этого внутреннюю поверхность смачивают 10%-ным раствором гидроксида натрия и наблюдают появление кроваво-красного окрашивания.[15]
К 50мл измельченного сырья прибавляют 25 мл кислоты хлористоводородной P и нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают встряхивают с 20 мл эфира P и отбрасывают водный слой. Эфирный слой встряхивают с 10 мл раствора аммиака разведенного P1. Водный слой окрашивается в красновато-фиолетовый цвет. [14]
При микровозгонке порошка образуется желтый кристаллический налет, который при добавлении 10%-ного спиртового раствора гидроксида натрия приобретает вишнево-красное окрашивание (производные антрацена).[16]
Некоторые вопросы стандартизации ЛРС остаются нерешенными. Раздел "Качественные реакции" в ФС " Кора крушины ломкой" включает только пробирочные реакции.[14]
7.2 Доброкачественность лрс
Доброкачественность – это соответствие ЛРС требованиям нормативных документов.
Испытания ( числовые показатели).
Тонкослойная хроматография.
Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченного сырья прибавляют 5 мл спирта(70% об/об) P и нагревают до кипения. Охлаждают и центрифугируют. Раствор быстро сливают и используют в течение 30 мин.
Раствор сравнения. 20 мг барбалоина P растворяют в спирте(70% об/об) Pи доводят до объема 10 мл этим же растворителем.
Пластинка. ТХС пластинка со слоем подходящего селикагеля.[14]
Подвиженая фаза. Вода P - метанол P – этилацетат P ( 13:17:100, об/об/об).
Наносимый объем пробы по 10мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10см от линии старта.
Высушивание: на воздухе в течение 5 мин.
Проявление: пластинку опрыскивают раствором 50 г/л калия гидроксида Р в спирте (50%, об/об) Р и нагревают при температуре от 1000 С до 1050 С в течении 15 мин. Просматривают в ультрофиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: хроматограмме раствора сравнения в центральной части обнаруживается зона коричневато-желтого цвета (барбалоин). На хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться ни зоны с интенсивной желтой флуоресценцией, ни флуоресцирующая зона от оранжевого до красноватого цвета, соответствующие барбалоину на хроматограмме раствора сравнения.
На другую пластинку наносят 10 мкл. испытуемого раствора и далее поступают как описано выше. Высушивают пластинку не более 5 мин, немедленно опрыскивают раствором 5г/л нитротетразолиевого синего Р в метаноле Р и немедленно просматривают при дневном свете. Не должны обнаруживаться фиолетовые или серовато-синие зоны.[14]
Количественное определение. Испытание проводят с защитой от яркого света.
0,250 г измельченного сырья (180) помещают в круглодонную колбу со шлифом, прибавляют 25,0 мл 70% (об/об) метанола Р, перемешивают и взвешивают. Нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течении 15 мин. Охлаждают, взвешивают, доводят до первоначальной массы 70% (об/об) метанолом Р и фильтруют. 5,0 мл фильтрата помещают в делительную воронку, прибавляют 50 мл воды Р и 0,1 мл кислоты хлористоводородной Р и встряхивают пять раз с петролейным [14] эфиром Р порциями по 20 мл. Выдерживают до разделения слоев и сливают нижний водный слой в мерную колбу вместимостью 100 мл. Органические слои объединяют и отмывают дважды водой Р порциями по 15 мл. Эту воду используют для промывки делительной воронки и прибавляют к водному раствору в мерной колбе. Прибавляют 5 мл раствора 50 г/л натрия карбоната Р и доводят водой Р до объема 100,0 мл. Органический слой отбрасывают. 40 мл водного раствора переносят в круглодонную колбу вместимостью 200 мл со шлифом, прибавляют 20 мл раствора 200 г/л железа (III) хлорида Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течении 20 мин. Уровень воды в бане должен быть выше уровня раствора в колбе. Прибавляют 2 мл кислоты хлористоводородной Р и продолжают нагревание еще 20 мин, интенсивно встряхивая до растворения осадка. Охлаждают, переливают смесь и делительную воронку и встряхивают с тремя объемами, каждый раз по 25 мл, эфира Р предварительно использованного для ополаскивания колбы. Объединенный эфирный экстракты отмывают дважды водой Р порциями по 15 мл. Эфирный слой переносят в эфирную колбу и доводят эфиром Р до объема 100,0 мл. 20,0 мл полученного раствора осторожно выпаривают досуха. Остаток растворяют в 10,0 мл раствора 5 г/л магния ацетат Р в метаноле Р.
Измеряют оптическую плотность раствора при 515 нм, использую метанол Р в качестве компенсационного раствора.
Содержание глюкофрангулинов в пересчете на глюкофрангулин А в процентах рассчитывают по формуле:
,
где: 204 – удельный показатель поглощения глюкофрангулина А;
А - оптическая плотность раствора;
m - масса навески испытуемого сырья, г.[14]
Допустимые примеси. Несырьевые части растения: куски коры, покрытые кустистыми лишайниками, - не более 1%; куски коры с остатками древесины – не более 1%; куски коры толще 2 мм – не более 3 %. Органические примеси: не более 0,5%. Минеральные примеси: не более 0,5%. Потеря в массе при высушивании. Не более 10,0%. 1,000 г измельченного сырья сушат при температуре 100 0 С до 105 0 С в течение 2 часов
Общая зола. Не более 6,0 %