2006_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_1
.pdfмешивают. После застывания агара чашки подсушивают для удаления конденса-
та с поверхности среды.
На поверхность агара бактериологической петлей или репликатором нано-
сят бляшками инокулят каждого тест-штамма бактерий и грибов на среды № 1 и № 2 соответственно.
Чашки со средой № 1 инкубируют при температуре от 300С до 350С в течение 48 часов. Чашки со средой № 2 инкубируют при температуре от 200С до 250С в тече- ние 3-5 суток.
Учет результатов
После окончания сроков инкубации посевов (появление типичного роста
тест-микроорганизмов в контрольных чашках без лекарственного средства) отме- чают наличие или отсутствие роста тест-штаммов бактерий и грибов на средах, в
которые вносили различные разведения лекарственного средства.
Отсутствие роста тест-микроорганизма на среде с препаратом свидетель-
ствует о том, что исследуемый препарат в данном разведении обладает антимик- робным действием в отношении определенного тест-микроорганизма.
НЕЙТРАЛИЗУЮЩИЕ АГЕНТЫ
Для нейтрализации активности антимикробных компонентов могут исполь-
зоваться нейтрализующие агенты. Они могут быть добавлены к буферизирован- ному раствору хлорида натрия и пептона рН 7,0, предпочтительно, перед стери-
лизацией. В случае применения нейтрализующих агентов должна быть показана
их эффективность и нетоксичность в отношении микроорганизмов.
Типичная нейтрализующая жидкость имеет следующий состав:
Полисорбат 80 |
30 г |
Лецитин (яичный) |
3 г |
Гистидина гидрохлорид |
1 г |
Пептон (мясной или казеиновый) |
1 г |
Натрия хлорид |
4,3 г |
Калия дигидрофосфат |
3,6 г |
Натрия гидрофосфата дигидрат |
7,2 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Раствор стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 мин.
Если нейтрализующая способность раствора недостаточна, концентрация полисорбата 80 или лецитина может быть увеличена. Кроме того, могут быть до-
бавлены нейтрализаторы, перечисленные в Таблице 2.6.13.-3.
Таблица 2.6.13.-3
Инактиваторы антимикробных агентов, добавляемые к буферизированному рас- твору хлорида натрия и пептона рН 7,0
Тип антимик- |
Инактиватор |
Концентрация |
Комментарий |
робного агента |
|
|
|
Фенолы |
Натрия |
лаурил- |
4 г/л |
|
Добавляют после стерили- |
|
|
сульфат |
|
|
|
зации |
буферизированного |
|
Полисорбат 80 и |
30 г/л и 3 г/л |
|
раствора хлорида натрия и |
||
|
лецитин |
|
|
|
пептона рН 7,0 |
|
|
Яичный желток |
5 мл/л – |
50 |
|
|
|
|
|
|
мл/л |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Ртутьоргани- |
Натрия |
тиоглико- |
0,5 г/л – 5 г/л |
|
|
|
ческие соеди- |
лят |
|
|
|
|
|
нения |
|
|
|
|
|
|
Галогены |
Натрия |
тиосуль- |
5 г/л |
|
|
|
|
фат |
|
|
|
|
|
Четвертичные |
Яичный желток |
5 мл/л – |
50 |
Добавляют после стерили- |
||
аммониевые |
|
|
мл/л |
|
зации |
буферизированного |
соединения |
|
|
|
|
раствора хлорида натрия и |
|
|
|
|
|
|
пептона рН 7,0 |
РЕКОМЕНДУЕМЫЕ РАСТВОРЫ И ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ
Нижеописанные растворы и питательные среды удовлетворяют целям, для которых они предназначены в фармакопейном испытании на микробную контами-
нацию. Могут быть использованы и другие среды, при условии, что они имеют
аналогичные питательные и селективные свойства в отношении тестируемых микроорганизмов.
Буферизированный раствор хлорида натрия и пептона рН 7,0
Калия дигидрофосфат |
3,6 г |
Натрия гидрофосфата дигидрат, эквивалент фосфата 0,067 М |
7,2 г |
Натрия хлорид |
4,3 г |
Пептон (мясной или казеиновый) |
1,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
К этому раствору могут быть добавлены поверхностно-активные компонен-
ты и инактиваторы антибактериальных агентов, например, полисорбат 80 в коли- честве от 1 г/л до 10 г/л. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в тече- ние 15 минут.
Питательный бульон А (бульон на основе гидролизатов казеина и соевых
бобов)
Панкреатический гидролизат казеина |
17,0 г |
Папаиновый гидролизат соевых бобов |
3,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Калия гидрофосфат |
2,5 г |
Глюкозы моногидрат |
2,5 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 7,3±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут.
Агаризованная среда В (агаризованная среда на основе гидролизатов ка-
зеина и соевых бобов)
Панкреатический гидролизат казеина |
15,0 г |
Папаиновый гидролизат соевых бобов |
5,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Агар |
15,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 7,3±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15
минут.
Агаризованная среда С (декстрозный агар Сабуро с антибиотиками)
Пептоны (мясной и казеиновый) |
10,0 г |
Глюкозы моногидрат |
40,0 г |
Агар |
15,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 5,6±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15
минут. Непосредственно перед применением на литр среды добавляют 0,10 г бензилпенициллина натриевой соли и 0.10 г тетрациклина в виде стерильных рас-
творов или добавляют 50 мг хлорамфеникола на 1 литр среды перед стерилиза-
цией.
Питательный бульон D (лактозный бульон) |
|
Говяжий экстракт |
3,0 г |
Панкреатический гидролизат желатина |
5,0 г |
Лактозы моногидрат |
5,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 6,9±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут и немедленно охлаждают.
Обогатительный питательный бульон Е (обогатительный бульон Моссе-
ля для энтеробактерий)
Панкреатический гидролизат желатина |
10,0 г |
Глюкозы моногидрат |
5,0 г |
Дегидратированная бычья желчь |
20,0 г |
Калия дигидрофосфат |
3,0 г |
Натрия гидрофосфата дигидрат |
8,0 г |
Бриллиантовый зеленый |
15 мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после нагрева оно составляло 7,2±0,2. Нагревают при 1000С в течение 30 минут и немедленно охлаждают.
Агаризованная среда F (агаризованная среда с глюкозой, кристалличе-
ским фиолетовым, нейтральным красным и желчью)
Дрожжевой экстракт |
3,0 г |
Панкреатический гидролизат желатина |
7,0 г |
Соли желчных кислот |
1,5 г |
Лактозы моногидрат |
10,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Глюкозы моногидрат |
10,0 г |
Агар |
15,0 г |
Нейтральный красный |
30 мг |
Кристаллический фиолетовый |
2 мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после нагрева оно составляло 7,4±0,2. Нагревают до кипения: не нагревают в автоклаве.
Питательный бульон G (бульон Макконки) |
|
Панкреатический гидролизат желатина |
20,0 г |
Лактозы моногидрат |
10,0 г |
Дегидратированная бычья желчь |
5,0 г |
Бромкрезоловый пурпурный |
10 мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 7,3±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15
минут.
Агаризованная среда H (агар Макконки) |
|
|
Панкреатический гидролизат желатина |
17,0 |
г |
Пептоны (мясной и казеиновый) |
3,0 г |
|
Лактозы моногидрат |
10,0 |
г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
|
Соли желчных кислот |
1,5 г |
|
Агар |
13,5 |
г |
Нейтральный красный |
30,0 |
мг |
Кристаллический фиолетовый |
1 мг |
|
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 7,1±0,2. Кипятят в течение одной минуты при постоянном встряхивании, затем стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут.
Питательный бульон I (бульон на основе тетратионата, желчи и брилли- антового зеленого)
Пептон |
8,6 г |
Бычья желчь, высушенная |
8,0 г |
Натрия хлорид |
6,4 г |
Кальция карбонат |
20,0 г |
Калия тетратионат |
20,0 г |
Бриллиантовый зеленый |
70 мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после нагрева оно составляло 7,0±0,2. Нагревают только до кипения. Повторное нагревание не допускается
Агаризованная среда J (агар на основе дезоксихолата и цитрата)
Говяжий экстракт |
10,0 г |
Мясной пептон |
10,0 г |
Лактозы моногидрат |
10,0 г |
Натрия цитрат |
20,0 г |
Железа (III) цитрат |
1,0 г |
Натрия дезоксихолат |
5,0 г |
Агар |
13,5 г |
Нейтральный красный |
20 мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после нагрева оно составляло 7,3±0,2. Осторожно нагревают до кипения и кипятят 1 минуту, охлаждают до 500С
и разливают по чашкам Петри. Не автоклавируют.
Агаризованная среда К (агар на основе ксилозы, лизина, дезоксихолата)
Ксилоза |
3,5 г |
L-Лизин |
5,0 г |
Лактозы моногидрат |
7,5 г |
Сахароза |
7,5 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Дрожжевой экстракт |
3,0 г |
Феноловый красный |
80 мг |
Агар |
13,5 г |
Натрия дезоксихолат |
2,5 г |
Натрия тиосульфат |
6,8 г |
Железа(III)-аммония цитрат |
0,8 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после нагрева оно составляло
7,4±0,2. Нагревают только до кипения, охлаждают до 500С и разливают по чашкам Петри. Не автоклавируют.
Агаризованная среда L (агар на основе бриллиантового зеленого, фено- лового красного, лактозы и сахарозы)
Пептоны (мясной или казеиновый) |
10,0 |
г |
Дрожжевой экстракт |
3,0 г |
|
Натрия хлорид |
5,0 г |
|
Лактозы моногидрат |
10,0 |
г |
Сахароза |
10,0 |
г |
Агар |
20,0 |
г |
Феноловый красный |
80 мг |
|
Бриллиантовый зеленый |
12,5 |
мг |
Вода очищенная |
1000 мл |
Нагревают до кипения и кипятят 1 минуту. Значение рН доводят таким об- разом, чтобы после стерилизации оно составляло 6,9±0,2. Непосредственно пе- ред использованием стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение
15 минут, охлаждают до 500С и разливают по чашкам Петри.
Агаризованная среда М (тройной агар на основе сахара и железа)
Говяжий экстракт |
3,0 г |
Дрожжевой экстракт |
3,0 г |
Пептоны (казеиновый или говяжий) |
20,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Лактозы моногидрат |
10,0 г |
Сахароза |
10,0 г |
Глюкозы моногидрат |
1,0 г |
Железа(III)-аммония цитрат |
0,3 г |
Натрия тиосульфат |
0,3 г |
Феноловый красный |
25 мг |
Агар |
12,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Нагревают до кипения и кипятят 1 минуту, встряхивая. Значение рН доводят
таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,4±0,2. Разливают по пробиркам на третью часть их высоты, стерилизуют в паровом стерилизаторе при
1210С в течение 15 минут и оставляют до охлаждения в положении, обеспечи- вающем получение образца в форме столбика и скошенной поверхности.
Агаризованная среда N (агар на основе цетримида) |
|
|
Панкреатический гидролизат желатина |
20,0 |
г |
Магния хлорид |
1,4 г |
|
Калия сульфат |
10,0 |
г |
Цетримид |
0,3 г |
|
Агар |
13,6 |
г |
Вода очищенная |
1000 мл |
|
Глицерин |
10,0 |
мл |
Нагревают до кипения и кипятят 1 минуту, встряхивая. Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут.
Агаризованная среда О (агар Байерд-Паркера) |
|
Панкреатический гидролизат казеина |
10,0 г |
Говяжий экстракт |
5,0 г |
Дрожжевой экстракт |
1,0 г |
Лития хлорид |
5,0 г |
Агар |
20,0 г |
Глицин |
12,0 г |
Натрия пируват |
10,0 г |
Вода очищенная |
950 мл |
Нагревают до кипения и кипятят 1 минуту, встряхивая. Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 6,8±0,2. Стерилизуют в
паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут, охлаждают до 45-500С и
добавляют 10 мл стерильного раствора теллурита калия с концентрацией 10 г/л и 50 мл эмульсии яичного желтка.
Питательная среда Р (обогащенная среда для клостридий)
Говяжий экстракт |
10,0 г |
Пептон |
10,0 г |
Дрожжевой экстракт |
3,0 г |
Растворимый крахмал |
1,0 г |
Глюкозы моногидрат |
5,0 г |
Цистеина гидрохлорид |
0,5 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Натрия ацетат |
3,0 г |
Агар |
0,5 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Агар замачивают, растворяют путем нагревания до кипения при постоянном перемешивании. При необходимости, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло около 6,8. Стерилизуют в паровом стерили- заторе при 1210С в течение 15 минут.
Питательная среда Q (колумбийский агар)
Панкреатический гидролизат казеина |
10,0 г |
Пепсиновый гидролизат мяса |
5,0 г |
Панкреатический гидролизат сердца |
3,0 г |
Дрожжевой экстракт |
5,0 г |
Маисовый крахмал |
1,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Агар, в зависимости от гелеобразующей способности |
10,0 – 15,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Агар замачивают, растворяют путем нагревания до кипения при постоянном
перемешивании. При необходимости, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,3±0,2. Стерилизуют в паровом стерилиза-
торе при 1210С в течение 15 минут. Охлаждают до 45-500С, добавляют, при необ- ходимости, гентамицина сульфат в количестве, соответствующем 20 мг основания
гентамицина, и разливают по чашкам Петри.
Питательная среда R (среда на основе лактозы и сульфита)
Панкреатический гидролизат казеина |
5,0 г |
Дрожжевой экстракт |
2,5 г |
Натрия хлорид |
2,5 г |
Лактозы моногидрат |
10,0 г |
Цистеина гидрохлорид |
0,3 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Растворяют, доводят до рН 7,1±0,1 и разливают по 8 мл в пробирки разме-
ром 16 мм х 160 мм, содержащие маленькие трубки Дюрама. Стерилизуют в паро-
вом стерилизаторе при 1210С в течение 15 минут и хранят при 40С.
Перед использованием питательную среду нагревают в течение 5 минут на водяной бане и охлаждают. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл раствора на- трия метабисульфита R концентрацией 12 г/л и 0,5 мл раствора железа(III)- аммония цитрата концентрацией 10 г/л. Оба раствора должны быть свежеприго- товленными и профильтрованы через мембраны (размер пор 0,45 мкм).
Агаризованная среда S (R2A) |
|
Дрожжевой экстракт |
0,5 г |
Протеозопептон |
0,5 г |
Гидролизат казеина |
0,5 г |
Глюкоза |
0,5 г |
Крахмал |
0,5 г |
Калия гидрофосфат |
0,3 г |
Магния сульфат, безводный |
0,024 г |
Натрия пируват |
0,3 г |
Агар |
15,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно со- ставляло 7,2±0,2. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при 1210С в течение 15
минут.
# Фосфатный буферный раствор с натрия хлоридом и пептоном (1/15
моль)
Калия фосфат однозамещенный |
3,56 г |
Натрия фосфат двузамещенный |
7,23 г |
Натрия хлорид |
4,3 г |
Пептон ферментативный сухой |
1,0 г |
Вода очищенная |
до 1000 мл |
рН |
7,0 |
Компоненты растворяют в очищенной воде при нагревании, фильтруют че-
рез бумажный фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15 минут.
Среда № 1 – для выращивания бактерий |
|
Пептон ферментативный сухой |
10,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Глюкоза |
1,0 г |
Агар |
13,0 г |
Мясная вода |
1000 мл |
Все компоненты растворяют в мясной воде при нагревании, вносят глюкозу,
значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,3 ± 0,2. Кипятят 1 минуту, прибавляют агар, нагревают до полного его расплав-
ления, фильтруют через ватно-марлевый фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121 0С в течение
15 минут.
Жидкая среда №1 (мясо-пептонный бульон) |
|
Пептон ферментативный сухой |
10,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Глюкоза |
1,0 г |
Мясная вода |
1000 мл |
К мясной воде добавляют пептон и натрия хлорид, растворяют при нагре- вании, вносят глюкозу, значение рН доводят таким образом, чтобы после стери- лизации оно составляло 7,3 ± 0,2. Кипятят 1 мин. Фильтруют через бумажный фильтр. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121 0С в течение
15 минут.
Среда № 2 – для выращивания грибов (Сабуро-агар) |
|
Пептон ферментативный сухой |
10,0 г |
Глюкоза |
40,0 г |
Агар |
13,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Все компоненты растворяют в воде при нагревании, значение рН доводят
таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 5,6 ± 0,2. Прибавляют агар, нагревают до полного его расплавления, фильтруют через ватно-марлевый
фильтр. Для подавления роста бактерий после стерилизации прибавляют 100 мг бензилпенициллина и 100 мг тетрациклина (либо перед стерилизацией – 50 мг
левомицетина) на 100 мл среды.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121 0С в течение 15 минут.
Среда № 3 – для обогащении для бактерий семейства Enterobacteriaceae
Пептон ферментативный сухой |
|
10,0 г |
Калия фосфат однозамещенный |
2,5 г |
Натрия фосфат двузамещенный |
7,5 г |
Глюкоза |
10,0 г |
Феноловый красный |
0,08 г |
Малахитовый зеленый |
0,015 г |
Мясная вода |
1000 мл |
Пептон и соли растворяют в мясной воде при нагревании, вносят глюкозу, прибавляют 8 мл 1 % раствора фенолового красного и 3 мл 0,5 % раствора мала- хитового зеленого, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилиза-
ции оно составляло 7,3 ± 0,2. Кипятят 1 минуту, фильтруют через бумажный фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15 минут.
Среда № 4 (агар Эндо) – для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae.
Панкреатический гидролизат рыбной муки |
12,0 г |
Экстракт пекарных дрожжей |
1,0 г |
Натрий хлористый |
3,4 г |
Натрия сульфит безводный |
0,8 г |
Натрия фосфат двузамещенный |
0,5 г |
D - лактоза |
10,0 г |
Фуксин основной |
0,2 г |
Агар |
15,0 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Ингредиенты размешивают в воде, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,4 ± 0,2. Нагревают до полного рас- плавления агара и кипятят 2-3 мин. Фильтруют через ватно-марлевый фильтр, снова нагревают до момента закипания. Охлаждают до температуры от 450С до 500С и разливают в чашки Петри.
Среда № 5 (висмутсульфит агар) – для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae
Панкреатический гидролизат мяса |
10,1 г |
Натрия фосфат двузамещенный |
3,68 г |
Натрия хлорид |
2,6 г |
Натрия карбонат |
0,65 г |
Висмута цитрат |
2,38 г |
Железа(II) аммония сульфат |
0,97 г |
D-глюкоза |
3,9 г |
Агар |
15,0 |
Бриллиантовый зеленый |
0,028 |
Вода очищенная |
1000 мл |
Ингредиенты размешивают в воде, значение рН доводят таким образом,
чтобы после стерилизации оно составляло 7,6 ± 0,2. Нагревают до полного рас- плавления агара и кипятят 3-5 минут. Охлаждают до температуры от 450С до 500С
и разливают в чашки Петри.
Среда № 6 – для определения ферментации глюкозы: |
|
Пептон ферментативный сухой |
10,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Глюкоза |
40,0 г |
Феноловый красный |
0,08 г |
Мясная вода |
1000 мл |
Пептон и натрия хлорид растворяют в мясной воде при нагревании, вносят глюкозу, прибавляют 8 мл 1 % раствора фенолового красного, значение рН дово-
дят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2 ± 0,2. Кипятят 1 минуту, фильтруют через бумажный фильтр и разливают в пробирки с поплавками по 4 - 5 мл. Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121°С в тече- ние 15 минут. По окончании стерилизации быстро охлаждают.
Среда № 7 – для определения восстановления нитратов в нитриты:
Пептон ферментативный сухой |
5,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Калия нитрат |
1,5 г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Все компоненты растворяют в воде при нагревании, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2 ± 0,2. Кипятят 1 ми-
нуту, фильтруют через бумажный фильтр, разливают в пробирки по 4 - 5 мл. Сте- рилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121°С в течение 15 минут.
Среда № 8 - среда обогащения для Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus
Пептон ферментативный сухой |
10,0 г |
Натрия хлорид |
5,0 г |
Калия фосфат двузамещенный |
2,5 г |
Глюкоза |
2,5 г |
Вода очищенная |
до 1000 мл |
Пептон и соли растворяют в воде при нагревании, вносят глюкозу, значение
рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,3 ± 0,2. Кипятят 1 минуту, фильтруют через бумажный фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121°С в течение 15 минут.
Среда № 9 – для выявления пигмента пиоцианина
Пептон ферментативный сухой |
20,0 |
г |
Магния хлорид безводный |
1,4 г |
|
Калия сульфат безводный |
10,0 |
г |
Глицерин |
10,0 |
мл |
Агар |
15,0 |
г |
Вода очищенная |
1000 мл |
Пептон и соли растворяют в воде. Затем вносят глицерин, растворяют при нагревании, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно
составляло 7,2 ± 0,2. Кипятят 1 минуту, прибавляют агар, нагревают до полного его расплавления, фильтруют через ватно-марлевый фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 121°С в течение 15 минут.
Среда № 10 – для идентификации Staphylococcus aureus