22

Геном состоит из структурных и функциональных генов. Репродукция вирусов происходит в цитоплазме Т-лимфоцитов, макрофагов или других восприимчивых иммунокомпетентных клеток. С помощью обратной транскриптазы на матрице геномной РНК вируса образуется ДНК, которая в дальнейшем интегрирует в геном инфицированной клетки с образованием провируса ВИЧ. Сборка новых вирусов заканчивается отпочковыванием от мембраны клетки, при этом могут быть захвачены белки и фосфолипиды клетки-хозяина, которые встраиваются в липидную оболочку вируса. ВИЧ-инфекция характеризуется преимущественным поражением иммунной системы организма человека, длительным течением, разнообразными клиническими проявлениями и высокой летальностью. Основные пути передачи: половой, через кровь, грудное молоко, а также трансплацентарно. Инкубационный период составляет 2–3 недели. В это время у большинства

больных	возникает		острый	ретровирусный	синдром.
Выделяют	следующие		стадии	течения	ВИЧ-инфекции:
1.			Острая		фаза.
2.			Латентная		инфекция.
3.	Стадия	манифестных		проявлений	пре-СПИД.
4.	Терминальная		стадия	–	СПИД.
Микробиологическая					диагностика

Исследуемый материал: цельная кровь, плазма и сыворотка крови. Вирусологический метод Производится только в лабораториях с повышенными мерами безопасности в связи с высоким риском заражения. Патологическим материалом заражают культуру клеток. Идентификацию антигенов ВИЧ производят с помощью ИФА (белок р24), генный материал возбудителя определяют методом ПЦР. Выделение, культивирование и идентификация вируса в культурах клеток являются достоверными признаками инфицирования ВИЧ. Однако данный метод трудоемок, малодоступен, требует длительного времени, специального оборудования и высокой квалификации медиуинских работников,

поэтому	используется	практически	только	в	научных	целях.
Серологический						метод

Основан на выявлении в сыворотке крови пациента антител к ВИЧ или ВИЧантигенов. Тест на антиген р24 методом ИФА имеет определенное значение в период так называемого «диагностического окна». Это промежуток времени от момента заражения до появления определенного уровня антител к ВИЧ. Переход от неопределяемого титра антител к определяемому называется сероконверсией. Наиболее широко применяемый метод определения общих антител к вирусу ВИЧ

– иммуноферментный анализ. Это метод первого уровня для выявления ВИЧинфицированных, так называемый скрининговый тест или 1-й этап стандартного протокола исследования на ВИЧ. При получении положительного результата, анализ повторяется с той же сывороткой. При повторном получении положительного результата проводится 2-й этап стандартного протокола исследования на ВИЧ – подтверждающий тест. Для этого используют более специфичный метод иммунного блотинга (ИБ), позволяющий выявить антитела к отдельным антигенам ретровируса: сердцевины – р17, р24,

р55, оболочки – gp120, gp160, gp41, а также ферментам – р31, р51, р66.

Результаты, полученные в ходе проведения иммунного блотинга, могут интерпретироваться как отрицательные (отсутствуют антитела к антигенам), сомнительные (выявляются антитела к одному гликопротеину), или положительные (обнаруживаются антитела к двум или трем антигенам возбудителя).

107. Оппортунистические СПИД-ассоциированные инфекции Оппортунистическими называют инфекции, которые в обычных условиях не вызывают заболевания.

Для СПИД-ассоциированных инфекций характерно тяжелое рецидивирующее течение и устойчивость к терапии. Это связано с неспособностью иммунной

системы	пациента	противостоять		инфекционным			агентам.
Оппортунистические		инфекции	подразделяют		на	2	группы:

1. Первая группа развивается исключительно на фоне тяжелого иммунодефицита при СПИДе и практически не встречается при других состояниях. При наличии такой патологии у больного, диагноз ВИЧ-инфекции может быть поставлен даже

без	лабораторного	подтверждения.		К		данной	группе	относятся:
−	кандидоз трахеи, бронхов, пищевода;				−	внелегочный криптококкоз;
−	криптосоридиоз	с	диареей			более	1	месяца;

− герпетическая инфекция кожи и слизистых длительностью более 1 месяца, герпетические эзофагит, бронхит, пневмония в возрасте старше 1 года; − цитомегаловирусное поражение внутренних органов, кроме печени, селезенки и лимфатических узлов, в возрасте старше 1 месяца; − генерализованная саркома Капоши в возрасте до 60 лет; − лимфома головного

мозга	в	возрасте		до		60	лет;
−	внелегочный	атипичный		диссеминированная		микобактериоз:
-		пневмоцистная					пневмония;
- токсоплазмоз		головного	мозга	в возрасте	более		1 месяца;
-	прогрессирующая		многоочаговая		лейкоэнцефалопатия.

2. Вторая группа может быть как при ВИЧ-инфекции так и без нее. Диагноз ВИЧ при этом нельзя поставить без лабораторного подтверждения. К данной группе относятся: − внелегочный диссеминированный кокцидиоидомикоз; − внелегочный диссеминированный гистоплазмоз; − изоспороз с диареей более месяца; − саркома

Капоши;
−	лимфома	головного	мозга;	−	ВИЧ-энцефалопатия;

− сочетанные или рецидивирующие инфекции у детей в возрасте до 13 лет более

2-х	раз	за	2	года;	−	В-клеточные	лимфомы;
−				мелкоклеточные			лимфомы;

−	иммунобластные саркомы; − внелегочный туберкулез; − внелегочный
атипичный		диссеминированный	микобак-	териоз;
−	рецидивирующая	сальмонеллезная	септицемия; −	ВИЧ-дистрофия.

Методы лабораторной диагностики СПИД-ассоциирован- ных инфекций зависят от вида возбудителя.

108 вби причины факторы Причины и факторы риска внутрибольничной инфекции Внутрибольничными

называют инфекции, возникающие и развивающиеся у пациентов лечебных учреждений (примерно у 25%). Наиболее распространёнными среди них считают респираторные, раневые, инфекции кожи и подкожно-жировой клетчатки, заболевания мочевыводящих путей и мягких тканей, а также септицемию (особенно при длительной катетеризации больных и выполнении инъекций). Факторы риска - причины внутрибольничной инфекции Вероятность передачи микроорганизмов между пациентами в лечебном учреждении достаточно высока. Питание как причина внутрибольничной инфекции. Пищу для пациентов стационара обычно готовят централизованно на больничной кухне, поэтому при несоблюдении санитарно-гигиенических норм возникает риск развития пищевых инфекций. Алиментарным путём обычно происходит распространение антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов. Вентиляция как причина внутрибольничной инфекции Передача инфекций (например, мультирезистентных штаммов возбудителей туберкулёза, а также различных респираторных вирусов) может осуществляться воздушно-капельным путём при кондиционировании воздуха. Кроме того, плохая вентиляция может стать причиной заболеваний, вызываемых представителями рода Legionella. Личные вещи пациентов как причина внутрибольничной инфекции. Любые предметы и вещи, используемые пациентами, могут содержать на своей поверхности различных возбудителей и быть источником возникновения инфекционных заболеваний. Вода как причина внутрибольничной инфекции. Лечебные учреждения обладают сложной системой водоснабжения, к которой подключены уборные, души, центральное отопление и система кондиционирования воздуха. Кроме того, для работы автоклавов необходим горячий пар, подаваемый под высоким давлением. При этом в резервуарах для воды могут присутствовать микроорганизмы рода Legionella, а система охлаждения может стать источником инфекций, распространение которых осуществляется через систему вентиляции. Для уменьшения риска возникновения различных заболеваний необходимо в резервуарах для горячей воды поддерживать температуру выше 45 °С, а в резервуарах с холодной водой — ниже 20 °С. Повышение восприимчивости пациентов к инфекциям происходит в результате ослабления защитных функций организма, что может быть связано с основным заболеванием или лечением (например, больные лейкемией или пациенты, подвергаемые химиотерапии). Кроме того, факторами, предрасполагающими к развитию инфекционного процесса, выступают пожилой возраст и неподвижное состояние больного, ишемия тканей делает их более подверженными бактериальной инвазии. Медицинские процедуры как причина внутрибольничной инфекции Катетеризация вен как причина внутрибольничной инфекции. Катетеризация вен

— самая частая причина развития вну-трибольничной бактериемии. При этом риск возникновения инфекции прямо пропорционален длительности нахождения устройства в вене. При нарушении целостности кожного покрова возникает вероятность проникновения внутрь таких микроорганизмов, как Staphylococcus aureus, S. epidermidis и Corynebacterium jeikeium. Первый признак заражения — воспаление в месте инъекции. Инфекции, возникающие при использовании катетеров, могут осложняться септицемией, эндокардитом и метастатическим

распространением инфекции (например, остеомиелитом). Снизить риск развития сепсиса помогают асептические процедуры, проводимые в месте введения катетера, и выбор наиболее безопасного устройства (без боковых отверстий и «мёртвых» пространств). Состояние места введения катетера необходимо строго контролировать (особенно у пациентов, находящихся без сознания). Внешние части устройства необходимо заменять каждые 48 ч, а внутренние — при первых признаках инфекции. Катетеризация мочевого пузыря. При длительном применении мочевых катетеров возникает риск развития инфекционного процесса

вмочевом пузыре, для уменьшения которого необходимо соблюдение правил асептики и антисептики при введении катетера. Хирургические вмешательства как причина внутрибольничной инфекции У пациентов хирургического отделения

ванамнезе часто отмечают терапевтические заболевания (например, бронхиальная астма, сахарный диабет), снижающие устойчивость организма к инфекции. Кроме того, само хирургическое вмешательство весьма травматично и несёт в себе риск развития различных осложнений (ишемии тканей, раневых инфекций и др.). Помимо объёма и продолжительности операции, большую роль играет мастерство хирурга: чем меньше повреждение тканей во время хирургического вмешательства, тем ниже риск возникновения болезни.

Предоперационный период должен быть максимально коротким (во избежание заражения антибиотикорезистентными внутрибольничными микроорганизмами). При наличии симптомов острого заболевания (например, лёгочной инфекции) следует отложить плановую операцию. Для снижения вероятности заражения во время хирургического вмешательства воздух в операционные подают через специальные фильтры. Движения медперсонала должны быть сведены к минимуму, что позволяет не создавать дополнительных воздушных потоков. Для снижения вероятности распространения возбудителей инфекции перед входом в операционную необходимо переодеться в стерильную одежду. Воздухонепроницаемая одежда уменьшает риск контаминации микроорганизмами, присутствующими на коже хирурга, но вызывает неудобства при её ношении. Для предотвращения послеоперационных инфекций назначают антибиотикопрофилактику. Препараты должны обладать бактерицидным действием и проникать в необходимое место в концентрации, достаточной для уничтожения микроорганизмов, вызывающих инфекционный процесс. Следует отметить, что данных, подтверждающих эффективность антибиотикопрофилактики, начатой позже 48 ч после выполнения оперативного вмешательства, в настоящее время не существует. «Чистой» называют операцию, затрагивающую лишь кожный покров или стерильные органы (например, суставы). При проведении таких операций антибактериальные препараты не применяют (за исключением случаев протезирования суставов, когда необходимо назначать антимикробные средства для предотвращения стафилококковой инфекции). «Загрязнённой» называют операцию, выполняемую на каком-либо внутреннем органе, содержащем нормальную микрофлору. При хирургических операциях на толстой кишке применяют метронидазол в сочетании с цефалоспоринами второго поколения, а при вмешательствах, проводимых в верхних отделах желудочно-кишечного тракта и на жёлчных путях, — только цефалоспорины, так как анаэробные инфекции в этом регионе возникают редко. К «грязным» относят операции, при которых сталкиваются с уже возникшим инфекционным процессом (например, при дренировании абсцесса или перфорации дивертикула). В таких случаях рекомендовано применение системных антибиотиков. Во время интубации трахеи возникает вероятность проникновения возбудителей в нижние отделы дыхательных путей. При этом послеоперационные боли, неподвижность и обезболивание препятствуют откашливанию, что способствует повышению риска развития пневмонии. Кроме того, в условиях стационара часто возникают респираторные заболевания, вызванные устойчивыми грамотрицательными микроорганизмами, присутствующими в окружающей среде.

109 вби профилактика эпидемиология

Другая большая группа ВБИ - кишечные инфекции. Они составляют в ряде случаев до 7-12% от их общего количества. Среди кишечных инфекций преобладают сальмонеллезы. Регистрируются сальмонеллезы в основном (до 80%) у ослабленных больных хирургических и реанимационных отделений, перенесших обширные полостные операции или имеющих тяжелую соматическую патологию. Выделяемые от больных и с объектов внешней среды штаммы сальмонелл отличаются высокой антибиотикорезистентностью и устойчивостью к внешним воздействиям. Ведущими путями передачи возбудителя в условиях ЛПУ являются контактно-бытовой и воздушно-пылевой. Значимую роль во внутрибольничной патологии играют гемоконтактные вирусные гепатиты В, С, D, составляющие 6-7% в ее общей структуре. Более всего риску заболевания подвержены больные, которым проводятся обширные хирургические вмешательства с последующей кровезаместительной терапией, программный гемодиализ, инфузионная терапия. Обследования, проводимые стационарным больным с различной патологией, выявляют до 7-24% лиц, в крови которых обнаруживаются маркеры этих инфекций. Особую категорию риска представляет медицинский персонал госпиталей, чьи обязанности предусматривают выполнение хирургических манипуляций или работу с кровью (хирургические, гематологические, лабораторные, гемодиализные отделения). При обследованиях выявляется, что носителями маркеров гемоконтактных вирусных гепатитов являются до 15-62% персонала, работающего в этих отделениях. Эти категории лиц в ЛПУ составляют и поддерживают мощные резервуары хронических вирусных гепатитов.

На долю других инфекций, регистрируемых в ЛПУ, приходится до 5-6% от общей заболеваемости. К таким инфекциям относятся грипп и другие острые респираторные инфекции, дифтерия, туберкулез и др.

Профилактика ВБИ

Проблема профилактики ВБИ является многоплановой и весьма трудна для решения по целому ряду причин - организационных, эпидемиологических, научно-методических. Эффективность борьбы с ВБИ определяется тем, соответствует ли конструктивное решение здания ЛПУ последним научным достижениям, а также современным оснащением ЛПУ и строгим выполнением требований противоэпидемического режима на всех этапах предоставления медицинской помощи. В ЛПУ независимо от профиля должны выполняться три

важнейших						требования:
-	сведение	к	минимуму	возможности	заноса	инфекции;
-	исключение			внутригоспитальных		заражений;

- исключение выноса инфекции за пределы лечебного учреждения.

В вопросах профилактики ВБИ в стационарах младшему и среднему медперсоналу отводится основная, главенствующая роль - роль организатора, ответственного исполнителя, а также контролера. Ежедневное, тщательное и неукоснительное выполнение требований санитарно-гигиенического и противоэпидемического режима в ходе исполнения своих профессиональных обязанностей и составляет основу перечня мероприятий пс) профилактике ВБИ. В этой связи следует особо подчеркнуть значимость роли старшей сестры клинико-диагностического отделения стационара. В основе своей - это длительное время проработавший по специальности сестринский состав, обладающий организаторскими навыками, прекрасно разбирающийся в вопросах режимного характера.

Говоря о важности профилактики ВБИ, следует отметить, что проблема эта безусловно комплексная и многогранная. Каждое из направлений профилактики ВБИ предусматривает ряд целенаправленных санитарно-гигиенических и противоэпидемических мероприятий, имеющих целью предотвращение определенного пути передачи инфекционного агента внутри стационара. Более подробно мы отметим вопросы дезинфекции и стерилизации.

Дезинфекция - одно из самых значимых направлений профилактики ВБИ. Данный аспект деятельности медицинского персонала является многокомпонентным и имеет своей целью уничтожение патогенных и условнопатогенных микроорганизмов на объектах внешней среды палат и функциональных помещений отделений стационара, медицинском инструментарии и оборудовании. Организация дезинфекционного дела и его реализация младшими средним медицинским звеном является сложной трудоемкой ежедневной обязанностью.

Под дезинфекцией понимают совокупность способов полного или частичного уничтожения потенциально патогенных для человека микроорганизмов на объектах внешней среды с целью разрыва пути передачи возбудителей.

Следует подчеркнуть особую значимость этого направления деятельности персонала в отношении профилактики ВБИ, поскольку в ряде случаев (ГСИ, внутрибольничные кишечные инфекции, в т.ч. сальмонеллез) дезинфекция является практически единственным способом снижения заболеваемости в стационаре. Необходимо также отметить, что все госпитальные штаммы возбудителей ВБИ наряду с практически полной антибиотикорезистентностью обладают значительной устойчивостью к воздействию внешних факторов, в т.ч. и дезинфектантам. Так, например, возбудитель внутрибольничного сальмонеллеза Salm.typhimurium нечувствителен к традиционно рекомендуемым для текущей дезинфекции концентрациям рабочих растворов хлорсодержащих дезинфектантов (0,5-1%), а погибает при воздействии лишь не менее 3% раствора хлорамина и 5% перекиси водорода с экспозицией не менее 30 минут. Незнание медицинским персоналом данных научных фактов и использование для очагов дезинфекции растворов с более низкой концентрацией активно действующего вещества ведет к появлению в стационарах еще более устойчивых к внешним воздействиям госпитальных штаммов, искусственно селектируемых сотрудниками ЛПУ.

Из приведенного примера, очевидно, что существуют значимые различия в тактике и способах проведения профилактической и очаговой (текущей и заключительной) дезинфекции в стационаре. Следует помнить, что дезинфекция проводится с учетом эпидемической опасности и степени значимости ряда предметов и оборудования как предполагаемых факторов риска в реализации того или иного механизма передачи ВБИ в рамках стационара. С учетом указанного большим в процентном содержании дезинфицирующим раствором проводится обработка санитарных комнат, подкладных суден, мочеприемников, посуды, выделений, белья и личных вещей инфекционных больных и т.д.

Необходимо знать и помнить, что соблюдение правил противоэпидемического режима и дезинфекции - это прежде всего предотвращение заболеваний ВБИ и сохранение здоровья медицинского персонала. Данное правило действует для всех категорий медицинских работников, а в особенности для персонала, работающего в операционных, перевязочных, манипуляционных и лабораториях, т.е. имеющих более высокий риск заболеваемости ВБИ из-за непосредственного контакта с потенциально инфицированным биологическим материалом (кровь, плазма, моча, гной и т.д.). Работа в этих функциональных помещениях и

отделениях требует особого соблюдения персоналом режимных моментов - личной защиты и правил техники безопасности, обязательной дезинфекции перчаток, отработанного материала, одноразового инструментария и белья перед их утилизацией, регулярности и тщательности проведения текущих генеральных уборок.

Дезинфекция в лечебно-профилактическом учреждении (ЛПУ) включает:

1. Механические средства дезинфекции (удаление микроорганизмов с объектов или их обеззараживание путем встряхивания, протирания, проветривания, вентиляции,стирки, мытья, очистки).

2. Физические средства дезинфекции (обеззараживание путем воздействия физических агентов: ультрафиолетового облучения, сухого горячего воздуха, водяного пара, кипячения).

3. Химические средства дезинфекции (галоидосодержащие, кислородосодержащие, поверхностно-активные вещества, гуанидины, альдегидосодержащие, спирты, фенолосодержащие, кислоты).

Современный дезинфектант должен отвечать нескольким основным требованиям, без осуществления которых ни один препарат не может быть рекомендован для применения:

1.	Микробиологическая	эффективность;
2.	безопасность для применения как для персонала так и для пациентов;
3.	совместимость с обрабатываемыми материалами (за "золотой стандарт" здесь

принимается воздействие, которое оказывает на материалы глутаровый

альдегид);
4.						экономичность;
5.	степень устойчивости		к органической	нагрузке	(например, крови);
6.	скорость		действия	(требуемая		экспозиция);
7.			наличие			запаха;
8.	отсутствие		воспламеняемости	и	взрывоопасности;
9.	простота	в	приготовлении,	применении,		удалении.

К сожалению, на сегодняшний день ни один из применяемых препаратов не обладает всеми перечисленными свойствами.

Среди мер дезинфекции, эффективность которых доказуема, химическая дезинфекция является наименее важной. Более важными являются, например, аккуратность медперсонала, карантин пациентов и применение стерилизованного инструментария и материала. Стерилизация является наиболее надежной изо всех микробицидных и микробиостатических мер.

В целях профилактики ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов В, С и других внутригоспитальных инфекций все изделия медицинского назначения, применяемые при манипуляциях с нарушением целостности кожных покровов и слизистых или соприкасающихся с поверхностью слизистых оболочек, а также при проведении гнойных операций или оперативных манипуляций у инфекционного больного после каждого использования должны подвергаться предстерилизационной обработке и стерилизации.

Предстерилизационная обработка изделий медицинского назначения проводится в клинико-диагностических отделениях и заключается в их дезинфекции и предстерилизационной очистке. Проведение дезинфекции химическим методом осуществляется путем погружения инструментария, перчаток, лабораторной посуды и др. в 3% раствор хлорамина на 60 мин или 4% раствор перекиси водорода на 90 мин. Дезинфицирующий раствор используется однократно.

Предстерилизационная очистка состоит из нескольких этапов. По окончании дезинфекции инструментарий промывается проточной водой над раковиной в течение 30 с до полного удаления запаха дезинфицирующего средства. Продезинфицированный и промытый медицинский инструментарий замачивается в горячем (50-55° С) растворе, содержащем согласно прописи ОСТ 42-21-2-85 моющее средство и перекись водорода, в течение 15 мин. при полном погружении изделия. После замачивания каждое изделие моется в растворе моющих средств при помощи ватно-марлевого тампона. Затем вымытый медицинский инструментарий прополаскивают под проточной водой 3-10 мин., а затем 30-40 с в дистиллированной воде. Промытый медицинский инструментарий сушится горячим воздухом в сушильном шкафу при температуре 85°С до полного исчезновения влаги.

Качество очистки изделий проверяется путем постановки бензидиновой, ортотолуидиновой и амидопириновой проб. Контролю подвергают 1% одновременно обработанного инструментария (но не менее 3-5 изделий одного наименования). Наличие остаточных количеств моющих средств на изделиях определяют путем постановки фенолфталеиновой пробы. Изделия, дающие положительную пробу на кровь или моющее средство, обрабатывают повторно до получения отрицательного результата.

Современное развитие дезинфектологии позволяет использованием одного рабочего раствора дезинфицирующего препарата решить вопросы дезинфекции и предстерилизационной очистки медицинского инструментария.

Под стерилизацией понимают полное устранение или уничтожение всех форм живых микроорганизмов.

Стерилизация может проводиться паровым, воздушным или химическим методами в зависимости от технических возможностей и характера стерилизуемого материала. В отделениях, при отсутствии центральной стерилизационной в стационаре, стерилизацию проводят в сухожаровых шкафах в одном из нижеперечисленных режимов: по первому режиму температура стерилизации в камере - 180°С, время - 60 мин; по второму режиму температура стерилизации в камере 160°С, время стерилизации - 150 мин.

В заключение хочется отметить, что в ЛПУ проводится не только значительная лечебно-диагностическая деятельность, но и весьма обширный комплекс санитарно-гигиенических и противоэпидемических мероприятий, направленный на профилактику ВБИ, являющихся особой спецификой категорий болезней человека, связанных c получением больным того или иного вида медицинской помощи и являющихся результатом пребывания пациента в стационаре. Во главе всей этой многогранной работы по профилактике ВБИ в ЛПУ стоит медицинская сестра - основной организатор, исполнитель и ответственный контролер, правильность деятельности которой зависит от полученных в процессе обучения знаний и практических навыков по решению данной проблемы. Сознательное отношение и тщательное выполнение медицинским персоналом требований противоэпидемического режима предотвратит профессиональную заболеваемость сотрудников, что позволит в значительной степени снизить риск заболевания ВБИ и сохранить здоровье пациентам.

78. методы титрования вирусов Методы титрования вирусов

Количество вирусных частиц определяют методомтитрования по ЦПД в культуре клеток. Для этого клетки культурызаражают десятикратным

разведением вируса. После 6—7-дневной инкубации их просматривают на нмичие ЦПД. За титр вируса принимают наибольшее разведение, которое вызьшает ЦПД в 50% зараженных культур. Титр вируса выражают количеством цитопатических доз [c.59]

Титрование вирусаполиомы методом бля
ной культуре	клеток	почки	мыши, а
ная культура б — заражение культуры
разведением заготовки вирусаприводит
нию 14 бляшек в — заражение культуры				="">
разведениемзаготовки		вируса	приводит
нию 90—100 бляшек е — заражение культур
разведением.	Титр	исходной загото
2-10 БОЕ/мл. (Фотографии взяты иа статьи
таны с разрешения авторов)

Если культуральная жидкость обладает антивирусным действием, ТО в среде, окружающей ткань, не будет обнаружено вируса. При отсутствии антивирусного действия вирусы будут интенсивно размножаться в клетках ткани, что может быть легко обнаружено методом титрования на эритроцитах. [c.161]

Оба описанных выше метода определения титра вируса страдают одним общим недостатком — необходимостью строитькалибровочные кривые на основе точных стандартов. Кроме того, этими методами нельзя различить дефектные вирусы и полноценные инфекционные частицы. Очевидно, что наиболее информативными следует считать такие методы титрования вируса, которые

основаны	на	определении	количестваинфекционных	частиц	с
помощью биологических тестов.			В случаерепликационно-компетентного MLV

этой цели отвечает анализ бляшек с использованием ХС-клеток [15]. Однако

обычно		нет	нужды	[c.298]
	Методы	титрования	вирусов	[c.169]

Из множества методов, применяемых для титрования аденовирусов, мы опишем три следующих титрование вируса методом бляшек, титрование

вируса	по	ЦПД		определением	конечной	точки	и	метод
флуоресцирующих						фокусов. [c.265]
Наиболее точным методом титрования, несомненно, является метод бляшек.
Однако он		предполагает сохранение			стабильного	монослоя клеток
при	длительном		культивировании.		Метод титрования		вируса	по

ЦПД определением конечной точки, вероятно, наиболее прост в исполнении и достаточно чувствителен. В большинстве случаев можно ограничиться использованием этого метода. Метод флуоресцирующих фокусов, хотя и занимает меньше всего времени, однако требует большого количества реактивов и предварительного определения оптимального срока для подсчета фокусов первичной инфекции. [c.269]

Титр вируса в культуральной среде инфицированных клеток можно определить с помощью целого ряда методик, в основе которых лежат физические, биохимические или биологические методы анализа. Наибольшее распространение получил способ, заключающийся в количественном определении вирусной геномной РНК в культуральной среде с помощью гибридизации с меченным ДНК-зондом. Эту стандартную процедуру дот-блот- гибридизационного анализа проводят после концентрированияпрепарата вируса,