22

53 гломерулонефрит. Простатит Воспалительный процесс в мужской простатеразвивается в большинстве

случаев в результате проникновения патогенных или условно-патогенных микробов, которые способны проникать в предстательную железу различными путями при наличии предрасполагающих факторов, важнейшими из которых являются нарушения кровообращения с сопутствующим нарушением защитных барьерных механизмов. Пусковым механизмом развития простатита является, как правило, микробный фактор,

Внастоящее время известен ряд грамотрицательных и грамположительных (эти воспринимают окраску по Граму) микроорганизмов, причастных к развитию простатита: кишечная палочка, клебсиелла, протей, энтерококки, синегнойная палочка. Роль других микроорганизмов – стафилококков, анаэробных бактерий, уреаплазм, хламидий,

Вподавляющем большинстве случаев (95%) из секрета простаты выделяют различные варианты бактериальных ассоциаций с преобладанием 3- и 4- компонентных. Основными участниками ассоциаций являлись анаэробы и стафилококки.

Заболевание гломерулонефрит причины может иметь различного характера. Заражение почек возможно несколькими путями, самым распространенным из которых является инфекционный (возбудитель – стрептококк группы А). В таком случае гломерулонефрит может развиться после ангины, фарингита, скарлатины и ряда других инфекционно-воспалительных болезней. Кожные заболевания могут предшествовать инфекции почек в жарких странах. Охлаждение человека в условиях высокой влажности может вызвать расстройство или нарушение кровоснабжения почек, а также их воспаление.

Среди возможных возбудителей гломерулонефрита главную роль играет ß- гемолитический стрептококк (его нефритогенные типы). Меньшее значение имеют стафилококк, пневмококк, вирусы, плазмопий малярии. В большинстве случаев бактериальный гломерулонефрит развивается после инфекционного заболевания, являясь выражением аллергической реакции организма на возбудителя инфекции. Чаще это ангина, скарлатина, острое респираторное заболевание, реже

-- пневмония, рожа, дифтерия, менингококковая инфекция, затяжной септический эндокардит, малярия, сифилис.

54. урогенитальный микоплазмоз

ДИАГНОСТИКА МИКОПЛАЗМОЗА

Решающе значение в диагностике урогенитального микоплазмоза имеют лабораторные методы диганостики. Материал для исследования: ♦мазки из уретры, влагалища, цервикального канала; Методы исследования.

Культуральный метод — посев на питательные среды для количественной оценки микоплазм в исследуемом материале. Диагностическое значение имеет концентрация микоплазм более 104 КОЕ в одном мл. При этом более низкие концентрации учитываться не должны, поскольку в таких количествах микоплазмы могут находиться у здоровых людей. Одновременно определяют чувствительность микоплазм к антибиотикам в двух концентрациях. Следует помнить, что M. genitalium сложно культивировать, поэтому диагностику необходимо проводить методом ПЦР. Молекулярнобиологические методы. Метод ПЦР позволяет определить возбудителя, но не может дать ответ о его количестве, поскольку регистрирует только факт присутствия генетического материала микоплазмы. ПЦР в реальном времени с помощью специальной аппаратуры обеспечивает и количественное определение копий ДНК микоплазмы в материале.

Иммунологические методы направлены на обнаружение Аг микоплазм и специфических АТ к ним. Наиболее распостранены: иммуноферментный анализ, реакция непрямой иммунофлуоресценции, реакция пассивной гемагглютинации (имеют меньшее клиническое значение в связи с низкой чувствительностью и специфичностью).

55. урогенитальный вагиноз Морфология ГВ представляют собой мелкие, неподвижные, плеоморфные

палочки и коккобактерии размером 0,5-1,5=2,5 мкм Спор и капсул не образуютГрамвариабельны, но чаще грамотрицательныДанные электронной микроскопии противоречивы. Одни авторы указывают, что по морфологической структуре клеточная стенка гарднерелл соответствует грамположительным бактериям, другие – грамотрицательным. ГВ проявляют гемолитическую активность в отношении че-ловеческой и кроличьей кровиКультуральные свойстваПри росте на питательной среде ГВ образуют круглые, гладкие колонии с ровными краями размером 0,5 мм ГВ-факультативное анаэробы, однако описаны строго облигатные штаммы, поэтому культивирование предпочтительно проводить при повышенной концентрации СО2 или в анаэробных условияхОптимальная температура роста 35-370С, рН 4,5-4,0Наиболее часто применяются следующие среды: КДС-1 с кровью, Харьковская сухая среда для выделения гонококков, шоколадный агар, вагиналисагар, агар с лошадиной кровью, пептон-крахмал-глюкозный агарФерментативные свойстваГВ имеют ферментативный путь метаболизма Основными продуктами ферментации являются уксусная кислота, кроме того, некоторые штаммы могут продуцировать молочную, янтарную и муравьиную кислоты Изучение ферментативной активности гарднерелл имеет большое значение для их дифференцировки от близких родов бак-терий, в первую очередь от гемофилов и коринебактерийГВ гидролизуют гиппурат и крахмалВ настоящее время известно 7 серотиповПо биохимическим показате-лям ГВ классифицированы на 6 биотиповВ реакции иммунофлюоресценции выявлены общие антигены у гарднерелл и кандида альбикансПатогенные свойстваВопрос о патогенности ГВ до настоящего времени остается открытымИмеющиеся данные по-зволяют предполагать низкую вирулентность этих бактерий: неспецифические вагиниты характеризуются слабовыражен-ными местными воспалительными явлениями при небольшом количестве лейкоцитов в клиническом материалеПри гисто-логическом изучении вагинальных биоптатов выявлена незначительная воспалительная реакции, а пенетрация эпителия бактериями не обнаружена

56. урогенитальный кандидоз Диагностика

Для диагностики урогенитальной кандидозной инфекции применяют микроскопические методы, культуральные методы с выделением дрожжеподобных грибов, идентификацией кандид до вида, проведением теста с определением чувствительности кандид к антимикотическим препаратам, молекулярно-биологические методы (ПЦР) выявления Candida albicans. Материалом для исследования служит отделяемое влагалища, цервикального канала, уретры, а также моча. Необходимо помнить о возможности быстрого размножения гриба и начинать исследование как можно скорее после асептического взятия материала. Для взятия материала вагинальным тампоном или инокуляционной петлей в 10 мкл берется отделяемое из влагалищного свода и боковой стенки влагалища. Для микроскопического исследования материал помещается на два предметных стекла, для культуральной диагностики – в специальную транспортную среду. Предпочтительным для лабораторной диагностики кандидозного вульвовагинита является микроскопический метод, поскольку у 20 % здоровых женщин во влагалище присутствуют кандиды, которые также вырастут при посеве, что даст основание для необоснованного диагноза кандидоза влагалища. Культуральный метод полезен при хроническом рецидивирующем течении заболевания, при изучении действия лекарственных препаратов, при атипичном течении заболевания, когда исключены другие возможные возбудители. Для микроскопического исследования врач присылает в лабораторию препаратмазок из отделяемого влагалища и пробирку с ватным тупфером, которым был взят материал с боковых или из заднего свода влагалища. Направляется также средняя порция свободно выпущенной мочи, взятая в стерильную пробирку. Для микроскопии используют неокрашенные препараты, а также препараты, обработанные КОН, окрашенные по Граму, по Романовскому-Гимзе, метиленовым синим. В основе диагноза лежит обнаружение элементов гриба: единичных почкующихся клеток, псевдомицелия, других морфологических структур (бластоконидии, псевдогифы).

Кандиды хорошо растут на простых питательных средах, в т. ч. на кровяном агаре, сусло-агаре, картофельном агаре, среде Сабуро с глюкозой или мальтозой. Колонии кандид влажные, кремового цвета, выпуклые, блестящие или матовые. Виды кандид отличают по ассимиляции углеводов как единственного источника питания и по ферментации углеводов с образованием кислоты и в ряде случаев кислоты и газа. В табл. 1 показана способность разных видов кандид ферментировать углеводы. Решение о значимости обнаруженных дрожжеподобных грибов принимает клиницист.

Для культуральной диагностики производят посев клинического материала на 2- 3 среды (кровяной агар, сусло-агар, жидкую и плотную среды Сабуро, среду «Vagicult» фирмы «Orion Diagnostica» (Финляндия). Инкубируют при температуре +37 ∞С, так как в отличие от патогенных для человека грибов этот режим для сапрофитов неблагоприятен. Оценивают полуколичественно рост на агаровых средах и отвивают чистые культуры для последующей идентификации. На рисовый агар делают разреженный посев (разведения или посев петлей штрихом для получения роста

изолированных колоний). Поверх посева накладывают покровное стекло, оставляют культуру на 18-48 часов при комнатной температуре, после чего микроскопируют в фазовом контрасте микроскопа или при опущенном конденсоре. Оценивают форму псевдогифов и расположение псевдоконидий вдоль псевдогифов. Для быстрого определения C. albicans делают посев в капилляре на среду с лошадиной или телячьей эмбриональной сывороткой. Уже чрез два часа инкубации этот вид кандид (самый частый) дает росток псевдогифа. При необходимости дальнейшей точной идентификации используют наборы углеводов для проверки их утилизации и ферментации. В настоящее время выпускаются диагностические наборы как для компьютерного, так и визуального учета результатов ферментации углеводов. Следует подчеркнуть, что ПЦР для диагностики урогенитального кандидоза следует применять с осторожностью. Положительный результат исследования на наличие C. аlbicans, полученный методом ПЦР, может свидетельствовать только лишь о колонизации влагалища этими грибами и не является свидетельством наличия кандидоза.

57 хламидиоз Материалом для анализа на хламидии может быть соскоб с шейки матки

и мочеиспускательного канала, кровь, моча и сперма у мужчин.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) обладает самой большой чувствительностью и достоверностью — до 100%. Для анализа нужно совсем немного материала, а результаты готовы уже через день-два. С помощью ПЦР можно с высокой точностью утверждать присутствуют ли в организме хламидии или нет.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — определение антител(IgG, IgA, IgM)

к хламидиям в крови. Метод не только выявляет возбудителя заболевания, но и сообщает, на какой стадии хламидиоз находится — в острой или хронической. Между пятым и двадцатым днями после появления клинических симптомов хламидиоза возникают антитела к хламидиям:

Ig M является маркером острой стадии, он определяется уже через пять дней после начала заболевания.

В течение 10 дней после появления симптомов заболевания появляются Ig А.

В это же время или с небольшой задержкой - 2-3 недели могут быть определены Ig G.

Прогрессирование заболевания, переход в хроническую стадию

характеризуется появлением Ig A, Ig G- антител.

Для интерпретации результатов диагностики хламидиоза существует понятие титров - это наименьшие разведения, в которых тест-системы определяют антитела против хламидий. Если в первом исследовании титры антител меньше пограничных, исследование повторяют через 10-14 дней, когда уже можно судить

оналичии или отсутствии хламидийной инфекции. Пограничные титры:

Ig M - 1:50,

Ig А - 1:50,

Ig G - 1:100.

При обострении заболевания происходит скачкообразный подъем титров Ig G изменения титра Ig А идут параллельно с титром Ig M однако на более низком уровне. Исследуя титры антител Ig G, Ig A, Ig M можно оценивать эффективность проведенного лечения в отдаленном периоде (через 1-1,5 месяца).

58. гонорея сифилис Лабораторная диагностика гонореи в нашей стране базируется на двух

основных методах исследования: бактериоскопическом и бактериологическом. Выявление гонококка в препаратах, окрашенных метиленовым синим и по методу Грама (бактериоскопия), возможно лишь при наличии в патологическом отделяемом типичных форм возбудителя и при правильной окраске его. Однако в препаратах нередко встречаются гонококки с измененными морфологическими и тинкториальными свойствами. Кроме того, при хронической и вялотекущей формах гонореи диагностика осложняется либо обилием сопутствующей микрофлоры, затрудняющей поиск гонококка, либо малым количеством возбудителя гонореи в патологическом материале.

Решением этой проблемы является широкое внедрение бактериологического метода обследования, который позволяет получить дополнительные данные об изучаемом микроорганизме. Выросшую культуру исследуют макроскопически и микроскопически: изучают форму колоний, морфологические и тинкториальные свойства микроорганизма. В сомнительных случаях для дифференциации гонококка от других нейссерий и грамположительных кокков определяют ферментативные свойства выделенной культуры (оксидазные, каталазные, сахаролитические). Кроме посева, может использоваться метод Полимеразной цепной реакции (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи

	Обнаружение			Темнопольная				Обнаружение
	T.pallidum	в		микроскопия				типичных форм
	материале из	очагов						трепонемы
	поражения,лимфатич
				Прямая	реакция			Наличие
	еских
				иммунофлюоресцен				флюоресцирующи
	узлов,амниотической
				ции (РИФ-Тр)				х трепонем
	жидкости,ликвора
				Полимеразная				Обнаружение
				цепная	реакция			специфической
				ПЦР				ДНК T.pallidum
	Нетрепонемные			Макроскопический				Положительный
	серологические			тест				(позитивный)резу
	тесты - обнаружение			Тест	быстрых			льтат
	в сыворотке	крови		плазменных
	антител	против		реагинов	(Rapid
	фосфолипидов			Plasma	Reagins,
	тканей,разрушенных			RPR)
	сифилитической
				Микроскопический
	инфекцией и липидов
				тест
	мембраны Т.pallidum
				VDRL	(Venereal
				Disease	Research
				laboratory)

				Количественный
				тест VDRL
				Реакция связывания
				комплимента
				(Реакция
				Вассермана)
	Трепонемные			Реакция		Положительный
	серологические			иммунофлюоресцен		(позитивный)
	тесты - обнаружение			ции		результат
	в сыворотки	крови		РИФ (FTA)
	антител	против
				Реакция	пассивной
	антигенов бледной
				гемоагглютинации
	трепонемы
				РПГА (TPHA)
				Иммуноферментны
				й	анализ
				ИФА (ELISA)

Иммуноблотинг

Реакция

иммобилизации

бледных трепонем РИБТ

21, 59. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ В отделяемом зева, трахеи, бронхов, носа в норме обнаруживаются следующие микроорганизмы: − Staphylococcus epidermidis − Streptococcus viridians − Staphylococcus aureus − Haemophilus influenza − Klebsiella pneumonia − Neisseria

spp.
−	Corynebacterium		spp.	−	Lactobacillus
−	Candidaspp	и		некоторые	другие.

Носовые пазухи в норме стерильны. У носителей чащеобнаруживаются S. aureus,

S. pneumonia, S. pyogenes. Возбудителями гнойно-воспалительных процессов дыхательных путей чаще всего являются условно-патогенные микроорганизмы следующих родов и видов: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes,

Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, Neisseria,

Corynebacterium, Klebsiella, Citrobacter, Proteus, Candida, Actinomyces и др.

При исследовании могут быть выделены Mycobacterium tuberculosis и другие микобактерии – Mycoplasma, Bacteroides.

При инфекциях дыхательных путей почти всегда в исследуемом материале обнаруживают представителей нескольких видов микроорганизмов. Заболевания верхних дыхательных путей могут вызывать такие вирусы, как риновирусы, реовирусы, вирусы простого герпеса, РС-вирусы, коронавирусы, аденовирусы, вирусы гриппа (А и В) и парагриппа. Очень часто причиной ларингобронхитов, особенно во вновь организованных коллективах, является Mycoplasma pneumoniae. Бактериальную ангину чаще вызывает B- гемолитический стрептококки группы А: Streptococcus pyogenes. Ангина Симановского-Венсана (язвенно-пленчатая, некротическая ангина)

вызывается симбиозом Fusobacterium spp. и Treponema vincentii), основным методомее диагностики является микроскопия мазков из зева и десен при окраске карболовым фуксином (обнаруживают спирохеты и фузобактерии и большое количество нейтрофилов.

60. дифтерия Лабораторная диагностика. В диагностике дифтерии важное значение имеет

микроскопический метод. Мазки из налетов зева и носа окрашивают метиленовым синим, по Нейссеру и Граму. Одновременно материал засевают на элективную и дифференциально–диагностическую среды. Выделив культуру, ее идентифицируют по культурально–биохимическим признакам. Затем определяют токсигенность, испытывая культуру на морских свинках или в реакции преципитации на пластинчатом фосфатно–пептонном агаре, подсевая ее бляшками к расположенной вдоль чашки полоске фильтровальной бумаги, смоченной антидифтерийной сывороткой.

Токсигенные штаммы коринебактерии дифтерии при внутрикожном введении вызывают местный некроз, а при подкожном – гибель животных с экссудацией в серозные полости и резкое увеличение надпочечников. Положительная реакция преципитации в агаре проявляется образованием на границе взаимодействия антитоксина и продуцируемого экзотоксина равномерно сливающихся полос преципитации или «стрел–усиков».

Экспресс–диагностика. Если прямой микроскопией мазков, окрашенных обычными способами, выявить коринебактерии дифтерии в материале не удается, то его берут тампоном со свернутой сывороткой (метод Фольгера). Тампон помещают в термостат для подращивания культуры и через 3–5 ч им делают мазки.

Иммунитет. Наиболее восприимчивы дети 1–4 лет. Вырабатывается не очень прочный антитоксический иммунитет, возможны повторные заболевания дифтерией. Невосприимчивость зависит главным образом от содержания в крови антитоксина и АТ (опсонины, преципитины, комплементсвязывающие). Уровень антитоксического иммунитета устанавливают, определяя в крови антитела в РНГА с эритроцитарным диагностикумом (эритроциты нагружены дифтерийным анатоксином). Титр 1:20 и выше ? иммунность обследуемого. Такжеже применяется реакция Шика (внутрикожно вводят дифтерийный токсин, у неимунных людей – местная воспалительная реакция, при наличии антитоксина реакции нет).

КОРИНЕБАКТЕРИЙ ДИФТЕРИИ С.diphtheriae.

Морфология. Прямые или слегка изогнутые палочки. В препаратах располагаются под углом друг к другу в виде букв L, V или китайских иероглифов. Зерна волютина (на концах палочек) выявляются при окраске синькой Леффлера или по методу Нейссера. Факультативные анаэробы, хорошо размножаются при свободном доступе кислорода. К питательным средам требовательны: не способны утилизировать азот из аммонийных соединений, требуют наличия почти всех АК, солей Mg, Zn, Cu, Fe; необходимы углеводы ? используются среды, полученные на основе ферментативного расщепления белка (казеина, дрожжей) с добавлением крови или сыворотки. На поверхностях плотных сред дифтерийные палочки образуют темно-серые или черные колонии (биовары гравис, способны расщеплять крахмал, или миттис). Рост на скошенном сывороточном агаре сравнивают с шагреневой кожей, колонии не сливаются.

Расщепляют глюкозу и другие моно- и дисахариды с образованием кислоты без газа, восстанавливают нитраты, расщепляют цистеин.

Лизируются специфичны для отдельных видов вирулентными фагами, что позволяет устанавливать фаговары исследуемых культур.

61 коклюш и паракоклюш