Выполнение работы

Хроматографирование анализируемой смеси.

Воду в колонке опускают до уровня сефадекса. Не допускайте проскока жидкости ниже уровня сефадекса! Анализируемый раствор (около 2 мл) в один прием осторожно по стеклянной палочке вливают из бюкса в колонку, стараясь не взмутить верхний слой сефадекса. Одно­временно под кран колонки подставляют мерный цилиндр и от­крывают кран. Бюкс дважды ополаскивают дистиллированной водой порциями около 0,5 мл (5—10 капель) и осторожно пере носят в колонку после впитывания анализируемого раствора в слой декстрана. Такая осторожность необходима для формирова­ния четкой, неразмытой зоны. После этого объем вносимой воды в верхнюю часть колонки не имеет значения, и воду добавляют по мере ее протекания через колонку.

В пробирки вместимостью 5 мл начинают собирать первые ок­рашенные в голубой цвет капли голубого декстрана. Записывают объем элюата (объем воды в цилиндре). Всего отбирают пробы объемом по 5 мл в 22 пробирки.

Определение голубого декстрана и арсеназо 1.

Содержимое про­бирки (5 мл) переносят в кювету с толщиной поглощающего слоя

l =10 мм и измеряют оптическую плотность А на фотоэлектроколориметре с красным светофильтром (λ= 630 нм) для голубого декстрана и с зеленым светофильтром (λ = 540 нм) для арсеназо 1. В качестве раствора сравнения используют дистиллированную воду.

По градуировочным графикам находят содержание обоих компо­нентов в каждой пробирке (g_i, мг). Содержание голубого декстрана и арсеназо 1 по отдельности в исходной смеси определяют суммиро­ванием количеств этих веществ в пробирках:

5