Теоретическая справка Принципиальная схема лабораторной диагностики бактериальных инфекций

Забор материала:

1) от больного (в зависимости от входных ворот инфекции и локализации возбудителя в организме) до приема химиотерапевтических препаратов

2) от трупа – в зависимости от патогенеза заболевания

3) из очага – источник зависит от механизма циркуляции возбудителя в абиотической среде

Микроскопия	Бактериологический	Серодиагностика
Цель: изучение морфологических и тинкториальных свойств возбудителей. Выдача ориентировочного или окончательного ответа. Методы: 1.Экспресс-метод: прямая РИФ с применением для диагностики люминесцирующих сывороток. 2.Основной метод: окраска по Граму. 3.Изучение подвижности в препаратах «раздавленная» капля, «висячая» капля. 4.Сложные и простые методы для выявления морфологических особенностей возбудителя.	Цель: выделение возбудителя в чистом виде при посеве на специальные среды с последующей идентификацией. I этап – Посев и получение изолированных колоний. Плотные питат.ср. Жидкие питат.ср. II этап – изучение изолированных колоний. 1) изучение культуральных свойств «подозрительных» колоний 2) изучение морфологических и тинкториальных свойств м/о из «подозрительных» колоний 3) отсев на скошенный агар (Ресселя, Клиглера) Накопление чистой культуры (с контролем при микроскопии) III этап – идентификация (определение рода, вида, серовара, биовара, фаговара и т.д.) 1.Изучение культуральных свойств Плотные питат.ср. Жидкие питат.ср. 2.Изучение морфологии микробной клетки 3.Изучение биохимических свойств (по набору ферментов) 4.Изучение антигенной структуры возбудителя в РА при помощи иммунных диагностических сывороток (Сероидентификация) 5.Изучение фаголизабельных свойств 6.Изучение вирулентных свойств возбудителя, выделенной чистой культуры, обнаружение токсинов возбудителя. 7.Антибиотикочувствительность. IV этап – выдача окончательного ответа из баклаборатории.	Цель: изучение сывороток больного с целью выявления динамики нарастания титра специфических иммуноглобулинов. Реакции: 1.РА 2.РПГА 3.РСК 4.Непрямая РИФ 5.ИФА 6.РП 7.РН Биопроба – обнаружение экзотоксинов возбудителей, воспроизведение инфекций (туляремия, чума). Аллергическая проба (на макроорганизме)

Биохимическая активность возбудителя

АГАР КЛИГЛЕРА-ГРМ предназначен для первичной идентификации энтеробактерии по их способности ферментировать лактозу, глюкозу, образовывать газ и сероводород. После стерилизации среду в пробирках скашивают, оставляя столбик, высотой 25-30 мм. Готовая среда имеет красный цвет

Тест-штамм	Наблюдаемый эффект
Escherichia coli 3912/41 (055.К59)	Желтый косяк и жёлтый столбик. Образуется газ

ПОСЕВ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Посев проводят как на поверхности скошенной среды, так и внутрь столбика, прокалывая его петлей. Для посева используют чистые культуры со среды выделения. Пробирки инкубируют в течение 20-24 ч при температуре 36-38 °С.

После инкубации регистрируют реакцию на скошенном агаре и столбике по изменению цвета среды (если изменяется цвет скошенной части - ферментируется лактоза, столбика -ферментируется глюкоза), наличие или отсутствие газообразования и продукцию сероводорода (почернение среды)