Q-сегменты различаются по своей яркости, но не по размерам. Рекомендуется субъективно сравнивать их с другими, неполиморфными районами хромосом [51], однако здесь мешает то, что общий уровень флуоресценции в пределах одной метафазной пластинки может варьировать. Если полиморфизм Q-сегментов исследуют на фотографиях, то необходимо удостовериться, что при фотографическом процессе содержащаяся в изображении информация не потерялась. Овертон и др. [63] рекомендуют печатать фотографии, используя серию различных выдержек, чтобы Q-сегменты всех уровней яркости могли хорошо зафиксироваться на отпечатке. Шнедл и др. [61] описали применение профилей сегментации для измерения яркости полиморфных районов. Это действительно полезный метод, хотя без специальных предосторожностей измеряемые величины не будут пропорциональны интенсивности исходной флуоресценции. Подробное обсуждение проблем, связанных с получением количественных данных с помощью флуоресценции, можно найти у Ван-дер-Плога и др. [62].

Хотя и не существует универсального метода для измерения полиморфизмов хромосом, тем не менее во всех случаях, когда это возможно, нужно пытаться проводить измерения, поскольку очень важно пользоваться количественными данными, а не субъективными впечатлениями. Для этого могут применяться системы анализа изображения с высоким разрешением, которые находят в последнее время все большее применение. В любом случае результаты измерений зависят от качества исходной окраски, от настройки микроскопа, которая должна быть оптимальной, и, если используется фотография, от тщательности воспроизведения изображения. Чтобы получить достоверные количественные данные и достичь наилучших результатов, необходимо понимать суть происходящих процессов и обращать внимание на детали.

7. Благодарности

Я хотел бы поблагодарить д-ра Джона Госдена (John Gosden), за предоставление метода приготовления спермидин-бис-акридина; мистера Нормана Дэвидсона (Norman Davidson) за советы по технике фотографии и м-ра Джорджа Споварта (George Spowart) за общие советы по методам дифференциального окрашивания. Несколько фирм любезно предоставили необходимую информацию о производимых ими флуоресцентных микроскопах. Я особенно благодарен миссис Энн Кенмур (Ann Kenmure), которая печатала данную рукопись, и отделу фотографии в MRC Human Genetics Unit за подготовку иллюстраций.

8. Литература

1.Sumner, Д. Т. (1982) Cancer Genet. Cytogenet., 6, 59,

2.Heitz, E. (1929) Ber. Dtsch. Bot. Ges., 47, 274.

3.John, B. and King, M. (1977) Chromosoma, 65, 59.

4.Camacho, J. P. M., Viseras, E., Navas, L and Cabrera, I. (1984) Heredity, 53, 167.

5.Ochs, R. L. and Busch, H. (1984) Exp. Cell Res., 152, 260.

6.Markovic, V. D., Worton, R. G. and Berg, J. M. (1978) Hum, Genet., 41, 181.

7.Moroi, Y., Peebles, C., Fritzler, M. J., Steigerwald, L. and Tan, L. M. (1980) PNAS, 77, 1627.

8.Pfeiffer, R. A. (1974) In Schwarzacher, H. G Wolf, U. and Passarge, E. (eds) Methods in Human Cytogenetics. Springer-Verlag, Berlin, p. 1.

9.Zackai, E. H. and Mellman, W. L (1974) In Yunis, J. J. (ed.), Human Chromosome Methodology. Academic Press, New York, 2nd edition, p. 95.

10.Macgregor, H. C. and Varley, J. M. (1983) Working with Animal Chromosomes. John Wiley and Sons, Chichester.

11.Watt, J. L. and Stephen, G. S. (1986) In Rooney, D. E. and Czepulkowski, B. H. (eds), Human Cytogenetics: A Practical Approach. IRL Press, Oxford, p. 39.

12.Worton, R. G. and Duff, C. (1979) In Jakoby, W. B. and Pastan, I. H, (eds), Methods in Enzymology. Academic Press, New York, Vol. 58, p. 322.

13.Harrison, S. /. (1986) In Rooney, D. E, and Gzepulkowski, В. Н, (eds), Human Gytogenetics: A Practical Approach, IRL Press, Oxford, p« 135.

14.Darlington, C. D. and La Cour, L. F. (1969) The Handling of Gnromosomes. George Allen and Unwin, London, 5th edition, p. 43.

15.Schwarzacher, Т., Ambros, P. and Schweizer, D. (1980) Plant Syst. Evol., 134, 293.

16.Evans, E. P., Breckon, G. and Ford, С. Е. (1964) Cytogenetics, 3, 289

17.Breckon, G. (1982) Stain Technol., 57, 349.

18.Hungerford, D. A. (1971) Cytogenetics, 10, 23

19.Sumner, A. T. (1972) Exp. Cell Res., 75, 304.

20.Chandley, A. C. and Fletcher, J. M. (1973) Humangenetik, 18, 247.

21.Sumner, А. Т., Evans, H. J. and Buckland, R. A. (1971) Nature New Biol 232, 31.

22.Seabright, M. (1972) Chromosoma, 36, 204.

23.Gallimore, P. H. and Richardson, C. R. (1973) Chromosoma, 41, 259.

24.Sehested, J. (1974) Humangenetik, 21, 55.

25.Buckton, K. E. (1976) Int. J. Radiat. Biol., 29, 475.

26.van de Sande, J. H., Lin, C. C. and Deugau C. V. (1979) Exp. Cell Res 120, 439. 55.

212

27.Howell, W. M. and Black, D. A. (1980) Experientia, 36, 1014.

28.Tantravahi, R., Miller, D. A. and Miller, 0. J. (1977) Cytogenet. Cell Genet, 18, 364.

29.Howell, W. M. and Black, D. A. (1978) Human Genet. 65, 144.

30.Schweizer, D., Ambros, P. and Andrle, M. (1978) Exp. Cell Res., 111, 327.

31.Donlon, T. A. and Magenis, R. E. (1983) Human Genet., 65, 144.

32.Benn, P. A. and Perle, M. A. (1986) In Rooney, D. E. and Czepulkowski, В. Н. (eds), Human Cytogenetics: A Practical Approach. IRL Press, Oxford, p. 57.

33.Schmidt, M., Stolzmann, W. M. and Baranovskaya, L. (1982) Chromosoma, 85, 405.

34.Willard, H. F. (1977) Chromosoma, 61, 61.

35.Perry, P. and Wolff, S. (1974) Nature, 251, 156.

36.Wolff, S. (1977) Annu. Rev. Genet., 11, 183.

37.Limon, L and Gibas, Z. (1985) In Sandberg, A. A. (ed.), The Y Chromosome, Part A: Basic Characteristics of the Y Chromosome. Alan R. Liss, New York, p. 317.

38.Yunis, J. J. (1976) Science, 191, 1268.

39.Dutrillaux, B. and Viegas-Pequignot, E. (1981) Human Genet., 57, 93.

40.de Braekeleer, M., Keushnig, M. and Lin, C. C. (1985) Can. J. Genet., Gytol., 27, 622.

41.Kao, Y. S., Whang-Peng, J. and Lee, E. (1983) Am. J. Clin. Pathol., 79, 481.

42.Ikeuchi, T. (1984) Cytogenet. Cell Genet., 38, 56.

43.Bradbury, S. (1984) An Introduction to the Optical Microscope. Oxford University Press, Oxford.

44.Wulf, H. C. (1983) Mikroskopie, 40, 1.

45.Ploem, J. S. and Tanke, H. J. (1987) Introduction to Fluorescence Microscopy. Oxford University Press, Oxford.

46.Davidson, N. R. (1973) J. Med. Genet., 10, 122.

47.Wayne, A. W. and Sharp, J. C. (1981) J. Microsc., 124, 163.

48.Sumner, A. T. and Finlayson, D. (1978) J. Microsc., 114, 85.

49.Piper, J. (1982) Anal. Quant. Cytol., 4, 233.

50.Enk, D. and Pawlowitzki, I. H. (1987) J. Microsc., 143, 301.

51.ISCN (1978) Cytogenet. Cell Genet., 21, 309.

52.Patil, S. R. and Lubs, H. A. (1977). Human Genet., 38, 35.

53.Cohen, M. M., Shaw, M. W. and MacCluer, J. W. (1966) Gytogenetics, 5, 34.

54.Sumner, A. T. (1977) Cytogenet. Cell Genet., 19, 250.

55.Cavalli, I. J., Mattevi, M. S., Erdtmann, В., Sbalqueiro, L and Maia, N. A. (1985) Human Hered., 35, 379.

56.Mason, D., Lander, L, Rutovitz, D. and Spowart, G. (1975) Comput. Biol. Med., 5, 179.

57.Lopetegui, P. H. (1980) Japan J. Hum. Genet., 25, 29.

58.Drets, M. E. and Seuanez, H. (1974) In Coutinho, E. M. and Fuchs, F. (eds), Physiology and Genetics of Reproduction, Part A. Plenum Publishing Corporation, New York, p. 29.

59.Wegner, H. and Pawlowitzki, I. H. (1981) Human Genet., 58, 302.

60.Schmid, M., Loser, C., Schmldtke, 7. and Engel, W. (1982) Chromosoma, 86, 149.

61.Schnedl, W., Roscher, U. and Czaker, R. (1977) Human Genet., 35, 185.

62.van der Ploeg, M., Vossepoel, A. M., Bosman, F. T. and van Duiln, P. (1977) Histochemistry, 51, 269.

63.Overton, C. M., Magenis, R. E., Brady, Т., Chamberlin, I. and Parks, M. (1976) Am. J. Human Genet., 28, 417.

9. Литература для дальнейшего чтения

MacGregor, H. C. and Varley, J. M. (1983) Working with Animal Chromosomes. John Wiley and Sons, Chichester. Rooney, D. E. and Czepulkowski, B. H. (1986) Human Gytogenetics: A Practical Approach. IRL Press, Oxford.

213