3. Фагодиагностика

а) Типирование бактериофагами

К

Т

А

В

К

В Т

В жидком МПБ

А

На плотном МПА Т, А, В – б/фаги

К – физ.раствор

б) Чувствительность к поливалентному (Т, А, В) на плотной или жидкой среде

Выполняются также, но со смесью б/фагов, без их разделения.

Дополнение к 3 а

Свежевыделенные (идентифицированные) брюшнотифозные бактерии содержат Vi – антигены, к ним обнаружены 24 типа Vi – фага. Соответственно существует 24 типа брюшнотифозных Vi – штаммов. Кроме того, существует Vi – фаг I типа – универсальный для всех брюшнотифозных бактерий.

Методика фаготипирования по Vi – специфичности:

1. Чистую культуру отсеять на МПБ. Выращивать 4 дня при + 37^оС.

2. 25 капель 4-х суточной культуры раздельно раскапать на чашки с МПА. Подсушить.

3. К каждой подсушенной капле добавить один из 24-х Vi –бактериофагов, а к 25-й обязательно Vi – фаг универсального типа. Подсушить.

4. Поместить в термостат при + 37^оС на 2 часа, затем на 8-10 часов на холод (+ 4^оС) и опять в термостат на 4 часа при + 37^оС.

5. Учет результатов. Лизис культуры Vi – фагом I типа свидетельствует о её принадлежности к брюшнотифозным микробам.

Лизис одним из 24 типов фага указывает на принадлежность штамма к этому типу моно- Vi – фага.

4. Чувствительность к лекарственным веществам антибиотикам

Метод лекарственных 1/5 1/10 1/20 1/40 1/80 Контроль Контроль

дисков (диффузионный Метод серийных разведений культуры антиб-тика

на МПА)

Зона отсутствия роста - Среда без помутнения говорит о чувствительности,

с ним – у чувствительных культур, об её отсутствии.

наличие его – у устойчивых.

5. Заключение об идентификации микробного вида

На основании изученных свойств: морфологических, структурных, тинкторальных, подвижности, биохимических (углеводо- и протеолитических) серологических (антигенный состав), чувствительности к бактериофагу – делаем заключение о виде возбудителя – идентифицируем микробный вид и фаготип культур.

На основании чувствительности к лекарственным веществам и бактериофагам, даем заключение, чем надо лечить больного.

Приложение № 2

Бактериологический метод.

Выделение чистой культуры при брюшном тифе из кала (копрокультура)

Метод отличается от предыдущего (гемокультура) только начальным этапом – подготовкой и характером материала и исключением накопления культуры.

Цель – получение изолированной колонии.

Посев (рассев) на ДДС

По Граму Т А В К + 37^оС

18-24 Часа

Подвижность

Исследуемый Ориентировочная РА Висмут – сульфит агар,

Материал с АТ Т, А, В среды Левина, Плоскирева,

(кал в физ.р-ре) К – контроль Эндо и т.д.

Дальнейшее изучение изолированных колоний, накопление чистой культуры и её исследование идёт по типу гемокультуры. Приложение № 5.

Приложение № 3

Ускоренный бактериологический метод исследования крови при тифо-паратифозных инфекциях (Метод профессора Блинкина)

Метод основан на применении 2-х комплексов комбинированных питательных сред для выделения и идентификации культур, за счет чего этапы анализа сокращаются.