Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методы / 12.doc
Скачиваний:
152
Добавлен:
19.06.2017
Размер:
135.17 Кб
Скачать

Разведений

Ингредиенты

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

К.к.

К.с.

МПБ

1,8

1

1

1

1

1

-

-

Сыворотка крови больного

0,2

1

1

1

1

1

1

1

Тест-микроб Bac. subtilis600 млн. мт/ в каплях

-

Инкубировать при +37 С° 18 часов

Учет результатов по лизису тест - культуры

ПОЛНЫЙ ЛИЗИС

Нет

лизиса

Рост

тест-культуры

Нет роста

Титр бета-лизинов - 1:160 (максимальное разведение или минимальное количество, дающее лизис) тест – культурыBac.subtilis(сенная палочка).

Приложение 5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ

Определенный объем сыворотки крови смешивают с тест – культурой S.flexneri и E. coli(опыт). В контрольную пробу в таком же объеме вместо сыворотки крови вносят стерильный 0,85 % раствор поваренной соли и одну из тест – культур.

Посев инкубируют в термостате при +37С º. Последующая оценка бактерицидной активности может быть определена одним из следующих способов:

а) Путем высева из опытных и контрольной пробна чашки с МПА и инкубирования последней при +37С° 18-24 час., подсчетом колоний на опытных и контрольных чашках с их сопоставлением.

б) Методом фотонефелометрической оценки бактерицидной активности сыворотки крови (Смирнова, Кузьмина, 1966), при котором сопоставляются показатели оптической плотности опытных и контрольных проб и определяется бактерицидная активность в % по формуле:

в) Путём учёта просветления в опытных пробах в результате проявления бактерицидности.

Приложение 6

Пути активации комплемента

Многочисленные функции комплемента могут быть реализованы только после его активации, которая осуществляется двумя путями: классическим (каскадным) способом и альтернативным способом.

Этапы классического пути активации комплемента

1. Начало - связывание антител с клеточной поверхностью микроорганизма, чужеродной клетки, ткани и т.д.

2. Распознавание антител и связывание их с 1 компонентом комплемента (С'1).

З. Прикрепление С'2компонента к этому сессильному (прикрепленному) антителу.

4. Последовательная активация С'1, С'4, С'2 компонентов.

5. Включение в процесс С'3, С'5, С'6, С'7компонентов. Их активация сопровождается привлечением лейкоцитов к мембране связанной клетки.

б. При участии С'8С'9, лейкоцитов происходит лизис клетки (цитолиз).

Этапы альтернативного пути активации комплемента

1. Инициатор процесса активации комплемента здесь не антитело. Начинают процесс активации С' полисахариды, эндотоксины микробов, они активируют пропердин.

2. У пропердина активируются факторы Д и В (аналоги С'1, С'2компонентов комплемента).

З. Активация центрального звена комплемента - С'3.

4. От С'3 по принципу обратной связи - активация Д, В компонентов пропердина.

5. Импульс от Д, В компонентов и С'3далее идет по цепи к С'5, С'6, С'7, затем — С'8С'9, что завершается лизисом клетки.

Приложение 7

КЛАССИФИКАЦИЯ ВИДОВ АНТИГЕНОВ

Антиген

Видовой

Национальный Половой Расовый

Типовой

Структурный

Возрастно-стадийный

Гетерогенный

Аутоантиген (тканевой)

Комплексный Функциональный Протективный

Приложение 8

СТРУКТУРНЫЕ АНТИГЕНЫ МИКРОБОВ

Микробная клетка:

1. Оболочечно-стеночный

2. Капсульный

3. Рецепторный

4. Цито-мембранный

5. Ядерный (нуклеоидный)

6. Цитоплазматический

7. Рибосомальный

8. Лизосомальный

9. Жгутиковый

10. Пили-антиген

Приложение 9

Тестовый контроль усвоения темы

Выберите правильный ответ:

1. Лизоцим - это фермент, расщепляющий:

а) мурамилпептид

б) лизин

2. Для оценки уровня неспецифической резистентности не используется:

а) бактерицидную активность кожи

б) вирулентность

в) титр лизоцима

г) титр комплемента

д) показатели фагоцитоза

3. Существуют пути активации комплемента:

а) лектиновый

б) альтернативный

в) классический

г) все вышеперечисленные

4. Укажите, что является начальным активатором комплемента в классическом пути

а) липополисахарид

б) пропердин

в) антиген

г) антитело

д) комплекс антиген – антитело

5. Укажите, что является начальным активатором комплемента в альтернативном пути

а) липополисахарид

б) пропердин

в) антиген

г) антитело

д) комплекс антиген - антитело

6. Функция комплемента:

а) нейтрализация токсинов

б) лизис клеток-антигенов

в) усиление фагоцитоза

г) участие в патогенезе аллергических реакций

д) все вышеперечисленное

7. Пропердин - это:

а) неспецифический фактор противовирусного иммунитета

б) белок, принимающий участие в активации комплемента по классическому пути

в) белок, принимающий участие в активации комплемента по альтернативному пути

г) все перечисленное

8. Интерферон – это:

а) неспецифический фактор противовирусного иммунитета

б) белок, принимающий участие в активации комплемента по альтернативному пути

в) белок, принимающий участие в активации комплемента по классическому пути

9. Для оценки гуморального звена неспецифической резистентности используют:

а) фагоцитарный индекс

б) бактерицидность кожи

в) титр комплемента

г) лейкоцитарную формулу

10. Для характеристики фагоцитарной реакции определяют:

а) лейкоцитарную формулу крови

б) % активных фагоцитов

в) фагоцитарное число

г) завершенность фагоцитоза

д) все перечисленное

11. К макрофагальной системе не относятся:

а) моноциты

б) тканевые макрофаги

в) гранулоциты

12. Выберите правильные утверждения:

а) собаки не болеют брюшным тифом по причине видовой невосприимчивости

б) по причине приобретенного иммунитета

13. Может ли быть дефицит в естественной резистентности?

а) Да

б) Нет

14. Отразится ли дефицит резистентности на специфическом иммунитете?

а) Да

б) Нет.

Приложение 10

ТЕСТЫ ДЛЯ ИТОГОВОГО КОНТРОЛЯ

1. Выберите правильное определение антигена (А) и антитела (Б):

а) вещество или существо, вызывающее выработку антител

б) защитное вещество организма

в) барьер на пути инфекции

2. Материальная основа структуры антигена:

а) белок

б) липополисахарид

в) соли

г) кислота, щёлочь

д) рецепторные группы

3. Функциональное назначение в антигене шлеппера (А), гаптена (Б):

а) вызывает выработку антител, обладая антигеным действием

б) обладает антигенной специфичностью и вступает в реакцию взаимодействия с

антителами

в) защищает от инфекции

г) влияет на морфологию микробов

4. Н- антиген бактерий — это антиген:

а) жгутиковый

б) соматический

в) капсульный

5. Главные структурные элементы антител:

а) тяжёлые цепи аминокислот

б) лёгкие цепи аминокислот

в) дисульфидные связи

г) рецепторы к антигенам

д) рецептор к комплементу

е) ворсинки

ж) капсулы

6. Что такое участок Faв в антителе:

а) специфический комплекс рецепторов к антигену

б) рецепторная часть, реагирующая с комплементом

в) рецепторы, ответственные за присоединение к клетке организма

г) случайный обязательный элемент

д) рецептор к клетке органа.

7. Что такое Fcв антителе? Ответ найдите в п.6.

8. Роль антигена в антителогенезе:

а) митогенная

б) инструктивная

в) индуцирующая

г) всё перечисленное

д) селективная

Расположите функции последовательно

9. В лаборатории искусственно получены полипептиды с молекулярными массами: А — 50, В — 500000, С — 5000000. Из указанных веществ:

а) все являются антигенами

б) ни одно не является антигеном

в) антигеном является только вещество С

г) антигеном не является только вещество А.

10. Маркер первичного иммунного ответа:

а) IgА

б) IgМ

в) IgЕ

г) IgG

11. Местный иммунитет обусловлен наличием на поверхности слизистых оболочек:

а) IgА

б) IgМ

в) IgЕ

г) IgG

д) IgD

12. Реагинами называют:

а) IgА

б) IgМ

в) IgЕ

г) IgG

д) IgD

13. В сыворотке крови больше всего содержится:

а) IgА

б) IgМ

в) IgЕ

г) IgG

д) IgD

14. Секреторные IgА отличаются от циркулирующих в крови IgА:

а) антигенной специфичностью

б) строением L-цепи

в) наличием S-фрагмента

15. При первичном иммунном ответе:

а) вырабатываются только IgМ

б) вырабатываются только IgG

в) вырабатываются сначала IgМ а затемIgG

16. Валентность антител:

а) количество специфически активных центров в молекуле Ig

б) количество аминокислотных остатков в вариабельном участке

в) количество молекул Igвзаимодействующих с одной антигенной детерминантой

17. Наибольшую валентность имеют:

а) IgА

б) IgМ

в) IgЕ

г) IgG

д) IgD

18. В гуморальном иммунном ответе на тимусзависимый антиген участвуют:

а) микрофаги

б) макрофаги

в) Т-хелперы

г) Т-киллеры

д) В-лимфоциты

19. Главными клетками-регуляторами иммунного ответа являются:

а) микрофаги

б) макрофаги

в) Т-хелперы

г) Т-киллеры

л) В-лимфоциты

20. Для оценки состояния гуморального иммунитета (А) и состояния клеточного

иммунитета (Б) могут быть использованы показатели:

а) количество Т-лимфоцитов

б) количество В-лимфоцитов

в) отдельные классы Igпо Манчини

г) наличие ГЗТ

д) реакция бласттрансформации

е) торможение миграции макрофагов

21. Количество Т-лимфоцитов (А) и В-лимфоцитов (Б) определяют при помощи реакции:

а) бласттрансформации

б) розеткообразования

в) преципитации по Манчини

22. Для определения Т- и В- лимфоцитов необходимо иметь:

а) эритроциты барана

б) иммунную сыворотку

в) гемолитическую сыворотку

г) эритроциты мыши

23. В период эмбрионального развития в организм был введён антиген. Взрослый

организм:

а) будет отвечать на этот антиген усиленной выработкой антител

б) не будет вырабатывать тела на это антиген

в) будет обладать врождённой устойчивостью к этому антигену.

24 Данный феномен называется:

а) иммунологическая толерантность

б) иммунологический паралич

в) иммунологическая память

25. Лимфокины — это:

а) факторы, обусловливающие подвижность лимфоцитов

б) медиаторы иммунного ответа, продуцируемые лимфоцитами

в) вещества, продуцируемые бактериями и убивающие лимфоциты

26. В распознавании антигенов «свой-чужой» участвуют:

а) макрофаги

б) микрофаги

в) Т-лимфоциты

г) плазматические клетки

д) В — лимфоциты

27. Для функциональной оценки В- системы используются:

а) определение содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови

б) реакция розеткообразования

в) реакция бласттрансформации

г) тест торможения миграции макрофагов

д) определение ГЗТ

28. Цитотоксический эффект в клеточных реакциях иммунитета осуществляют:

а) микрофаги

б) макрофаги

в) Т-хелперы

г) Т-киллеры

д) В-лимфоциты

29. Выберите правильные утверждения:

а) организм не способен вырабатывать антитела против собственных тканевых антигенов

б) антигеном может быть только макромолекулярное вещество

в) гаптен может быть превращён в антиген путем частичного расщепления

г) гаптен не является полноценным антигеном

30. Отличие наследственных (врождённых) иммунодефицитов от приобретённых:

а) поломка или изменение генома

б) индуцирование врождёнными воздействиями — инфекционными

в) физическими

г) радиационными

д) химическими веществами

32. При иммунодефиците с поражением Тh-лимфоцитов (А) и при иммунодефиците с

поражением В-лимфоцитов (б) наблюдается:

а) полное отсутствие выработки антител

б) выработка антител только при введении гаптенов

в) выработка антител только на тимусзависимые антигены

г) выработка антител только на тимуснезависимые антигены

д) нарушается регуляция антителогенеза.

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

Основная

1. Лекции по теме.

2. Методическая разработка по теме.

3. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. С-Пб, 2005. С.209-235.

4. ПоздеевO.K. Медицинская микробиология (под ред. Покровского В.И.). М., 2006. С.182-202.

5. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и

вирусология. С-Пб., 2002. С. 148-166.

Дополнительная:

1. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Под ред. Воробьева А.А., Быкова А.С. М., 2003. С.185-189.

2. Медицинская микробиология. Под ред. Покровского В.И., O.K. Поздеева. М., 1999. С. 77-108.

3. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М., 2000. С.18-96.

4. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. М., 2000. С. 50-70.

5. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. М, 2003. С. 13-42.

99

Соседние файлы в папке Методы