Культивирование простейших
-
Среда NNN (3 N - Нови, Ниль, Николь): вода, поваренная саль, агар-агар, дефибринированная кровь кролика.
-
Для размножения лейшманий - среда 3 N модифицированная (свежую кровь заменяют переваром или разведенной сывороткой крови человека).
-
Для выделения чистой культуры трихомонад - обрабатывают материал пенициллином и стрептомицином (для устранения бактерий), добавляют нистатин (для устранения дрожжевых грибов).
Затем засевают материал на одну из сред:
-
МПБ с 1% глюкозой и 5% лошадиной сыворотки. После посева среду сверху заливают вазелиновым маслом.
-
Среда Т (печеночный бульон, раствор Рингера, пептон, агар-агар, цистеин солянокислый. После стерилизации добавляют мальтозу, инактивированную сыворотку человека или асцитическую жидкость).
Приложение 6
Культивирование риккетсий
1. В развивающихся 7-11 дневных куриных эмбрионах: заражение производят в желточный мешок, температура и продолжительность выращивания зависят от вида риккетсий.
2. В культуре клеток:
- первичные однослойные культуры клеток (чаще – трипсинированные культуры) куриных, мышиных, крысиных, человеческих фибробластов;
- перевиваемые культуры клеток (опухолевых или нормальных тканей);
- трипсинизированные культуры клеток почечного эпителия; первичные культуры ретикулярных клеток макрофагов (из костного мозга, селезенки).
3. В организме чувствительных животных:
- легочный реккетсиоз у мышей (интраназальное введение материала молодым мышам);
- легочный риккетсиоз у кроликов (введение в трахею);
- перитониальный риккетсиоз у морских свинок и кроликов (внутрибрюшное введение);
4. Заражение вшей микроинъекциями: per rectum методом Вейгеля (введение заразного материала через стеклянный капилляр в кишечник членистоногих под контролем через бинокулярную лупу с увеличителем в 10-15 раз или per os (на кормилках);
- методами непосредственного кормления насекомых на больных добровольцах.
Приложение 7
ВОПРОСЫ ДЛЯ ТЕСТОВОГО КОНТРОЛЯ
1. Что определяет резистентность микроорганизмов к лекарственным препаратам?
а) наличие плазмид лекарственной устойчивости
б) уменьшение числа, либо отсутствие рецепторов на поверхности клетки для взаимодействия препарата с микробом
в) индуцирована применением антимикробных препаратов, селекция устойчивых штаммов, с удалением чувствительных
г) спонтанные мутации генома бактерии и/или хозяина
д) возможны все механизмы
2. Что такое диско-диффузионный метод (метод Кирби-Баэура)?
а) тест определения концентрации препарата в сыворотке, ингибирующей рост микроорганизмов
б) простой метод определения чувствительности клинически значимых микроорганизмов к антимикробным агентам
в) стандартный тест определения антимикробной чувствительности, зависящей от качества и РН среды, температуры, концентрации препарата и свойств тест-культуры
г) тест определения чувствительности или резистентности микроорганизмов к препаратам
3. На какой день определяют характер антимикробного бактерицидного действия?
а) через 18-24 часа;
б) через 4-6 суток
4. На какой день определяют характер антимикробного бактериостатического действия?
а) через 18-24 часа;
б) через 4-6 суток.
5. Что необходимо для определения концентрации антибиотика в биосубстрате:
а) контрольный ряд с разведенным антибиотиком, равным искомому
б) физиологический раствор
в) все перечисленное
6. Какие культуральные свойства характерны для представителей семейства Mycoplasmataceae?
а) образуют видимые колонии на простых питательных средах
б) для роста требуют сложных сред, дополненных внесением холестерина
7. Какие из упомянутых микроорганизмов способны репродуцироваться во внеклеточной среде?
а) Rickettsia rickettsii
б) Chlamidia psittaci
в) Chlamidia trachomatis
г) Coxiella burnettii
д) S. аureus
8. Каким методом идентифицируют дрожжи?
а) микроскопия окрашенного мазка
б) визуализация роста культуры
в) определение углеводолитической активности
г) все вышеперечисленное
9. Преимущественно каким методом определяют гифальные грибы?
а) микроскопия окрашенного мазка
б) определение культуральных свойств
10. При каком значении химиотерапевтического индекса (ХТИ) лекарственный препарат считается эффективным:
а) ХТИ > 3
б) ХТИ < 1
в) ХТИ = 1
11. При учете результатов диско-диффузионного метода обнаружены чувствительные к антибиотику бактерии. Это значит:
а) зона подавления роста бактерий вокруг диска большая
б) зона подавления роста вокруг диска отсутствует
в) наиболее интенсивный рост вблизи диска с антибиотиком и на нем
12. Каким методом культивируют спирохеты:
а) на искусственных питательных средах
б) интротестикулярно
в) в развивающемся курином эмбрионе
13. Каким методом можно определить присутствие в объекте культивирования лептоспир
а) метод темного поля
б) окраска по Здродовскому
в) стереомикроскопия
14. Каким методом культивируют хламидии:
а) на искусственных питательных средах
б) интротестикулярно
в) в культуре клеток
15. Каким методом можно определить присутствие в объекте культивирования риккетсии
а) окраска по Граму
б) окраска по Романовскому-Гимза
в) метод темного поля
г) метод люминесценции
д) окраска по Здродовскому
е) стереомикроскопия
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная:
Лекция по теме.
-
Методическая разработка по теме.
3. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2005. С.160-182.
4. O.K. Поздеев. Медицинская микробиология. Под ред. В.И. Покровского. М., 2006. С. 155-181.
5. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования под ред. М.О. Биргера. М., 1982. С. 170-182.
Дополнительная:
1. Красильников А.П., Романовская Т.Р. Микробиологический словарь-справочник. Минск, 1999.
2. Машковский М.Д. Справочник лекарственных средств. М., 1999.
3. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. С-Пб, 2002. С. 58-67.
4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. Воробьева А.А. М., 2006.