Теоретическая часть.
Общая характеристика печени как органа гомеостаза. Клеточный состав печени. Метаболическая гетерогенность гепатоцитов.
Роль печени в углеводном обмене (синтез и распад гликогена, глюконеогенез), функциональные пробы, характеризующие роль печени в углеводном обмене (сахарная кривая, нагрузка глюкозой, фруктозой, галактозой).
Роль печени в липидном обмене (переваривание и всасывание, синтез ТГ, ФЛ, ХС, ЛП, кетоновых тел). Состав и функции желчи. Печеночные камни, их состав и механизм образования. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в липидном обмене (липидный спектр, содержание общих липидов, ТГ, ХС, ФЛ, кетоновых тел). Роль печени в азотистом обмене (синтез белков плазмы, регуляция пула аминокислот, синтез мочевины, обмен билирубина). Механизм развития печеночной комы. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в азотистом обмене (электрофореграммы белков плазмы крови, содержание свободных аминокислот, пробы на гемокоагуляцию - протромбиновый индекс и др., аммиак, мочевину, билирубин). Роль печени в гормональном гомеостазе - метаболизм гормонов в печени. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в развитии вторичного гиперальдостеронизма.
Основные пути метаболизма ксенобиотиков:
транспорт в крови и через мембраны,
гидроксилирование и микросомальная ДЦ и др. реакции,
конъюгация (роль ФАФС, УДФГК, АМ, ацетил КоА и др.).
Пробы на детоксикацию (амидопириновая и др.).
Энзимодиагностика заболеваний печени:
гепатоцеллюлярных - альдолаза, ЛДГ, АСТ, АЛТ, ГДГ.
холестатических - ЩФ, 5-нуклеотидаза, холинэстераза, ГГТП, ЛАП.
Практическая часть - выполнение лабораторной работы:
Определение активности щелочной фосфатазы сыворотки крови.
Решение задач и проведение контроля конечного уровня
Литература основная:
1. Материал лекций.
2. Березов Т.Т. Коровкин Б.Ф. Биологическая химия, М., Медицина, 1990, стр. 427-437, Медицина, 1998 г., стр. 551-564.
3. Николаев А.Я. Биологическая химия, М., Высшая школа, 1989, стр. 411-426.
дополнительная
4. Клиническая биохимия под ред. Базарновой, Киев, 1986 г.
5. Хашен В. Очерки по патологической биохимии М., Медицина, 1978.
6. Зилва Ф. Пэннел П. Клиническая химия в диагностике и лечении, М., Медицина, 1988.
ЗАДАЧИ:
1. При каких заболеваниях отмечается повышение тимоловой пробы?
а) острый ревматизм
б) хронический гепатит в стадии обострения
в) хронический гепатит вне стадии обострения
г) желчно-каменная болезнь
д) цирроз печени
е) хронический гастрит
ж) инфаркт миокарда
з) острая пневмония
2. При каких заболеваниях наблюдается снижение уровня мочевины в крови?
а) острая желтая атрофия печени
б) подагра
в) обтурационная кишечная непроходимость
г) гемолитическая желтуха
д) брюшной тиф
е) гломерулонефрит
ж) гипертоническая болезнь
3. Какие биохимические параметры характеризуют воспалительный процесс при заболеваниях печени?
а) белковые фракции |
д) содержание мочевины |
б) активность трансаминаз |
е) содержание электролитов |
в) тимоловая проба |
ж) содержание билирубина |
г) содержание холестерина |
|
4. Активность щелочной фосфатазы сыворотки крови повышается при:
а) рахите |
д) панкреатите |
б) остеомаляции |
е) раке простаты |
в) остеопорозе |
ж) регенерации кости |
г) мышечной дистрофии |
з) инфаркте миокарда |
5. Активность кислой фосфатазы сыворотки крови повышается при:
а) остеосаркомах |
д) костном туберкулезе |
б) инфаркте миокарда |
е) пневмонии |
в) лейкозах |
е) раке простаты |
г) язвенной болезни желудка |
з) переломах кости |
6. Активность АЛТ сыворотки крови повышается при:
а) механической желтухе |
е) рахите |
б) холангите |
ж) пневмонии |
в) остром гепатите |
з) панкреатите |
г) инфаркте миокарда |
и) раке печени |
д) мышечной дистрофии |
к) язве желудка |
7. При каких заболеваниях возрастает активность фруктозо-1,6-дифосфатальдолазы сыворотки крови ?
а) острый гепатит |
е) пневмония |
б) мышечная дистрофия |
ж) атеросклероз |
в) дерматомикоз |
з) ларингит |
г) инфаркт миокарда |
и) холангит |
д) острые респираторные инфекции |
к) пиелонефрит |
8. Активность фруктозо-1 фосфатальдолазы сыворотки крови повышается при:
а) гемолитической анемии
б) функциональной гипербилирубинемии
в) циррозе печени (неактивная фаза)
г) вирусном гепатите
в) циррозе печени (активная фаза)
д) уремии
9. Какие тесты характеризуют антиоксидантную систему организма?
а) уровень -токоферола
б) уровень C-реактивного белка
в) уровень гамма-глобулинов
г) уровень общих липидов
д) уровень церулоплазмина
е) активность АЛТ
ж) активность АСТ
10. Основными антиоксидантами организма являются?
а) -токоферол |
е) аскорбат |
б) убихиноны |
ж) ионы Са++ |
в) витамин K |
з) витамин А |
г) холестерин |
и) стеркобилиноген |
д) НЭЖК |
к) гамма-глобулины |
11. Ферментами, ингибирующими процесс ПОЛ являются:
а) липоксигеназа
б) ксантиноксидаза
в) NADРH-зависимая микросомальная диоксигеназа
г) супероксиддисмутаза
д) глутатионпероксидаза
е) каталаза
12. Для надпеченочных желтух характерно увеличение в плазме крови:
а) уровня неконъюгированного билирубина
б) уровня билирубин-глюкуронидов
в) уровня желчных кислот
г) активности трансаминаз
д) уровня липидов
е) уровня лактата
13. Для печеночной желтухи характерно повышение уровня :
а) неконъюгированного билирубина |
д) стеркобилиногена в кале |
б) билирубин-глюкуронидов |
е) стеркобилиногена в крови |
в) уробилиногена в моче |
ж) желчных кислот в моче |
г) уробилиногена в крови |
|
14. Какой из синдромов поражения печени характеризуется одновременным увеличением активности щелочной фосфатазы и гамма-глутамилтранспептидазы, повышением уровня холестерина, ЛПОНП, ЛПНП и общего билирубина:
а) цитолиза |
г) печеночно-клеточной недостаточности |
б) холестаза |
д) тотальной печеночной недостаточности |
в) воспалительный |
|
15. Какой из синдромов поражения печени характеризуется увеличением активности АЛТ, фруктозо-1 фосфатальдолазы, ЛДГ и содержания билирубина?
а) цитолиза |
г) печеночно-клеточной недостаточности |
б) холестаза |
д) тотальной печеночной недостаточности |
в) воспалительный |
|
16. Какой из синдромов патологии печени характеризуется уменьшением активности холинэстеразы, содержания холестерина, протромбина, и увеличением концентрации билирубина?
а) цитолиза |
г) печеночно-клеточной недостаточности |
б) холестаза |
д) тотальной печеночной недостаточности |
в) воспалительный |
|
17. Какой из синдромов патологии печени характеризуется положительной тимоловой пробой, умеренной гиперпротеинемией, гиперглобулинемией, увеличением уровня фибриногена?
а) цитолиза |
г) печеночно-клеточной недостаточности |
б) холестаза |
д) тотальной печеночной недостаточности |
в) воспалительный |
|
18. Где синтезируется альфа-глобулины и белки гемостаза?
а) костный мозг |
г) лимфоузлы |
б) селезенка |
д) печень |
в) кишечник |
е) тимус |
19. Где синтезируются часть бета- и гамма-глобулины?
а) костный мозг |
г) лимфоузлы |
б) селезенка |
д) печень |
в) кишечник |
е) тимус |
20. При каких состояниях увеличивается активность гамма-глутамилтранспептидазы?
а) гемолиз
б) обтурация желчевыводящих путей
в) отравление барбитуратами
г) острые инфекции
д) хронический гастрит
е) реактивные гепатиты алкоголиков
ж) язвенная болезнь желудка
21. Активность холинэстеразы крови понижается при:
а) хронических гепатитах |
г) остром панкреатите |
б) циррозе печени |
д) механической желтухе |
в) вирусном гепатите |
е) инфаркте миокарда |
22. При патологии каких органов наблюдается снижение уровня факторов свертывающей системы крови?
а) заболевания почек |
д) болезни поджелудочной железы |
б) болезни печени |
е) диарея |
в) заболевания легких |
ж) сердечная недостаточность |
г) болезни суставов |
|
23. При каких заболеваниях становится положительным показатель тимоловой пробы?
а) паренхиматозный гепатит |
д) острая пневмония |
б) острая желтая атрофия печени |
е) острые вирусные инфекции |
в) острый панкреатит |
ж) инфаркт миокарда |
г) гемолитическая анемия |
з) желтушный цирроз печени |
24. Какие изменения характерными для печеночной комы?
а) гипопротеинемия
б) повышение уровня аммиака в крови
в) нарушение синтеза мочевины
г) увеличение количества альбумина
д) уменьшение количества альбумина
е) повышение уровня фибриногена
ж) гипергликемия
з) гипогликемия
25. Синдром холестаза характеризуют такие показатели как:
а) активность трансаминаз
б) активность холинэстеразы
в) активность щелочной фосфатазы
г) уровень билирубина
д) уровень общего белка
е) активность кислой фосфатазы
ж) активность лейцинаминопептидазы (ЛАП)
з) билирубин мочи
и) активность гаммаглутамилтранспептидазы (ГГТП)
Практическая часть:
Лабораторная работа №1. Определение активности щелочной фосфатазы сыворотки крови
ПРИНЦИП МЕТОДА: основан на количественном определении неорганического фосфора образующегося в процессе гидролиза бета-глицерофосфата щелочной фосфатазой сыворотки крови:
Фосфор определяют колориметрическим методом по цветной реакции с молибденовым реактивом (молибдатом аммония) в присутствии восстановителя - аскорбиновой кислоты. Продукт реакции - молибденовый синий дает синее окрашивание раствора, интенсивность окраски которого, определяемая на фотоэлектроколориметре, прямо пропорциональна количеству фосфора в пробе.
За единицу активности щелочной фосфатазы принимают прирост 1 мг фосфора на 100 мл сыворотки. Нормальная активность щелочной фосфатазы сыворотки крови взрослых равна 2-4 ед., а у детей, в связи с интенсивным костеобразованием - 5-15 ед.
ХОД РАБОТЫ. В опытную пробирку вносят по 0,1 мл сыворотки крови. В опытную и в контрольную пробирки - 1 мл щелочного раствора бета-глицерофосфата (pH 9,0). Обе пробирки, опытную и контрольную, инкубируют в термостате в течение 1 часа при температуре 37С. После инкубации пробирки охлаждают, в контрольную пробирку, вносят 0,1 мл сыворотки и 0,9 мл раствора ТХУ (для осаждения белков), а в опытную пробирку прибавляют 0,8 мл раствора ТХУ. Содержимое каждой пробирки фильтруют в цилиндр емкостью 10мл. Осадок на фильтре промывают 1 мл воды. Объем доводят водой до 5 мл и определяют количество неорганического фосфора в опытном и контрольном фильтрате. Для этого в каждый цилиндр приливают по 1 мл молибденового реактива, по 0,5 мл 0,5 %свежеприготовленного раствора аскорбиновой кислоты. Объем проб доводят дистиллированной водой до 10 мл, перемешивают и через 5 минут фотометрируют обе пробы против воды с красным светофильтром в кювете с толщиной слоя 5 мм.
Количество фосфора в пробе определяют по оптической плотности, используя калибровочную кривую.
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Активность щелочной фосфатазы сыворотки крови увеличивается при болезнях печени, например при механической желтухе, в меньшей степени она повышается при гепатитах, циррозах и др. Активность щелочной фосфатазы резко возрастает также при рахите.
ВЫВОД:
ЗАНЯТИЕ 32 ТЕМА: Контрольное занятие по разделу «Биохимия крови, почек и печени»
Контрольные вопросы:
1. Функции крови.
2. Кровь. Основные физико-химические константы крови (pH, pCO2, pO2, плотность, осмолярность). Их изменения при патологии.
3. Плазма крови, ее количественный и качественный состав. Содержание общих липидов, триглицеридов, холестерина, глюкозы, белка, мочевины, мочевой кислоты, натрия, калия, кальция, хлора, магния, бикарбонатов норме и при патологии.
4. Белки плазмы крови, их классификация. Характеристика их отдельных представителей. Методы фракционирования.
5. Изменение белкового спектра при патологии.
6. Основные небелковые компоненты крови. Остаточный азот, его происхождение, диагностическое значение.
7. Понятие о КОС. Принципы регуляции КОС.
8. Механизмы регуляции КОС: физико-химические и физиологические.
9. Классификация нарушений КОС.
10. Причины и механизм развития метаболического ацидоза.
11. Причины и механизм развития респираторного ацидоза.
12. Причины и механизм развития метаболического алкалоза.
13. Причины и механизм развития респираторного алкалоза.
14. Физиологические механизмы коррекции нарушений КОС.
15. Лабораторная диагностика и оценка нарушений КОС (показатели КОС, электролиты крови, pH мочи) на примере метаболического и респираторного ацидоза.
16. Общая характеристика эритроцита. Особенности метаболизма. Минеральный состав эритроцитов.
17. Характеристика мембран эритроцитов. Антиоксидантная защита. Глутатион, его строение, функции.
18. Hb, его строение, свойства.
19. Производные Hb, виды Hb. Аномальные Hb.
20. Сравнительная характеристика Hb и миоглобина.
21. Дыхательная функция крови, ее регуляция. Роль 2,3-ДФГК. Виды гипоксии, аноксия. Нарушение обмена при гипоксии.
22. Обмен хромопротеидов. Переваривание и всасывание.
23. Биосинтез гема (до порфобилиногена), его регуляция.
24. Распад Hb в клетках РЭС.
25. Обмен билирубина в печени.
26. Превращение билирубина в ЖКТ.
27. Лабораторная диагностика желтух (гемолитической, паренхиматозной, обтурационной).
28. Метаболизм железа (всасывание, транспорт в крови, депонирование).
29. Особенности метаболизма лейкоцитов. Биохимическая основа фагоцитоза.
30. Особенности метаболизма тромбоцитов.
31. Строение и особенности кровоснабжения нефрона. Механизм и биохимические основы образования мочи в отдельных частях нефрона: фильтрация, реабсорбция, секреция.
32. Нарушение процессов фильтрации, реабсорбции, секреции и их лабораторная диагностика.
33. Механизм активного транспорта глюкозы, аминокислот.
34. Общие свойства мочи в норме и при патологии (суточное количество, цвет, прозрачность, удельный вес, pH и др.).
35. Органические компоненты мочи (мочевина, мочевая кислота, аминокислоты, креатин, креатинин, гормоны); неорганические (Na+, К+, Ca2+, Мg2+, NH3+, фосфаты, сульфиты, HCO3-) в норме и при патологии.
36. Патологические компоненты мочи (кровь, белок, сахар, билирубин). Причины их появления и диагностическое значение.
37. Клиренс в норме и при патологии. Его диагностическое значение.
38. Гомеостатическая функция почек. Роль почек и механизм регуляции:
- объема циркулирующей крови (ОЦК) и артериального давления
- баланса электролитов
- КОС (механизмы ацидо- и аммониогенеза)
- уровня глюкозы в крови (особенности глюконеогенеза в почках)
- уровня биологически активных веществ
- эритропоэза
39. Метаболическая гетерогенность почечной ткани. Особенности липидного, углеводного и белкового обмена почечной ткани.
40. Нарушение обмена при острой и хронической почечной недостаточности.
41. Почечные камни, их состав, причины и механизм возникновения.
42. Клеточный состав печени. Метаболическая гетерогенность гепатоцитов.
43. Печень как главный орган гомеостаза. Особенности липидного, углеводного и белкового обмена печени.
44. Роль печени в углеводном обмене.
45. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в углеводном обмене.
46. Роль печени в липидном обмене. Механизм развития жировой инфильтрации и дегенерации печени.
47. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в липидном обмене.
48. Роль печени в азотистом обмене. Механизм развития печеночной комы.
49. Функциональные пробы, характеризующие роль печени в азотистом обмене.
50. Роль печени в регуляции КОС.
51. Роль печени в регуляции уровня биологически активных веществ и функциональные пробы, характеризующие эту роль.
52. Роль печени в гормональном гомеостазе - метаболизм гормонов. Общая схема метаболизма гормонов в печени.
53. Основные пути метаболизма ксенобиотиков.
54. Пробы на детоксикацию.
55. Энзимодиагностика заболеваний печени:
- гепатоцеллюлярных
- холестаза