В программу проведения исследований входили:

• Визуальная диагностика состояния кожи лица и тела испытуемых, сбор аллергологического и дерматологического анамнеза.

• Определение состояния защитно-барьерной функции кожных покровов до и после курса применения исследуемого косметического продукта по следующим параметрам:

• рН поверхности кожи;

• содержание кожного сала;

• гидратантность;

• трансэпидермальная потеря воды ТЭПВ (TEWL).

• Аллергологические методы in vivo: постановка капельных кожных проб для определения степени выраженности раздражающего и сенсибилизирующего действий.

• Исследование морфологических изменений кожных покровов перед началом и после курса применения исследуемого косметического средства:

• протяженности слоев кожи в исследуемом поле;

• минимальной, максимальной и средней толщины эпидермиса и дермы;

• эхогенности дермы.

Методы исследования и техническое обеспечение :

1. Диагностика ультрафиолетовым светом осуществлялась с помощью лампы, оснащенной лупой («INTO-Comed GmbH», Германия). Прибор позволяет дифференцировать состояние кожи по характерному цвету, вызванному феноменом люминесценции. Лупа дает увеличение в 5 диоптрий. Источник света для лампы UV состоит из четырех лучей паров ртути низкого давления, излучающих свет в диапазоне длины волн 320 - 400 нм. Этот свет обычным глазом воспринимается как ультрафиолетовый, но на коже вызывает феномен люминесценции. Флуоресценция тем интенсивней, чем более истончена кожа.

2. Функциональные показатели кожи (рН, сальность, влажность) анализировались с помощью аппарата «Skin-O-Mat» («Courage+Khazaka», Германия). Измерения проводились при температуре 20С и влажности 40 - 60%.

2.1. Уровень рН измерялся с помощью стеклянных электродов. Метод заключается в следующем: при соприкосновении электродов с поверхностью кожи между ней и мембраной происходит обмен ионами водорода, после чего электрод приобретает свойства водородного электрода. Между измеряемым участком кожи и остальной ее поверхностью возникает разность потенциалов, величина которой определяется активностью ионов водорода на поверхности кожи и ее температурой.

2.2. Содержание липидов на поверхности кожи (мкг/см2) фиксировалось с помощью фотометрии жировых пятен: проводилось измерение фотоэлементом степени проникновения света через полимер, то есть степени адсорбции кожного сала.

2.3. Уровень влажности поверхностных слоев кожи определялся по корнеометрическому методу, который основан на измерении емкости. Известно, что диэлектрическая константа воды равна 81, большинства других веществ - меньше 7. Измерение емкости показывает различие данного параметра в разных образцах, в зависимости от содержания воды в этих образцах с помощью определения диэлектрических свойств поверхностного эпидермального слоя кожи.

Исследование гидратантности поверхностных слоёв кожи тела проводилось в 3 этапа:

• на 1-м этапе устанавливался исходный уровень гидратантности кожных покровов;

• на 2-м - уровень гидратантности в течение 24 часов после первого однократного применения EGF - «GeneTime» (через 1, 6, 12 и 24 часа);

• на 3-м - уровень гидратантности в течение всего срока применения EGF - «GeneTime» и по его окончании.

2.4. Измерение трансэпидермальной потери воды ТЭПВ (TEWL) осуществлялось с помощью прибора «TEWAMETR TM 210» («Courage+ Khazaka», Германия). ТЭПВ вычисляется по закону диффузии Фика по градиенту плотности водяных паров. В измерительной ячейке, которая прикладывается к коже, имеется два датчика, расположенных один под другим. Они производят замеры давления водяных паров в различных точках над поверхностью кожи и передают сигнал в цифровой анализатор, рассчитывающий, какое количество воды испарилось за единицу времени. С помощью эвапориметра измеряется количество воды, которое испаряется пассивно через роговой слой. ТЭПВ – важнейший и очень чувствительный показатель состояния кожного барьера, возрастающий при малейшем его повреждении. Запатентованное «ноухау» датчика Tewameter® – функция предварительного нагрева датчиков - позволяет получить точный и воспроизводимый результат за более короткое время, а также обеспечивает температурную стабильность датчиков. Диапазон значений: от 0 до 320; единицы измерений: грамм/час/м2; точность: ±0,5 г/ч/м2; диаметр измерительной части: 1 см; режимы измерений: TEWL открытая ячейка, TEWL закрытая ячейка, SSWL.

3. Аллергологические методы in vivo: каждому добровольцу группы исследования проводилось предварительное кожное тестирование капельным методом по схеме, с последующим чтением результатов (через 24, 48, 72 часа), которые определялись путем опроса участников о субъективных ощущениях после применения средства, клинического осмотра кожи на месте постановки проб.

4. Морфологические изменения исследовались с помощью высокочастотного ультразвукового прибора «DermaScan C Ver.3» («Cortex Technology», Дания) с частотой эхосигнала 20 мГц методом двухмерного ультразвукового сканирования. После получения изображения эпидермиса и дермы математическим путем рассчитывался ряд количественных показателей (протяженность слоев кожи в исследуемом поле, толщина эпидермиса и дермы, эхогенность дермы) и проводился анализ измерений.