Механические методы стерилизации

Фильтрование применяют в тех случаях, когда повышенная температура может резко повлиять на качество стерилизуемых материалов (питательные среды, сыворотки, антибиотики), а также для очистки бактериальных токсинов, фагов и различных продуктов жизнедеятельности бактерий. Как окончательный процесс он менее надежен, чем стерилизация паром, из-за большой вероятности прохождения микроорганизмов через фильтры.

Фильтры задерживают микроорганизмы благодаря поровой структуре их материала. Существуют два основных типа фильтров - глубинные и мембранные.

Глубинные фильтры состоят из волокнистых или гранулированных материалов, которые спрессованы, свиты или связаны в лабиринт проточных каналов. Частицы задерживаются в них в результате адсорбции и механического захвата в материале фильтра. Фильтры Шамберлана изготовляют из каолина с примесью песка и кварца. Они имеют вид свечей с различными размерами пор и обозначаются L1, L2, L3 и т.д. Следует запомнить, что фильтры L5 – L13 бактерий не пропускают. Для фильтра Беркефельда используют инфузорную землю. Размеры пор в порядке увеличения обозначаются буквами W, N, V.

Мембранные фильтры имеют непрерывную структуру, получают их из нитроклетчатки, и захват ими частиц определяется в основном размером пор. В зависимости от размера последних мембранные фильтры обозначают номерами 1-5 (диаметры пор 350-1200 им).

Фильтрацию материалов производят под вакуумом, который создают вакуумным или водоструйным насосами. Фильтры Шамберлана и Беркефельда соединяют с вакуумной колбой Бунзена резиновыми трубками и перед фильтрацией стерилизуют в паровом стерилизаторе при 120°С. Мембранные фильтры после предварительной стерилизации кипячением вставляют в аппарат Зейтца, состоящий из асбестовой пластинки, вмонтированной в металлическую воронку, которую, через резиновую пробку присоединяют к колбе Бунзепа.

Методы дезинфекции

Дезинфекция (от лат. infectia - инфекция и франц. отрицательной приставки des), в отличие от стерилизации, означает уничтожение во внешней среде только возбудителей инфекционных заболеваний. В зависимости от характера действующего агента различают физический и химический способы дезинфекции.

Физический метод сводится к механической очистке объектов (орошение, мытье, чистка, вытряхивание и выколачивание, влажная уборка, вентиляция помещений). Он не позволяет достигнуть полного обеззараживания обрабатываемых объектов. Однако физические способы дезинфекции приводят к значительному уменьшению числа патогенных микроорганизмов во внешней среде.

В микробиологической практике широкое применение нашли способы химической дезинфекции (рук и рабочего места, отработанного патологического материала, градуированных и пастеровских пипеток, стеклянных шпателей, стекол). Вещества, предназначенные для дезинфекции, должны обладать рядом свойств: 1) хорошо растворяться в воде; 2) в короткие сроки проявлять бактерицидное действие; 3) не утрачивать обеззараживающих свойств при наличии органических примесей в среде, подлежащей обработке; 4)не оказывать токсического действия на людей и животных; 5) не портить обеззараживаемые объекты; 6) достаточно долго сохранять бактерицидные свойства при хранении в сухом виде или растворе, а также при контакте с обеззараживаемыми объектами; 7) быть дешевыми и удобными при транспортировке. Их подразделяют на несколько групп: галоиды и хлорсодержащне вещества (0,25-10% осветленные растворы хлорной извести; 0.1-15% водные растворы двутретьосновной соли гипохлорита кальция - ДТСГК; 1-20 % водные растворы хлорамина), окислители (1-10% растворы перекиси водорода), фенолы и их производные (3-5 % растворы лизола, карболовой кислоты или фенола), соли тяжелых металлов (мертиолят натрия, сулема), соединения, применяемые в газообразном состоянии (40% водный раствор формальдегида, окись этилена, бромистый метил).

Дезинфицирующее вещество, его концентрацию, а также продолжительность срока дезинфекции определяют в зависимости от конкретных условий. В основном учитывают устойчивость обеззараживаемых микробов, степень предполагаемого загрязнения, состав и консистенцию материала, в котором они находятся. В процессе обеззараживания необходимо обеспечить возможность наилучшего перемешивания, чтобы создать наиболее тесный контакт дезинфицирующего вещества с обеззараживаемым материалом.

В природе микроорганизмы существуют в смешанной популяции. Для изучения свойств микроорганизмов, определения их систематического положения необходимо прежде всего изолировать отдельные виды микробов и вырастить их в виде так называемых "чистых культур", а затем идентифицировать, т.е. установить соответствие выделенных микроорганизмов видам, описанным в специальных определителях.

Под понятием "чистая культура" подразумевается масса клеток, состоящая из микроорганизмов, принадлежащих одному виду и полученных как потомство одной клетки (см. схему 1).

Штамм - культура бактерий одного вида, выделенная из разных источников в разное время.

Вид - совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение и генотип, сходных по морфологическим и биологическим свойствам.

Культивировать микроорганизмы можно лишь при создании определенных условий для их жизнедеятельности. Искусственные условия, которые исключили бы загрязнение культуры другими видами, можно создать в пробирке, колбе или чашке Петри.

6