- •Тема 1. Строение и функции белков.
- •Проведение анализа
- •Тема 1. Ны места концентрации белков разлиСтроение и функции белков Лабораторная работа № 2
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Тема 2. Ферменты
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Тема 3. Биосинтез нуклеиновых кислот и
- •Проведение анализа
- •Тема 4. Введение в обмен веществ.
- •Лабораторная работа № 5
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Тема 5. Химия и обмен углеводов
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Тема 6. Химия и обмен липидов
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Тема 7. Белковый обмен
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Коэффициент Де Ритиса
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Тема 8. Обмен сложных белков
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Тема 9. Биохимия крови и мочи
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Проведение анализа
- •Тема 10. Гормональная регуляция метаболизма
- •Секундомер;
- •Проведение анализа
- •Учет результатов
- •Тема 11. Биохимия слюны
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови.
- •Проведение анализа
- •Тема 12. Биохимия костной ткани
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
- •Секундомер;
- •Автоматические пипетки на 20 мкл и 1000 мкл;
- •Сыворотка крови;
- •Проведение анализа
Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 490-510 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 25-37С;
Секундомер;
Автоматические пипетки на 50 мкл, 250 мкл и 1000 мкл;
Сыворотка крови/ суточная моча. Мочу предварительно развести деионизированной водой в соотношении 1:50. Кроме сыворотки можно использовать гепаринизированную плазму;
Реагент 1 (гидроксид натрия 160 ммоль/л);
Реагент 2 ( пикриновая кислота 4,0 ммоль/л);
Стандарт (раствор креатинина 177 мкмоль/л);
Дистиллированная вода.
Проведение анализа
Добавить в кювету |
Опытная проба |
Холостая проба |
Стандартная проба |
1. Образец (например, сыворотка) |
50 мкл |
-- |
-- |
2. Стандарт |
-- |
-- |
50 мкл |
3. Дистиллирован-ная вода |
-- |
50 мкл |
-- |
4. Реагент 1. |
1 мл |
1 мл |
1 мл |
Перемешать содержимое пробирок |
|||
5. Реагент 2 |
250 мкл |
250 мкл |
250 мкл |
Перемешать содержимое пробирки и включить секундомер. Точно через 60 секунд измерить оптическую плотность опытной и стандартной проб против холостой пробы при длине волны 490-510 нм (А1). Повторить измерение через 60 секунд (А2). Рассчитать изменение оптической плотности за минуту для опытной и стандартной проб:
Аоп = А2оп – А1оп;
Аст = А2ст – А1ст.
Расчет
Расчет по стандарту концентрации креатинина в сыворотке (плазме) проводят по формуле:
Аоп С (мкмоль/л) = ----------- Сст, Аст |
где Аоп / ст – изменение оптической плотности в минуту;
Сст – концентрация стандарта.
Расчет по стандарту концентрации креатинина в суточной моче проводят по формуле:
Аоп С (ммоль/л) = ----------- Сст 50, Аст |
где Аоп / ст – изменение оптической плотности в минуту;
Сст – концентрация стандарта;
50 – коэффициент разведения.
Если концентрация креатинина превышает 1,33 ммоль/л (точка вне зоны линейности калибровочного графика), анализируемый образец (сыворотка или моча) следует развести 1:1 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат расчета умножить на 2.
Нельзя анализировать иктеричные образцы, так как билирубин искажает результаты измерений.
Клинико-диагностическое значение: Определение концентрации креатинина проводят для исследования функции почек. При значительном ухудшении функции почек концентрация креатинина в сыворотке увеличивается.
У здоровых людей концентрация креатинина в сыворотке относительно постоянна и мало зависит от пола, возраста, диеты, так как образование креатинина в мышцах как конечного продукта метаболизма относительно постоянно.
Клиренс эндогенного креатинина используют в качестве меры клубочковой фильтрации.