Разбавители спермы жеребца, хряка, барана

Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы барана в течение 24 ч при температуре 2 - 5 °C.

СРЕДА ГЛЮКОЗО-ЦИТРАТНО-ЖЕЛТОЧНАЯ

Глюкоза медицинская безводная, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Спермосан-3, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.

Синтетические среды для разбавления и хранения спермы хряка в течение 3 суток при температуре 16 - 20 °C.

СРЕДА ГЛЮКОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНО-СУЛЬФАТНАЯ (ГХЦС) (ГОСТ 17637-72)

Глюкоза медицинская безводная, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Аммоний сернокислый очищенный, Спермосан-3, Вода дистиллированная.

СРЕДА ГЛЮКОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНАЯ (ГХЦ)

Глюкоза медицинская безводная, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Спермосан-3, Вода дистиллированная,

ГЛЮКОЗО-СОЛЕВОЙ РАСТВОР Применяется с целью увеличения объема спермы без ее хранения.

Глюкоза медицинская безводная, Натрий хлористый, Вода дистиллированная.

Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы жеребца в течение 48 ч при температуре 2 - 5 °C.

СРЕДА ЛАКТОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНО-ЖЕЛТОЧНАЯ (ЛХЦЖ)

Лактоза, Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Спермосан-3, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.

Синтетическая среда лактозо-хелато-цитратно-желточная (ЛХЦЖ) для замораживания спермы жеребца.

Лактоза, Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятиводный, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Желток куриных яиц, Глицерин, Спермосан-3, Вода дистиллированная.

Биоконтроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости

Биологический контроль сред. Качество синтетической среды определяют биологическим путем - по длительности выжива-емости спермиев при различных разбавлениях спермы, сохраняемой при температуре 2 - 5 °C. Необходимо проводить био-контроль каждой вновь поступившей серии антибиотиков, сульфаниламидов, глюкозы, цитрата и других компонентов, вхо-дящих в состав синтетической среды. Биоконтроль позволяет установить оптимальные и токсичные степени разбавления спермы. Оптимальную степень разбавления спермы определяют по наибольшему показателю абсолютной выживаемости спермиев.

Определение абсолютного показателя переживаемости и биоконтроль искусственных сред

Абсолютный показатель переживаемости – показатель качества спермы, который указывает на срок сохранения активности половых клеток в более или менее благоприятных условиях. Это бывает обусловлено рядом факторов:

1. Запасом энергетического материала.

2. Скоростью обезвреживания продуктов метаболизма.

3. Качеством липопротеиновой оболочки.

Существует прямая зависимость между величиной показателя переживаемости и оплодотворяющей способностью.

Обозначается буквой S, выражается в условных единицах.

Методика определения показателя переживаемости (Соколовская)

1. Берут 11 сухих стерильных пробирок ёмкостью 2 мл.

2. Готовят искусственную среду.

3. В 1 пробирку набирают 0,5 мл оцениваемой спермы – контроль.

4. Во 2-11 пробирки вносят 0,5 мл разбавителя.

5. Во 2 пробирку вносят 0,5 мл испытуемой спермы, тщательно перемешивают, набирают 0,5 мл и переносят в пробирку №3, из 3 в 4… из 11 0,5 мл выливают.

6. Получают разбавления от 0 до 1024 раз.

S = ∑at, где а – средняя активность за промежуток времени, t – промежуток времени между исследованиями.

t = (T_n+1– T_n-1)/2.

Полученные показатели заносятся в таблицу:

А – активность сперматозоидов в момент исследования

Нормативы: для жвачных 1400, для хряка 900, для жеребца 400.

Стандартом для искусственных сред, которые применяются в биотехнике разбавления, являются оптимум разбавления – 8-16 раз, максимум разбавления 256 раз.