- •Вопрос №1 «история вирусологии. Роль вирусов в инфекционной патологии животных человека».
- •Вопрос №2 «предмет и задачи общей и частной ветеринарной вирусологии. История открытия вирусов. Достижения отечественной вирусологии».
- •Вопрос №3 «принципы современной классификации вирусов, основные группы вирусов».
- •Вопрос №4 «химически состав и физическая структура вирусов. Понятие о вирионе, капсиде, капсомере. Тип симметрии.
- •Химический состав вирусов.
- •Особенности вирусных белков:
- •Вопрос №5 «устойчивость вирусов к физико-химическим факторам. Практическое испольование этих свойств».
- •Вопрос №6 «вирусные нуклеиновые кислоты. Их разновидности, структуры, основные свойства.
- •1.Линейная односпиральная.2.Линейная фрагментированная.3.Кольцевая односпиральная.5.Линейная двуспиральная фрагментированная.
- •Вопрос №7 «белки вирусов, их особенности (характеристика свойств нейраминидаз и антигенов миксовирусов)».
- •Вопрос №8 «периоды и этапы репродукции вирусов. Типы взаимодействия».
- •Вопрос №9 «особенности биосинтеза днк-содержащих вирусов. Понятие транскрипции и трансляции».
- •Вопрос №10 «типы взаимодействия, основные исходы взаимодействия вируса с клеткой».
- •Вопрос №13 «правила взятия патматериала от больных и павших животных при подозрении на вирусные болезни. Транспортировка и подготовка его для вирусологических исследований.
- •Вопрос №14 «методы консервирования вирусов и их практическое значение».
- •Вопрос №15 «правила работы в вирусологической лаборатории. Техника безопастности при работе с вирусосодержащим материалом».
- •Вопрос №16 «схема лабораторной диагностики вирусных инфекций».
- •Вопрос №17 «клинико-эпизоотологическая диагностика вирусных болезней животных, сущность, значение».
- •Вопрос №18 «методы обнаружения вируса в патматериале».
- •Вопрос №23, 25 «ртга и ее использование в вирусологии. Достоинства и недостатки».
- •Вопрос №26 «рдп. Иммунологическая основа меода, постановка и учет результатов. Достоинства и недостатки».
- •Вопрос №27 «рск. Иммунологическая основа и характеристика компонентов реакции».
- •Вопрос №28 «титр вирусов и принципы его определения в единицах 50%-ого инфекционного действия».
- •Вопрос №29 «биологическая характеристика вируса ящура. Принцип диагностики»
- •Вопрос №32 «современная классификация иммунитета. Структура ат характеристика различных классов иммуноглобулинов и их строение».
- •Вопрос №33 «особенности противовирусного иммунитета».
- •Вопрос №34 «роль лимфоидных клеток в противовирусном иммунитете (характеристика т и в лимфоцитов)».
- •Вопрос №35 «роль клеточных факторов в противовирусном иммунтитете».
- •Вопрос №36 «роль гуморальных факторов в противовирусном иммунитете»
- •Вопрос №37 «противовирусные ат, их свойства, биологическая роль, методы обнаружения и титрования».
- •Вопрос №38 «интерферон и его роль в противовирусном иммунитете».
- •Вопрос №39 «принцип получения бактериофагов. Определение активности и практическое использование фагов».
- •Вопрос №40 «пассивная специфическая профилактика вирусных болезенй. Принцип получения».
- •Вопрос №41 «специфическая профилактика вирусных болезней. Виды вакцин и методы их введения».
- •Вопрос №42 «инактивированные противовирусные вакцины, их получение, свойства, применение, отличие от живых вакцин».
- •Вопрос №43 «факторы противовирусного иммунитета, их характеристика».
- •Вопрос №44 «живые противовирусные вакцины, их свойства, применение и отличия от инактивированных вакцин».
- •Вопрос №45 «бактериофаги, их значение и основные свойства».
- •Вопрос №46 «лабораторыне животные, цели и методы их использования в вирусологии».
- •Вопрос №47 «строение развивающегося куриного эмбриона. Основные задачи, решаемые методом заражения кэ и его преимущества перед культивированием вирусов на лабораторных животных.
- •Вопрос №48 «виды культур клеток и их использование в вирусологии. Краткая характеристика каждого вида».
- •Вопрос №49 « первично-трипсинизированные культуры клеток. Их достоинсва и недостатки. Применение в вирусологических исследованиях».
- •Вопрос №50 «питательные среды и растворы, используемые в вирусовлогии. Требования к посуде для культивирования кк, ее обработка».
- •Вопрос №51 «принцип заражения культур клеток вируссодержащим материалом. Индикация вирусов в культуре клеток».
- •Вопрос №52 «методы обнаружения вирионов вирусов и вирусных телец-включений, их практическе значение».
Вопрос №49 « первично-трипсинизированные культуры клеток. Их достоинсва и недостатки. Применение в вирусологических исследованиях».
ПТКК – клетки, полученные непосредственно из органов или тканей организма, растущие in vitro в один слой. КК можно получить практически из любого органа или ткани человека или животного. Лучше это удается сделать из эмбриональных органов, т.к. клетки эмбрионов обладают более высокой потенцией роста. Чаще всего для получения их используют почки, легкие, кожу, тимус, тестикулы. Для получения первичных клеток от здорового животного не позднее 2-3 часов после убоя берут соответствующие органы или ткани, измельчают, обрабатывают трипсином, панкреатином, коллагеназой. Ферменты разрушают межклеточные вещества, полученные при этом отдельные клетки суспендируют в питательной среде и культивируют на внутренней поверхности пробирок или матрасов в термостате при 37С. Клетки прикрепляются к стеклу и начинают делится. На стекле формируется слой толщиной в одну клетку, обычно через 3-5 дней. Питательную среду меняют по мере загрязнения ее продуктами жизнедеятельности клеток. Монослой сохранят жизнеспособность в течение 7-21 дня. При культивировании вирусов в КК удается получать препараты с высоким титром вируса, что важно при получении АГ и вакцин. С помощью метода КК были решены некоторые теоретические вопросы – о взаимодействии вируса с клеткой, месте репродукции вирусов, механизме антивирусной иммунизации. В настоящее время КК применяют для выделения вирусов из патматериала, их индикации, идентификации, для постановки реакции нейтрализации, определения титра вирусов, для приготовления диагностических АГ и вакцин, в качестве тест – объектов в реакции нейтрализации.
Вопрос №50 «питательные среды и растворы, используемые в вирусовлогии. Требования к посуде для культивирования кк, ее обработка».
Наиболее широко используют при работе с КК растворы Хенкса и Эрла, которые готовят на бидистиллированной воде с добавлением различных солей и глюкозы. Эти сбалансированные солевые растворы используют для приготовления всех питательных сред, т.к. они обеспечивают сохранение рН, осмотическое давление в клетках и соответствующую концентрацию необходимых неорганических веществ. Их же применяют для отмывания от ростовых сред, разведений вируса и другого. При культивировании клеток применяют диспергирующие растворы трипсина и версена. Раствор трипсина используют для разделения кусочков тканей на отдельные клетки и для снятия слоя клеток со стекла. Раствор версена – используют для снятия клеток со стекла. Питательные среды (далее ПС) – различают: 1)естественные среды, которые состоят из смеси солевого раствора, сыворотки крови, тканевого экстракта, коровьей амниотической жидкости и др. Количество компонентов варьирует. Используют их редко. 2)искусственные ПС – ферментативные гидролизаты различных белковых продуктов: гидролизат лактальбумина, мышечный ферментативный гидролизат и др. Из синтетических сред наиболее широкое применение нашли среда 199 и среда Игла. Во все питательные среды и некоторые солевые растворы добавляют индикатор феноловый красный для определения концентрации водородных ионов. Для уничтожения микрофлоры перед использованием в среды добавляют АБ: пенициллин и стрептомицин по 100ЕД\мл. Все ПС делят на 2 группы: ростовые – обеспечивают жизнь и размножение клеток; поддерживающие – обеспечивающие жизнедеятельность клеток, но не их размножение (они не содержат сыворотки крови). Посуда – качество посуды имеет важное значение для успешного культивирования клеток вне организма. Она д\б стерильной, обезжиренной, не обладать токсическим действием. Для культивирования клеток используют пробирки, матрасы на 50, 100, 250, 500, 1000, 1500 мл, роллерные колбы на 500, 1000, 2000 мл, различные пипетки, флаконы для ПС и растворов, колбы различной вместимости. Обработка стеклянной посуды состоит из нескольких этапов: 1)инфицированную посуду погружают в 2-3% раствор NaOH на 5-6 часов; 2) споласкивают в 3-4 сменах водопроводной воды; 3) замачивают в 0,3-0,5% растворе порошка; 4) тщательно моют с помощью ерша в теплом растворе порошка; 5) споласкивают в нескольких сменах водопроводной воды; 6)споласкивают в дистиллированной воде, содержащей 0,5% HCl; 7)споласкивают 4-5 раз водопроводной водой и в 3 сменах дистиллированной воды; 8) сушат в сушильном шкафу; 9)монтируют и стерилизуют в сушильном шкафу или автоклавируют.