4.2.2.Спектры действия при постоянной величине фотобиологического эффекта.

В этом случае облучение объекта проводят при каждой длине волны действующего излучения такой его дозой, которая вызывает фотоэффект определенной, постоянной, величины. Обозначим эту величину фотоэффекта _с. Вообще говоря, _с может зависеть от С_ап нелинейно. Если поглощение объекта невелико, можно выразить зависимость _с от С_ап в следующем виде:

(131)

В выражении (131) величина  может принимать любые значения. Из этого выражения можно вычислить зависимость между дозой облучения Е и параметром G₂:

(132)

Величина G₂ в выражении (132) будет равна

(133)

Важно, что значение G₂ не зависит от длины волны действующего излучения. С учетом этого и вида выражения (132), при построении спектров действия фотобиологических эффектов в варианте «при постоянной величине фотоэффекта» удобнее представлять их не в виде Е=f(), а в форме 1/Е=f().

Если же поглощение (В=1-Т) велико, доза облучения при каждой длине волны в области измерения спектра действия должна быть небольшой, чтобы выполнялись условия, оговоренные при получении выражения (130). При выполнении этого условия спектр действия изучаемого фотоэффекта будет повторять зависимость В=f():

(134)

Величина G₃ в выражении (134) равна и от длины волны действующего излучения не зависит.

Для выяснения по форме полученного спектра действия фотоэффекта природы молекул - первичных акцепторов фотонов необходимо сопоставить этот спектр с зависимостями =f() и B=f() для каждой из хромофорных молекул, входящих в состав исследуемого объекта. Если для какой-либо из подобных молекул объекта выявляется близость указанных зависимостей с измеренным спектром действия, высока вероятность того, что именно она и является первичным акцептором фотонов, запускающей каскад событий, приводящих к исследуемому фотоэффекту.

Следует, впрочем, обратить внимание на то, что в сложных, многокомпонентных, биологических объектах реальные спектры действия того или иного фотоэффекта могут значительно отличаться от зависимостей =f() и B=f() молекул - первичных акцепторов квантов действующего излучения. Это особенно часто наблюдается, если имеется экранировка первичного акцептора фотонов другими хромофорными молекулами образца, поглощающими в той же спектральной области. Возможно это и в том случае, если ответственный за дальнейшее развитие продукт фотопревращения молекулы-акцептора квантов сам фотохимически активен. Можно показать, что для объекта, в котором поглощение экранирующих молекулу-акцептор квантов соединений значительно больше поглощения собственно этой молекулы будет выполняться следующая зависимость:

(135)

В этом выражении параметр L зависит от длины волны действующего излучения. Он, собственно, и является причиной появления различий между спектром действия и зависимостями =f() и B=f(). Однако, если поглощение объекта не очень велико (его оптическая плотность много меньше 1), форма спектра действия может и совпасть с формой зависимости =f().