borisenko_vet_san_expert

121

сальнику, брыжейке, серозным покровам брюшной стенки, серозном покрове печени.

Количество их может достигать до тысячи. Цистицерки представляют собой пузырек в диаметре 6-12 мм, округлой формы, заполненный прозрачной жидкостью, внутри которого находится головка с двойным венчиком из крючьев и 4 присоски.

П о с л е у б о й н а я д и а г н о с т и к а. при осмотре внутрен-

них органов – печени, брыжейки, серозного покрова брюшной стенки обнаруживаются на поверхности цистицерки. Тушки кроликов при этом, как правило, имеют плохую упитанность, мышечная ткань гидремична, иногда желтушна, с неприятным запахом.

С а н и т а р н а я о ц е н к а. При поражении серозных покровов отдельных органов их бракуют и направляют на техническую утилизацию, а тушки выпускают на пищевые цели без ограничения. При поражении серозных покровов тушки при большом количестве цистицерков или плохой упитанности тушек – их утилизируют.

Трихинеллез. Антропозоонозная болезнь всеядных и плотоядных животных, протекает остро или хронически с ярко выраженными аллергическими явлениями, вызывается нематодами: Trichinella spiralis (свиная трихинелла, T. nativa (выделена от хищных животных Евразии), T. nelsoni (выделена от хищных Африки) и T. pseudospiralis (выделена от енота-полоскуна из Дагестана). T. pseudospiralis в мышцах не инкапсулируется; она полностью завершает свое развитие в организме птиц (утки и др.).

Взрослые трихинеллы паразитируют в тонком отделе кишечника животных и человека, а личинки – только в поперечно-полосатых мышцах этих же организмов.

Из домашних животных трихинеллезом болеют свиньи, собаки, кошки. В естественных условиях возможно заражение многих диких животных – медведей, диких кабанов, барсуков, сурков, лисиц, волков, песцов, куниц, хорьков, норок, а также грызунов. Зарегистрирован трихинеллез и у морских млекопитающих Крайнего Севера (белухи, моржи, тюлени). Зараженные животные – источник этой опасной инвазии.

Различают две формы паразита: кишечную (половозрелую) и мышечную (личиночную). Обе формы паразитируют у одного хозяина. Личинки трихинелл развиваются только в поперечно-полосатых мышцах, образуя вокруг себя капсулу. В гладких мышцах и в мышце

122

сердца личинки трихинелл не развиваются. Но они могут локализоваться в мышечных прослойках шпика и сохраняться жизнеспособными даже в том случае, если мышечные волокна подвергались атрофии.

Инкапсулированные мышечные трихинеллы – это спиралеобразно свернутые паразиты, заключенные в полости, окруженные капсулой. Форма капсулы лимонообразная, бутылкообразная, овальная или круглая (у диких животных). Полость капсулы наполнена прозрачной жидкостью, и в ней помещается, как правило, один паразит, реже два и более. Трихинеллы хорошо видны, если раздавленные мышечные срезы рассматривать при увеличении в 50-70 раз.

Наиболее часто поражаются ножки диафрагмы, затем мышцы диафрагмы, языка, жевательные, гортани, шейные, межреберные и брюшные. В одной и той же мышце наряду с сильно зараженными встречаются места, свободные от трихинелл. В большей степени бывают поражены мышечные волокна вблизи сухожилий.

П о с л е у б о й н а я д и а г н о с т и к а. С целью диагностики проводят послеубойную трихинеллоскопию туш свиней и мяса, используемых в пищу диких животных (дикий кабан, медведь и др.).

Методические указания по лабораторной диагностике трихинеллеза животных утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России от 28 октября 1998 года.

1.Общее положение

1.1.Трихинеллез – опасный антропозоогельминтоз, вызывае-

мый трихинеллами двух видов: Trichinella spiralis и Trichinella pseudospiralis, протекает остро и хронически. Весь цикл развития обоих видов проходит в организме одного хозяина – половозрелая стадия локализуется в кишечнике, личиночная – в мышечной ткани.

1.2.Трихинеллезом болеют свиньи, кабаны, медведи, другие всеядные и плотоядные (собаки, волки, лисы), морские млекопитающие (киты, тюлени, моржи), насекомоядные, грызуны и другие животные.

1.3.Обязательному исследованию на трихинеллез подлежат туши, полутуши, четвертины свиней (кроме поросят до 3-недельного возраста), кабанов, барсуков, медведей, всеядных и плотоядных животных, а также нутрий.

123

1.4. При послеубойной диагностике трихинеллеза используют два метода исследования: микроскопический (компрессорный) и биохимический (метод переваривания), прижизненную диагностику осуществляют методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Мясо и субпродукты животных (имеющие мышечную ткань) исследуют микроскопическим или биохимическим методами.

Шпик (с наличием мышечных прослоек) исследуют только микроскопическим методом.

Исследование копченостей, импортной свинины в блоках (при выборочном контроле) и других видов продукции проводят только биохимическим методом

Диагноз на трихинеллез ставят на основании результатов лабораторных исследований.

2. Взятие и пересылка материала для исследования.

2.1.Для исследования отбираются пробы из ножек диафрагмы (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие), при их отсутствии – части межреберных, шейных, жевательных, поясничных, икроножных мышц, сгибателей и разгибателей пясти, а также мышцы языка, пищевода и гортани, от туш морских млекопитающих – мышцы кончика языка и глаза.

Масса пробы от каждой группы мышц должна быть не менее 5 г, а общая масса пробы от одного животного должна составлять не менее 25 г.

2.2.Пробы шпика соленого, копченого (при наличии прирези или прослоек мышечной ткани) отбирают от каждого куска, масса пробы должна быть не менее 25 г.

2.3.Пробы копченостей отбирают от 3% упаковочных единиц, делая по 10-15 выемок из каждой упаковочной единицы, из которых составляют объединенную пробу.

2.4.Субпродукты свиные (языки, головы, ножки, хвосты) при отсутствии ветеринарного подтверждения об их происхождении от туш, подвергнутых трихинеллоскопии, исследуют следующим образом: от 3% упаковочных единиц берут по 10-15 выемок из каждой и делают объединенную пробу массой не менее 25 г.

2.5.Импортную свинину (в тушах, полутушах) исследуют не менее 10% от партии мяса, пробы берут из остатков ножек диафрагмы

124

или межреберных мышц. Масса пробы мышц от туши, полутуши должна составлять не менее 1 г, общая масса пробы для исследования

–не менее 25 г.

2.6.Импортную свинину в блоках исследуют не менее 1% от партии мясных блоков, пробы отбирают по 25 выемок (1 г каждая) от блока общей массой не менее 25 г.

2.7.Пробы упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора.

3. Микроскопическое исследование (компрессорная трихинеллоскопия)

3.1.При исследовании мяса и мясопродуктов количество срезов мышечной ткани (от 24 до 96) определяют в зависимости от эпизоотической и эпидемиологичекой ситуации территории в соответствии с методическими указаниями «Профилактика гельминтозов, передающихся через мясо и мясные продукты», утвержденными Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 23.09.96 № 13-7-37 (включенными в СанПиН 3.2.569-96 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», утвержденные Госкомсанэпиднадзором России 31.10.96 № 43.

3.2.Из кусочков мышц изогнутыми ножницами по ходу мышечных волокон делают 24 среза величиной с овсяное зерно, которые помещают в середину клеточки компрессориума, накрывают вторым стеклом и завинчивают винты, раздавливая срезы так, чтобы они стали прозрачными и удобными для их качественного просмотра.

3.3.Срезы исследуют под малым увеличением (8х10) с помощью соответствующих приборов для трихинеллоскопии.

3.4.При исследовании шпика из прослоек мышечной ткани (каждого куска) делают 24 среза, помещают в чашки Петри с 0,5 см³ раствора (1%-ный раствор фуксина в 5%-ном растворе едкого натра) на 5-8 мин. Затем срезы размещают в компрессориум и просматривают согласно п.п.3.3.

3.5.При просмотре срезов обнаруживают капсулы с личинками трихинелл, которые могут иметь лимоновидную или округлую формы, внутри капсул расположены одна или несколько спирально свернутых личинок.

Таблица 1 Объемы и методы исследования мяса и мясопродуктов на наличие личинок трихинелл в зависимости от эпидемиолого-эпизоотической ситуации территории выхода продукции

		Показатели заболеваемости (пора-		Объемы и методы
№	Эпидемиологические зоны	женности) в синантропных очагах		исследования
	(территории) выхода мяса		пораженность	компрессор-	переваривание
п/п		заболеваемость		ная	в искусствен-
	(по трихинеллезу)		домашних
		человека		трихинелло-	ном желудоч-
			свиней
				скопия	ном соке
1.	Благополучная	Отсутствует в	Отсутствует в по-	24 среза	1,0 г	125
		последние 10
		лет	следние 10 лет	(0,3 г)
2.	Угрожаемая	Отсутствует в	Отсутствует в по-	48 срезов	2,0 г
		последние 10
			следние 5 лет	(0,6 г)
		лет
3.	Неблагополучная по заболевае-	Отсутствует в	Регистрируется	72 среза	3,0
	мости (пораженности) животных	последние 5 лет	ежегодно	(0,9 г)
4.	Неблагополучная по заболевае-	Регистрируется	Регистрируется	96 срезов	4,0
	мости человека и животных	ежегодно	ежегодно	(1,2 г)

126

Личинки бескапсульных трихинелл имеют специфическую конфигурацию расположения в мышечных волокнах и их легче обнаружить по краям срезов мышц и в тканевой жидкости, окружающей среды.

Могут встречаться обызвествленные капсулы. Для их просветления срезы мышц помещают в чашку Петри с 5-10%-ным раствором соляной кислоты. Чашку ставят в термостат при температуре 37 ± 1ºС на 20-30 мин. Затем срезы переносят на компрессориум и просматривают согласно п.п. 3.3.

4. Биохимическое исследование (трихинеллоскопия после искусственного переваривания мышц)

4.1.При проведении исследования используют искусственный желудочный сок (ИЖС), который готовят по следующее прописи: вода водопроводная температуры 41-42ºС – 1000 см³, кислота соляная концентрированная (уд. масса 1,2) – 10 см³; пепсин пищевой свиной (ТУ 10.02.01.111-89) при исследовании свежего мяса и мясопродуктов

–2,0 г, при исследовании соленого, копченого мяса и мясопродуктов, шпика – 10,0 г.

При использовании пепсина медицинского (Временная фармакопейная статья 42-1000-80) дозу увеличивают до 20,0 г.

Искусственный желудочный сок годен для применения в течение 8 часов с момента приготовления.

4.2.При исследовании мяса в тушах, полутушах, четвертинах, блоках, а также копченостей (при выборочном контроле) и других видов продукции количество срезов (массу навески) определяют соглас-

но п.п. 3.1 (табл. 1).

4.3.Навеску измельчают в мясорубке с диаметром решетки 3-4 мм, переносят в коническую колбу соответствующей вместимости и заливают ИЖС в соотношении 1:15. Колбу помещают в термостат при температуре 41-42ºС и выдерживают 5-7 ч, периодически перемешивая. За 10 мин до окончания переваривания перемешивание прекращают. После окончания переваривания в осадке остаются хлопья коричневого или темно-коричневого цвета.

4.4.Из колбы сливают (осторожно) 2/3 надосадочной жидкости, осадок выливают на капроновое сито (полусферической формы с диаметром ячеек 400 мкм), установленное в стеклянной воронке диаметром 90-120 мм, соединенной резиновой трубкой с пробиркой вместимостью 5 см³.

127

Залитый осадок отстаивают 15-20 мин, затем резиновую трубку перекрывают зажимом и пробирку отсоединяют. Содержимое пробирки (осадок) переносят по частям на часовое стекло и исследуют под малым (8х10) увеличением микроскопа или трихинеллоскопа на наличие личинок трихинелл.

4.5. Для выделения личинок трихинелл может быть использован метод группового переваривания в аппаратах типа АВТ (приложение 1) согласно действующей инструкции.

Метод группового исследования свинины на трихинеллез в аппаратах типа АВТ

Применяют на некоторых мясокомбинатах. Он основан на переваривании в искусственном соке образцов проб мышечной ткани, взятых из ножек диафрагмы нескольких свиных туш, и обнаружении в осадке (переваренной массе) личинок трихинелл. Исследуют пробы с помощью аппарата АВТ, представляющего термостатируемую камеру с вмонтированными в нее восемью реакторами, предназначенными для переваривания мышечной ткани.

Для исследования туш на трихинеллез отбирают пробы из ножек диафрагмы на границе перехода мышечной ткани в сухожилие. От туш животных из зон, где регистрируется трихинеллез, готовят групповую пробу общей массой до 100 г, состоящую из проб от 20 туш или более, по 5 г каждая (по 2,5 г от каждой из двух ножек диафрагмы одной туши). От свиных туш животных из зон, где трихинеллез не регистрируется в течение последних 8-10 лет, готовят групповую пробу общей массой до 100 г, состоящую из проб от 100 туш или менее, по 1 г каждая (по 0,5 г каждой из двух ножек диафрагмы одной туши). Отобранную групповую пробу измельчают на мясорубке, а фарш собирают в стакан с порядковым номером, соответствующим номеру реактора. Для получения специальной жидкости в каждый из реакторов заливают 2,5 л теплой (40-42º С) воды, вносят 6 г пищевого пепсина активностью100 000 ЕД и 30 мл концентрированной соляной кислоты. Смесь перемешивают. Затем в реактор вносят измельченную групповую пробу и включают мешалку.

По окончании переваривания групповой пробы жидкость отстаивают, а осадок исследуют на наличие трихинелл под микроскопом, лупой или на микропроекторе.

128

При выявлении в осадке одной или более личинок трихинелл исследованную группу свиных туш переводят на запасной подвесной путь, разделяют ее на 8 групп по 12-13 туш (первоначальная групповая проба от 100 туш) или по 2-3 туши (первоначальная групповая проба от 20 туш), берут снова пробы и исследуют, как указано выше. Туши из группы, давшей положительные результаты при повторной трихинеллоскопии, исследуют индивидуально в аппарате АВТ, выявляя таким образом тушу, пораженную личинками трихинелл.

5.Оценка результатов

5.1.Результаты считают положительными, если в образцах исследованной продукции обнаружена хотя бы одна личинка капсульных или бескапсульных трихинелл.

6.Дифференциальная диагностика

6.1. Капсулообразующих трихинелл необходимо дифференцировать от наиболее часто встречаемых в мясе и мясопродуктах саркоцист (мишеровы мешочки) и микрофинн (приложение 2). Дифференциация основана на морфологии возбудителя и строении капсулы.

6.1.1. Трихинеллы имеют капсулу лимоновидной, округлой формы, внутри спирально свернута личинка (или несколько личинок).

6.1.2. Саркоцисты имеют собственную оболочку цилиндрической или неправильной формы; циста заключена в собственную тонкую оболочку и состоит из камер, внутри которых находятся мерозоиты.

6.1.3. Микрофинны располагаются в отличие от трихинелл между мышечными волокнами, имеют овальную форму и окружены слоистой соединительнотканной оболочкой.

** *

Сутверждением настоящих методических указаний на территории Российской Федерации утрачивают силу «Методические указания по лабораторной диагностике трихинеллеза животных», одобренные Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 29.12.85. и «Методика лабораторной диагностики трихинеллеза», утвержденные Главветупром Госагропрома СССР 16.10.86.

129

* * *

Методические указания по лабораторной диагностике трихинеллеза животных разработаны Всероссийским НИИ гельминтологии имени К.И.Скрябина (А.С.Бессонов, А.В.Успенский, Н.В.Шеховцов), Центральной научно-методической ветеринарной лабораторией (В.А.Седов, В.Д.Певнева), Краснодарской научно-исследовательской ветеринарной станцией (А.Я.Сапунов, О.А.Митникова), Кубанским агроуниверситетом (Б.Л.Гаркави), Управлением ветеринарии г. Краснодара (А.А.Иващенко).

Санитарная оценка. Туши свиней (кроме поросят до 3-не- дельного возраста), а также кабанов, барсуков, медведей и нутрий подлежат обязательному исследованию на трихинеллез. При обнаружении в 24 срезах хотя бы одной трихинеллы (независимо от ее жизнеспособности) тушу и субпродукты, имеющие мышечную ткань, пищевод, прямую кишку, а также обезличенные мясные продукты направляют на техническую утилизацию.

Наружный жир (шпик) снимают и перетапливают. В вытопленном жире на 20 мин температуру доводят до 100º С. Внутренний жир выпускают без ограничения. Кишки, кроме прямой, после обычной обработки выпускают без ограничений. Шкуры выпускают после удаления с них мышечной ткани. Удаленная со шкур мышечная ткань подлежит утилизации.

Оборудование для трихинеллоскопии

1. Компрессорная трихинеллоскопия - стационарные и лабораторные проекционные устройства типа

ТМП, «Стейк», микроскопы, бинокулярные лупы, устройства для полевой трихинеллоскопии и соответствующее импортное оборудование, прошедшее испытания во Всероссийском НИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина;

- компрессориумы, ножницы.

2. Метод переваривания мышечной ткани 1.1. Автоматизированная диагностика

-аппараты для выделения личинок трихинелл методом переваривания мышечной ткани в искусственном соке АВТ – Л2, АВТ – Л3 и др.

2.2. Лабораторная диагностика

-термостаты, стеклянные колбы.

130

Приложение 3

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Департамент ветеринарии, г. Москва

ПРИКАЗ от 07.06.2000, № 16 Об усилении мероприятий по борьбе с трихинеллезом

Несмотря на неоднократные указания Департамента ветеринарии Минсельхозпрода России о принятии дополнительных мер по борьбе с трихинеллезом, за последнее время участились случаи заболевания людей этой болезнью, все они связаны с употреблением в пищу инвазированного личинками трихинелл мяса свиней, диких кабанов, медведей, не прошедшего ветеринарно-санитарную экспертизу в организациях Государственной ветеринарной службы.

Так, в апреле 2000 года в г. Абакане (Республика Хакасия) заболело трихинеллезом 37 человек, Государственной ветеринарной службой г. Абакана совместно с органами Госсанэпиднадзора установлено, что все заболевшие люди употребляли медвежатину и продукты, изготовленные из нее (копчености, шашлык, котлеты и пельмени), которые не были представлены в учреждения Государственной ветеринарной службы для ветеринарно-санитарной экспертизы. Расследованием выявлено, что часть мяса подверглась копчению в коптильном цехе, эксплуатация которого не разрешена государственной ветеринарной и государственной санитарно-эпидемиологической службами. Остатки копченого мяса были изъяты и исследованы в Республиканской ветеринарной лаборатории, которая подтвердила наличие в нем личинок трихинелл.

В 1998-99 г. аналогичные случаи имели место в Ставропольском крае, Вологодской, Смоленской областях.

Таким образом, зачастую вновь создаваемые мясоперерабатывающие предприятия (колбасные и коптильные цеха) принимают, перерабатывают мясо и реализуют мясные продукты без контроля со стороны органов государственного надзора.

Выявленные факты требуют ужесточения контроля за поднадзорными Государственной ветеринарной службе объектам, выполне-