Контрольные вопросы:

В чем принцип метода хроматографии?

Перечислите методы хроматографического разделения аминокислот?

Как проводится восходящая хроматография на бумаге?

Какие системы растворителей используются для распределительной хроматографии на бумаге?

Какая цветная реакция лежит в основе хроматографического выявления аминокислот на бумаге?

Объясните принцип разделения аминокислот методом тонкослойной ионообменной хроматографии?

В чем состоит принцип метода электрофореза?

Раздел 2. Ферменты

Тема 6 ферменты как биологические катализаторы. Свойства ферментов

Ферменты – биологические катализаторы белковой природы. Синтезируются в клетках организма. Ферменты относятся к простым или сложным белкам. В молекуле одних ферментов – протеидов – белковая часть и простетическая группа слабо связаны между собой, в молекуле других, наоборот, их связь прочная.

Высокая каталитическая активность ферментов связана с тем, что они временно соединяются с субстратом, образуя фермент-субстратные комплексы. Часть ферментативного белка, взаимодействующая с субстратом называется активным центром фермента. Часть полипептидной цепи фермента, которая способствует определенному пространственному расположению активного центра, называется аллостерическим участком.

Благодаря своей белковой природе ферменты сохраняют все свойства белков. Денатурированные ферменты теряют свои специфические свойства биокатализаторов. С белковой природой связаны основные свойства ферментов – специфичность, термолабильность, зависимость их действия от значения рН, подверженность влиянию активаторов и ингибиторов.

Лабораторная работа №12 специфичность действия ферментов

Ферменты специфичны в отношение как типа катализируемых реакций, так и субстратов, на которые они воздействуют. Некоторые ферменты обладают абсолютной специфичностью, действуют на один какой-либо субстрат. Высокая специфичность ферментов определяется тем, что только некоторые, строго определенные функциональные группы, входящие в состав ферментов, могут участвовать в образовании фермент-субстратных комплексов. Аминокислоты, составляющие активный центр фермента, имеют определенное пространственное расположение, способствующее соединению с субстратом.

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

Амилаза слюны ускоряет гидролиз только полисахаридов, не оказывая действия на дисахариды. Мальтаза слюны ускоряет гидролиз мальтозы, образующейся при гидролизе крахмала, но не оказывает никакого действия на сахарозу.

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) слюна в разведении 1:5; 2) сахароза, 1 %; 3) крахмал, 1 %; 4) NaOH, 10 %; 5) CuSO₄, 1 %; 6) термостат или водяная баня (температура 38 ^оС); 7) химический цилиндр на 10 мл.

ХОД РАБОТЫ:

В две пробирки приливают по 5 капель слюны, разведенной 1:5.

1. В первую пробирку добавляют 10 капель 1 % раствора крахмала.

2. Во вторую пробирку добавляют 10 капель 1 % раствора сахарозы.

Пробирки помещают на 10 мин в термостат или водяную баню при 38 ^оС.

Проделывают реакцию Троммера: к 5 каплям исследуемой жидкости прибавляют 5 капель 10 % раствора NaOH и 5 капель 1 % раствора сернокислой меди, нагревают. В присутствии глюкозы и мальтозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди.

Результат занести в таблицу 6.

Таблица 6

№	Добавленное вещество	Развивающаяся окраска в реакции Троммера	ВЫВОД
1.	Крахмал
2.	Сахароза