Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БИОХИМИЯ методичка.doc
Скачиваний:
430
Добавлен:
03.06.2015
Размер:
933.89 Кб
Скачать

Лабораторная работа №23 качественные реакции на витамин с

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

Витамин С. Обнаружение аскорбиновой кислоты основано на ее способности вступать в окислительно-восстановительные реакции. Окисляясь, аскорбиновая кислота восстанавливает такие вещества, как железосинеродистый калий, метиленовый синий, молекулярный йод.

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) аскорбиновая кислота, 1 %; 2) NaOH, 10 %; 3) HCl, 10 %; 4) железосинеродистый калий, 5 %; 5) FeCl3, 1 %; 6) метиленовый синий, 0,01 %; 7) Na2CO3, 10 %; 8) раствор Люголя (0,1 % раствор йода в растворе йодистого калия); 9) пробирки, держатели, спиртовки.

ХОД РАБОТЫ:

1. Реакция с железосинеродистым калием. В пробирку приливают 1 каплю 10 % раствора NaOH, добавляют 1 каплю 5 % раствора железосинеродистого калия. Затем прибавляют 5 капель раствора аскорбиновой кислоты. Пробирку встряхивают и добавляют в нее 3 капли 10 % раствора HCl и 1 каплю 1 % раствора FeCl3. В пробирке образуется осадок берлинской лазури.

В другой пробирке проделывают эту же реакцию с водой. Наблюдается бурое окрашивание, обусловленное образованием железосинеродистой соли окиси железа.

Результат занести в таблицу 20.

2. Реакция с метиленовым синим. В пробирку вносят 1 каплю 0,01 % раствора метиленового синего и 1 каплю 10 % раствора Na2СО3. Затем добавляют 3-5 капель раствора аскорбиновой кислоты. Нагревают на спиртовке. Происходит обесцвечивание метиленового синего. В другой пробирке проделывают эту же реакцию с водой.

Результат занести в таблицу 20.

3. Реакция с раствором Люголя. В пробирку приливают 10 капель дистиллированной воды, добавляют 2 капли раствора Люголя и 10 капель раствора аскорбиновой кислоты. Раствор Люголя обесцвечивается в результате восстановления йода до йодисто-водородной кислоты. В другой пробирке проделывают эту же реакцию с водой.

Результат занести в таблицу 20.

Таблица 20

Аскорбиновая кислота

Вода

Наблюдаемое окрашивание

Лабораторная работа №24 количественное определение витамина с

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

Количественно витамин С определяют титрованием 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола.

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) картофель; 2) 2,6-дихлорфенолиндофенола, 0,001 н; 3) H24, 10 %; 4) дистиллированная вода; 5) бюретка или мерная пипетка для титрования; 6) мерный цилиндр, воронка, фильтр; 7) весы.

ХОД РАБОТЫ:

1. Приготовление экстракта из растительного материала. Тщательно промытый и очищенный от кожуры картофель нарезают на мелкие кусочки. 5 г картофеля растирают в ступке, приливая туда 15 мл дистиллированной воды. Далее фильтруют вытяжку и измеряют объем.

2. Титрование. 10 мл фильтрата подкисляют 2-3 каплями 10 % H24 и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до розового цвета, не исчезающего в течение 30 сек. Проводят расчет:

X = (0,088 х А х Б х 100) / В х Г = мг %, где

А - количество 2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титро­вание (мл),

Б - общий объем вытяжки (мл),

В - количество вещества, взятое для анализа (г),

Г - объем вытяжки взятый для титрования (мл),

0,088 - коэффициент, соответствующий содержанию витамина С в 1мл 0,001 н раствора.

РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД: