Контрольные вопросы:

Какое свойство глюкозы лежит в основе реакции «серебряного зеркала»?

Объясните отсутствие восстанавливающей способности у сахарозы.

Какова химическая структура, классификация, номенклатура и конформация моносахаридов?

Физико-химические свойства углеводов.

Структура, свойства и биологическое значение гомополисахаридов и гетерополисахаридов.

Тема 11

ОБМЕН УГЛЕВОДОВ

Лабораторная работа №30

ОБНАРУЖЕНИЕ ПРОДУКТОВ ДРОЖЖЕВОГО СБРАЖИВАНИЯ ГЛЮКОЗЫ

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

Глюкоза под влиянием ферментов, содержащихся в дрожжах, превращается в спирт и углекислый газ. Процессы распада глюкозы при брожении и гликолизе протекают одинаково до образования пировиноградной кислоты. Различие начинается с дальнейшего превращения пировиноградной кислоты. Под действием декарбоксилазы дрожжей пировиноградная кислота превращается в уксусный альдегид, который восстанавливается при участии алкогольдегидрогеназы и НАДН·Н⁺ в этиловый спирт.

Углекислый газ, выделившийся при сбраживании глюкозы, можно открыть в специальных приборах для брожения: выделившийся СО₂ поглощается щелочью и образуется вакуум, наличие которого определяется в бродильном приборе. Спирт, образующийся при брожении, можно открыть с помощью реакции получения йодоформа:

СН₃СН₂ОН + 4Ι₂ + 6 NaOH → CHI₃ + 5NaI + HCOONa + 5H₂O

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) свежие дрожжи; 2) глюкоза, 5 %; 3) NaOH, 10 %; 4) 10 % раствор йода в йодистом калии; 5) прибор для брожения; 6) ступки с пестиком; 7) мерные цилиндры; 8) воронки; 9) термостат.

ХОД РАБОТЫ:

В ступке растирают приблизительно 1 г дрожжей, приливая небольшими порциями 20 мл 5 % раствора глюкозы.

Полученную массу переливают в прибор для брожения таким образом, чтобы закрытое колено трубки было полностью заполнено, а в широкой части уровень жидкости достигал приблизительно половины. Наполненный прибор для брожения ставят в термостат на 30-60 минут (в зависимости от активности дрожжей), до накопления газа в закрытом колене прибора.

Проделывают качественные реакции на СО₂ и спирт.

1. Качественная реакция на СО₂. Приливают в прибор для брожения 10 % раствор натриевой щелочи до краев, закрывают отверстие большим пальцем и несколько раз хорошо перемешивают содержимое прибора. Палец присасывается к отверстию прибора, так как СО₂ поглощается щелочью, и образуется вакуум.

2. Качественная реакция на спирт. Для открытия этилового спирта небольшое количество жидкости отфильтровывают в пробирку. К фильтрату добавляют несколько капель 10 % раствора йода в йодистом калии – до появления желтого окрашивания, слегка нагревают. Через некоторое время ощущается характерный запах йодоформа.

РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД:

Лабораторная работа №31 обнаружение молочной кислоты в мышечной ткани

ПРИНЦИП РАБОТЫ:

Молочная кислота в присутствии фенолята железа (реактив Уффельманна), окрашенного в фиолетовый цвет, образует лактат железа желто-зеленого цвета.

РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:

1) мышечная ткань; 2) фенол, 1 %; 3) FeCl₃, 1 %; 4) ступка с пестиком; 6) кварцевый песок; 7) воронки; 8) вата; 9) пробирки; 10) стеклянные палочки.

ХОД РАБОТЫ:

1. Приготовление экстракта из мышечной ткани. В ступке тщательно растирают 1 г мышечной ткани с 7-8 мл дистиллированной воды до получения однородной мышечной кашицы. Гомогенизат фильтруют в пробирку через смоченную водой вату. Фильтрат нагревают на спиртовке до исчезновения кроваво-красного окрашивания. Фильтрат охлаждают и повторно фильтруют через влажный бумажный фильтр. Полученный экстракт анализируют на наличие молочной кислоты.

2. Определение молочной кислоты. В 3 пробирки отбирают по 0,5 мл 1 % раствора фенола и добавляют 2 капли раствора хлорного железа. К полученному раствору фенолята железа (синего цвета) добавляют: в 1-ю пробирку – по каплям раствор молочной кислоты, наблюдая за изменением окраски, во 2-ю – дистиллированную воду, в 3-ю – мышечный экстракт (10-15 капель). О наличие молочной кислоты в нем судят по сходству изменения окраски с раствором молочной кислоты.

РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД: