- •Российский университет дружбы народов
- •Средние величины транспорта некоторых веществ, подвергающихся фильтрации и реабсорбции в почке
- •II. Исследование мочеиспускания.
- •Частота мочеиспускания в норме у различных животных
- •2.1. Методика сбора мочи для анализов
- •III. Определение общих свойств мочи
- •3.1. Свойства нормальной мочи некоторых животных
- •При исследовании мочи придерживаются следующей схемы, определяя ее:
- •3.2. Исследование физико-химических свойств мочи.
- •3.3. Химическое исследование мочи
- •Ренальная протеинурия.
- •Экстраренальная протеинурия
- •IV. Проведение анализа по исследованию мочи
- •Определение содержания белка
- •2.1. Ход исследования
- •Количественное определение (метод Брандберга-Робертса-Стольникова в модификации с реактивом Ларионовой) Приготовление реактива Ларионовой
- •3.1.Ход исследования.
- •Качественное определение глюкозы
- •Приготовление реактива Гайнеса
- •4.1.Ход исследования
- •Качественное определение билирубина
- •5.1. Ход исследования
- •Качественное определение уробилиноидов (бензальдегидная проба Нейбауэра)
- •Приготовление реактива Эрлиха
- •Качественное определение кетонов
- •V. Исследование осадков мочи
- •Неорганизованные осадки мочи щелочной и кислой реакции
- •Неорганизованные осадки щелочной мочи
- •Неорганизованные осадки кислой мочи
- •VI.Основные синдромы заболеваний мочевой системы
- •Мочевой синдром (бессимптомные протеинурия и гематурия)
- •Нефротический синдром
- •Симптомокомплекс острой и хронической почечной недостаточности
- •Тубулоинтерстициальные нарушения
Ренальная протеинурия.
Функциональная физиологическая протеинурия обнаруживается после употребления в пищу большого количества не денатурированного белка (например яичный белок) – алиментарная протеинурия, после усиленных мышечных нагрузок – маршевая протеинурия, при сильном охлаждении, перегревании, при беременности (особенно в последние недели перед родами, при некоторых стрессовых состояниях и у новорожденных.
Функциональная патологическая протеинурия может наблюдаться у истощенных животных с лордозом – ортостатическая, лордотическая, перемежающаяся протеинурия; белок в моче может появляться при длительном стоянии, при резкой смене положения тела.
Органическая (истинная почечная) протеинурия
острый и хронический гломерулонефрит;
нефрозы;
нефросклерозы;
врожденные аномалии почек;
интоксикации;
ожоги;
тубулопатии
Экстраренальная протеинурия
Преренальная (застойная) протеинурия.
сердечная недостаточность в стадии декомпенсации
Постренальная (ложная) протеинурия.
цистопиелиты;
вульвовагиниты;
уретриты;
опухоли мочевыводящих путей.
Определение сахара в моче. На сахар исследуют свежую мочу. При хранении мочи в тепле сахара разлагаются.
В моче здоровых животных глюкоза содержится в минимальных количествах, которые не определяются обычными качественными пробами.
Выделение сахара с мочой называется Глюкозурия - выделение сахара с мочой зависит от трех факторов: 1) концентрация сахара в крови;2) количества профильтровавшейся через клубочки первичной мочи;3) количества глюкозы, подвергшейся реабсорбции в почечных канальцах.
При нормальной функции почек глюкозурия наступает в тех случаях, когда уровень сахара в крови понимается выше “сахарного порога”. Сахарный порог во многом зависит от функции почек. Повышение его наблюдается при некоторых хронических заболеваниях почек, когда объем клубочкового фильтрата резко снижается и в канальцы попадает меньшее количество глюкозы.
Почечный порог может повышаться при введении питуитрина (вазопрессина), адреналина, паратгормона, под действием которых резко уменьшается просвет кровеносных сосудов, повышается кровяное давление, изменяется водно-солевой обмен и повышается отделение мочи.. Понижение сахарного порога наблюдается при почечном диабете, когда вследствие нарушения процесса реабсорбции глюкозы в почечных канальцах глюкозурия может возникать даже при нормальном уровне сахара в крови.
Появлению сахара в моче обычно предшествует повышение его содержания в крови. Но не всегда гипергликемия и связанная с ней глюкозурия рассматриваются как патологическое явление.
Физиологическая глюкозурия возникает:
при потреблении большого количества углеводов;
стрессовые состояния;
болевые ощущения (рефлекторно развивается гликогенолиз, в связи с выбросом катехоламинов);
длительное голодание.
Патологическая глюкозурия возникает:
Инсулярная (панкреатогенная)
сахарный диабет;
острый панкреатит;
Экстраинсулярная (внепанкреатическая) центрального
генеза
черепно-мозговые травмы;
опухоли головного мозга;
менингиты;
лихорадочные состояния;
отравления морфином, хлороформом, фосфором, стрихнином.
Экстраинсулярная (внепанкреатическая) гормональная
тиреотоксикоз;
акромегалия;
гиперплазия коры надпочечников;
синдром Иценко-Кушинга.
Экстраинсулярная (внепанкреатическая) ренальная
почечный диабет
В моче животных, кроме глюкозы, могут встретиться и другие виды сахаров – сахароза, галактоза, фруктоза, пентоза, лактоза и др. Кроме того могут выделяться и другие вещества, обладающие редуцирующими (восстановительными) свойствами, например витамин С, креатинин, мочевая кислота, которые могут давать положительные качественные реакции на сахар.
Качественное определение сахара в моче производят с помощью проб Мора, Гайнеса, Ниландера, Фелинга, Бенедикта и др.
Проба Мора. Моча, содержащая сахар, при кипячении с 10% водным раствором гидрооксида натрия или калия последовательно окрашивается в желтый, буро-красный, темно-бурый и черный цвет.
Проба Гайнеса. Проба позволяет определить сахар по наличию осадка закиси меди коричнево-зеленого или красного цвета в зависимости от количества сахара, присутствующего в моче.
Проба Ниландера. Реактив Ниландера состоит из 4г сегнетовой соли, 2г азотистого висмута и 10г гидрооксида калия в 100мл дистиллированной воды. Реакции Ниландера существенно мешают различные вещества, присутствующие как в нормальной, так и в патологической моче, что существенно снижает ценность этого метода.
Количественное определение сахара в моче удобнее всего производить с помощью поляриметра или путем титрования мочи.
Кетоновые (ацетоновые) тела. К кетоновым телам, выделяющимся с мочой относятся ацетон, ацетоуксусная и бета оксимасляная кислота. С мочой здоровых животных в течение суток выделяется минимальное количество кетоновых тел (не более 20-50 г в сутки), которое не обнаруживается обычными качественными пробами в клинических лабораториях.
Известно, что белки, жиры и углеводы могут расщепляться в организме до конечных продуктов обмена – углекислоты и воды. Расщепление жиров в тканях происходит под воздействием липолитических ферментов (тканевых липаз) с образованием глицерина и высших жирных кислот. При окислении жирных кислот образуются промежуточные продукты обмена: ненасыщенные жирные кислоты, окси- и кетокислоты и простые жирные кислоты. Жирные кислоты дегидрируются (теряют водород) и превращаются в ненасыщенные кислоты, к которым присоединяется вода, образуя бета-оксикислоту. Эта кислота вновь дегидрируется, превращаясь в бета-кетокислоту, которая, присоединив молекулу воды, расщепляется на так называемую “активную” уксусную кислоту. Эта “ активная “ уксусная кислота через цикл трикарбоновых кислот окисляется до углекислоты и воды.
При нарушении некоторых звеньев этого цикла ацетон может образоваться в результате декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты. Ацетоуксусная кислота в свою очередь может образовываться из двух молекул активной уксусной кислоты. Ацетон может образовываться из ацетоуксусной кислоты и при нарушении процесса расщепления некоторых аминокислот таких как фенилаланин, тирозин и лейцин.
Образование промежуточных продуктов обмена ацетоуксусной и бета оксимасляной кислот происходит в печени. Затем эти кислоты поступают в ткани, где они окисляются в дальнейшем до конечных продуктов обмена – углекислоты и воды. При недостаточном поступлении в организм углеводов, голодании или нарушении их использования организмом (например при диабете), изменяется процесс окисления недооксиленных продуктов обмена,. в связи с чем они появляются в моче.
Кетонурия – повышенное выделение кетоновых тел с мочой встречается:
продолжительное голодание;
сильное возбуждение;
сильное переутомление;
патологии ЦНС;
лихорадка;
синдром Иценко – Кушинга;
сахарный диабет;
гиперинсулинизм;
тиреотоксикоз.
При значительной кетонемии изменяется и КЩС в организме. В результате развивается ацидоз, следствием которого является ацидотическая кома с судорогами, специфической ацидотической рвотой и общим тяжелым состоянием.
В моче имеется небольшое количество кетоновых тел, которые не улавливают качественными реакциями. У лошадей в норме их содержится 0,06-0,66 ммоль/л, у коров - 0,3 -1,1, у овец - 0,59 - 1,46 ммоль/л.
Определение крови и кровяных пигментов. В моче могут быть обнаружены кровь, кровяные пигменты (гемоглобин и его дериваты — метгемоглобнн, сульфгемоглобин, гемосидерин), а также миоглобин.
В моче часто одновременно находят кровь и гемоглобин, поэтому в пробе после оседания форменных элементов надосадочная жидкость остается красной.
Наличие крови в моче именуют гематурией. Визуально примесь крови к моче можно определить, если концентрация эритроцитов в ней составляет более 25 000 в 1 мкл. Моча в этом случае красная, осадок ее со сгустками крови. Такое состояние называют макрогематурией. Если примесь крови не вызывает окрашивания мочи, то говорят о микрогематурии. Ее чаще находят при микроскопии осадка мочи.
Клиническое значение обнаружения крови в моче. Гематурия может быть вследствие кровотечения в органы мочевой системы. Кровь может примешиваться из половых органов и из фекальных масс.
Гематурии бывают почечные, внепочечные и смешанные. Кровь часто встречается при мочекаменной болезни. При этом количество крови в утренней моче меньше, чем днем и вечером, после движения животных. У крупного рогатого скота гематурия развивается при послеродовой гемоглобинурии, отравлении капустой; у телят - при водной интоксикации после выпаивания чрезмерно большого количества воды.
Обнаружение крови — важный симптом острого нефрита и его обострения.
Кровотечение отмечают при опухолях, гематомах, венозном застое в почках, опухолях в мочевом пузыре, остро протекающих инфекциях, вследствие гиповитаминоза С, К и других геморрагических диатезов.
В случаях тяжело протекающего пиелонефрита, острого уроцистита кровь в моче бывает с примесью большого количества лейкоцитов.
Важное значение имеет установление места кровотечения. Для этого применяют пробу трех сосудов. В начале мочеиспускания кровь собирают в первый сосуд, в середине - во второй и в конце — в третий. При кровотечении из уретры кровь бывает только в первом, при кровотечении из мочевого пузыря - в третьем, при других источниках кровотечения моча кровавая во всех трех сосудах.
Кровь в моче может быть в сочетании с кровяными пигментами и миоглобином. Если они присутствуют в большом количестве, то вызывают ее покраснение и по бурение. Сущность обнаружения крови и кровяных пигментов в моче химическим путем основана на пероксидазном действии гемоглобина. Качественное определение крови и кровяных пигментов в моче проводят с помощью бензидиновой пробы, с гваяковой настойкой и др.
Количественное определение крови в моче не имеет большого значения. Клиническое значение определения гемоглобина в моче. Появление гемоглобина в моче называют гемоглобинурией. Она возникает в результате усиленного гемолиза в кровяном русле, вследствие которого развивается гемоглобинемия. При превышении почечного порога в отношении гемоглобина начинается его выделение с мочой. Для установления гемоглобинурии необходимо доказать химическими реакциями наличие в моче гемоглобина и отсутствие гематурии, что определяют микро- и макроскопически. Гемоглобинурия бывает при отравлениях экстрактом мужского папоротника, в случаях сильных ожогов, при кровепаразитарных болезнях (бабезиоз, пироплазмоз, нутталиоз и другие пироплазмидозы).
Присутствие миоглобина в моче приводит к окрашиванию ее в красный или бурый цвет. Миоглобин появляется при обширных мышечных травмах и миоглобинурии.
Определение индикана. Индикан — калиевая соль индоксилсерной кислоты. Он образуется в результате гнилостных процессов в кишечнике и распада белков тканей организма. Показанием на определение индикана служит подозрение на усиление гнилостных процессов в кишечнике или распад тканей в связи с абсцессами и т. д.
Качественное определение индикана. Методики основаны на двух принципах: превращение индикана под действием кислоты в индоксил, который в последующем окисляется до синего или красного индиго (проба Обермайера и Яффе); индоксил под действием FeCI2 соединяется с тимолом, давая цветную реакцию (реакция Розе).
Количественное определение индикана возможно реакцией Розе.
Клиническое значение определения индикана. Индикан в моче обнаруживают в небольших количествах. У высокопродуктивных коров при стойловом содержании индикан в моче колеблется от 22 до 44 г/л. К концу стойлового периода концентрация индикана возрастает.
Увеличение индикана в моче, при котором качественные пробы становятся положительными, называют индиканурией. При патологии индиканурия может быть кишечного и тканевого происхождения. Кишечная индиканурия возникает при ослаблении моторики желудочно-кишечного тракта, непроходимости кишечника, воспалительных процессах в нем, особенно при развитии гнилостной микрофлоры и при перитоните. Тканевая индиканурия развивается при распаде опухолей, гангрене легких, абсцессах и септическом состоянии.
Определение билирубина. Билирубин в моче определяют с помощью качественных, а также количественных проб.
Характеристика методов определения билирубина. Для качественного определения билирубина используют методы Розина и Фуше. Они основаны на превращении билирубина под действием окислителей в биливердин, который имеет изумрудно-зеленый цвет. Проба Розина непригодна для выявления билирубина в моче у крупного рогатого скота. Для этой цели нужно использовать пробу по Франку с метиленовым синим.
Количественные исследования билирубина выполняют по методам Клегорна и Грофа в модификации Вита.
Значение количественного определения билирубина. В моче здоровых животных билирубин не выявляют качественными пробами. Если билирубин обнаруживают качественными пробами, такое состояние называют билирубинурией. Почки выделяют только прямой билирубин.
Особое значение имеет выявление билирубина при диагностике желтух. Билирубинурия сильно выражена при механической (обтурационной) желтухе, которая обусловлена закупоркой желчных путей. В них происходит застой желчи, в результате чего повреждаются желчные капилляры и прямой билирубин попадает в кровь, заносится в почки и выделяется с мочой. Исчезновение билирубина в моче при данной желтухе указывает на восстановление желчных путей.
Механическая желтуха возникает при наличии камней в желчных ходах, при сдавливании и закупорке желчного протока и т. д. Билирубинурию отмечают также при паренхиматозной желтухе, при которой прямой билирубин проникает в кровь в результате разрушения печеночных клеток. Он также с кровью попадает в почки и выводится с мочой. Паренхиматозную желтуху обнаруживают при гепатитах у плотоядных, травоядных в результате отравлений четыреххлористым углеродом, у лошадей — при инфекционном энцефаломиелите.
При гемолитической желтухе билирубинурия не развивается. В крови не накапливается прямой билирубин, другая же разновидность билирубина — непрямой билирубин — не выделяется с мочой. Таким образом, билирубинурия свойственна только механической и паренхиматозной желтухе.
Желчные пигменты. Желчные пигменты – билирубин и биливердин – появляются в моче только при патологии. В норме желчные пигменты содержатся в моче в незначительных количествах и качественными пробами не определяются. Желчные пигменты могут появиться в моче лишь в том случае, если количество их в крови превысит так называемый почечный порог билирубина (более 2 мг%).
Моча в присутствии желчных пигментов приобретает темный желто-зеленый цвет.
Билирубин и биливердин образуются в клетках РЭС печени, селезенки и костного мозга при разрушении эритроцитов. Расщепление гемоглобина начинается с разрыва альфа-метиновой связи порфиринового кольца с образованием вердгемоглобина. От молекулы вердгемоглобина происходит отщепление железа и глобина, после чего образуется совершенно качественно новое соединение – гемобилирубин или непрямой билирубин. Непрямой билирубин представляет собой пигмент оранжевого цвета, плохо растворимый в воде, циркулирующий в крови в виде тесного комплекса с альбуминами и не проходящий через почечный фильтр (в реакции ван ден Берга не дает прямой реакции). При определении непрямого билирубина в крови его сначала нужно освободить от комплекса с альбуминами, что достигается методом осаждения сывороточных белков спиртом или другими реактивами.
Непрямой билирубин выделяется клетками РЭС и с током крови попадает в печень. В гепатоцитах он теряет свой белковый компонент и преобразуется в прямой билирубин, или холебилирубин, связанный с глюкуроновой кислотой. В норме образовавшийся в гепатоцитах прямой билирубин поступает сначала по желчным ходам в желчные протоки, а оттуда в желчный пузырь. В кишечнике под действием ферментов некоторых кишечных бактерий билирубин восстанавливается в мезобилирубин и затем в стеркобилиноген и уробилиноген. Часть уробилиногена и стеркобилиногена всасывается кишечной стенкой и через воротную вену поступает в печень, где полностью окисляется в билирубин, который выделяется в составе желчи.. Большая часть стеркобилиногена выделяется с калом. Стеркобилиноген окисляется на воздухе в стеркобилин, который является нормальным пигментом кала. Небольшая часть прямого билирубина всасывается из кишечника в кровь и через нижнюю полую вену по кругу кровообращения поступает в почки в виде уробилиногена, который окисляется до уробилина и выделяется с мочой.
Появление желчных пигментов в моче может быть следствием повышенной билирубинемии за счет увеличения количества прямого билирубина в сыворотке крови.
С мочой может выделяться только прямой билирубин. Непрямой билирубин даже при очень высоком содержании в крови с мочой не выделяется, так как связан с белками сыворотки и не может преодолеть почечный фильтр.
Билирубинурия – появление прямого билирубина в моче:
механическая желтуха;
паренхиматозная желтуха.
Определение уробилиногеновых (уробилиновых) тел. Уробилиногеновые и уробилиновые тела - производные билирубина (уробилиноген, стеркобилиноген, а-уробилиноген и третий уробилин). Уробилиногеновые тела при соприкосновении с атмосферным кислородом переходят в уробилиновые тела: уробилин, стеркобилин, а-уробилин и третий уробилин (от образования дериватов билирубина).
Качественные методы определения уробилиногеновых и уробилиновых тел. Определение уробилиногеновых тел проводят по методике Нейбауера, а уробилиновых тел - по Богомолову или Шлизингеру. У коров применяют пробу Флоренса - Камарницина. Чаще приходится определять уробилиновые тела, так как в лабораторию доставляется моча, хранившаяся некоторое время.
Клиническое значение определения уробилиногеновых и уробилиновых тел. Моча животных окрашена стеркобилиногеном, который в норме не обнаруживается качественными пробами. Повышенное выделение уробилиногеновых тел с мочой, когда они улавливаются с помощью качественных реакций, называют уробилиногенурией. Она свидетельствует о поражении печени при паренхиматозной желтухе.
При гемолитических состояниях, кишечных заболеваниях (непроходимость, энтероколиты) в кишечнике образуется большое количество уробилиногеновых тел, но они, попадая в печень, расщепляются и не достигают кровеносного русла. Стеркобилиноген, образованный в большом количестве в кишечнике, всасывается по геморроидальным венам, попадает в почки и выводится ими в повышенном количестве с мочой.