6. Устойчивость

Устойчивость во внешней среде невысокая. При нагревании до 60ºс погибают через 20 минут, до 70 - 80ºс – через 5 -10 минут, при 90ºс – за 10 минут. Солнечные лу-чи убивают их в течение нескольких минут. При высушивании на открытом воздухе гиб-нут за 2-3 суток. Выдерживают замораживание до -70ºс. В трупах, воде, навозе и почве сохраняется 1-3 месяца, иногда до года. Дезинфицирующие вещества (3%-ный раствор медного купороса, 13%-ный раствор перекиси водорода, 3%-ный раствор карболовой кислоты) убивают возбудителя за несколько минут. [16,17]

Lll. Диагностика

Постановка диагноза на пастереллез птиц в случаях острого течения не представ-ляет трудностей, особенно при положительных результатах бактериологического ис-следования.

Диагноз на пастереллез у птиц ставят только на основании комплекса эпизоото-логических, клинических, особенно патологоанатомических данных с обязательным проведением для окончательного установления диагноза бактериологического иссле-дования и заражения опытных животных или птиц. Каждый из методов диагностики имеет ценность лишь в совокупности с другими методами, в особенности с результа-тами патологоморфологических и бактериологических исследований, результаты же бактериологических и биологических исследований позволяют окончательно поставить диагноз.

При эпизоотическом обследовании выясняется благополучие в прошлом этого хозяйства, а также благополучие соседних ферм и птицы, находящейся у населения, ввозимых в хозяйство птиц, кормов (особенно животного происхождения), ящиков и другой тары для перевозки птиц и т.д. При уточнении эпизоотологических особеннос-тей пастереллеза диагностическое значение имеют: восприимчивость всех видов до-машних и многих видов диких птиц, быстрое развитие эпизоотии при остром течении и высокая смертность. В ранее неблагополучных пунктах перед вспышкой болезни обыч-но регистрируют резкое ухудшение кормления, условий содержания, резкую перемену погоды и т.п., либо устанавливают пополнение ранее неблагополучных стад вновь при-обретенной птицей или выращенным молодняком или смешивание разных в санитар-ном отношении по пастереллезу групп птицы. [2]

Клинические признаки не имеют большого диагностического значения.

Исключительно ценные данные для правильной постановки диагноза при остром и подостром пастереллезе дает патологоанатомическое исследование. Наиболее важны следующие признаки: кровоизлияния на сердце и серозных покровах, а часто и на сли-зистой кишечника, сильнейший геморрагический энтерит особенно в двенадцатипер-стной кишке, характерные некротические очаги в печени и перерождение ее, в легких – отек или пневмония, особенно в случаях, когда заражение произошло через органы ды-хания. Патологоанатомические изменения при хроническом пастереллезе разнообраз-ны и имеют меньшее диагностическое значение. Всё же следует отметить фиброзно-некротиские процессы в органах дыхания и нередко фиброзный перикардит, плеврит, хронический катар кишечника. Поражения суставов ног и крыльев нельзя считать постоянным признаком.

Прижизненная бактериологическая диагностика пастереллеза не имеет большого значения, чаще исследуют материал от павших птиц. Результаты лабораторного исследования этого материала дают возможность уточнить первоначальный диагноз.[2]

Бактериологическая диагностика

Бактериологическое исследование состоит из следующих моментов:1) микроско-пия мазков из крови или мазков-отпечатков из пораженных органов; 2) выделение куль-туры возбудителя путем посева крови сердца, суспензии из органов костного мозга на питательные среды; 3) выделение культуры пастерелл путем заражения лабораторных животных и птиц; идентификация выделенной культуры и изучение ее вирулентности, которое особенно необходимо при выделении культуры пастерелл от птиц болеющих хроническим пастереллезом, и бактерионосителей.

СХЕМА ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТКИ

1.Бактериологическая диагностика

Патологический материал: трупы, кровь, паренхиматозные органы

↓

→Заражение лабораторных ← Вскрытие, патолого- Приготовление мазков,

животных суспензией из анатомическое окраска

патматериала исследование ▪ на биполярность

▪ на капсулы

Посевы на МПБ, МПА, среды с сывороткой крови

Чистая культура Смешанная культура

▪ микроскопия мазков, окрашенных по

Грамму и на биполярность

▪ исследование на подвижность

▪культуральные свойства ▪отвивка колоний

▪посев на пестрый ряд ▪заражение лабораторных

▪заражение лабораторных птиц для птиц

определения патогенных свойств

Учет результатов биопробы:

Гибель животных, патолого-

анатомические изменения,

сепсис, биполяр

2. Серологическая диагностика (РА) [13]

Биологическую пробу на пастереллез ставят на белых мышах, либо на голубях, или на курах. Кролики также очень восприимчивы к пастереллам, но ставить биопробу на них вряд ли целесообразно, так как они часто являются спонтанными пастерелло-носителями.

Лабораторных животных и птиц заражают суспензией из паренхиматозных органов подкожно или внутримышечно в дозе 0,2-0,5 мл.

В мазках из патологического материала и особенно крови (ценно для дифферен-циации от тифа, чумы и других болезней) при пастереллезе находят короткие с закруг-ленными краями овоидные палочки с выраженной биполярностью. Обнаружение в маз-ках биполярных овоидов – ценный диагностический признак, но, кроме пастерелл, би-полярную окраску могут давать и другие бактерии (E. Coli и д.р.), в то же время в неко-торых случаях пастереллы не дают четкой биполярности при окраске. Необходимо так-же строго соблюдать технику окраски.

Учет результатов биопробы проводят в срок до двух-трех дней предварительный и окончательный не позже 5 дней после гибели опытных животных (птиц). Отрицательный ответ – после 10-дневного наблюдения за подопытными животными (птицами). Важно правильно оценить рост культуры на МПА, так как это позволяет су-дить об антигенных и вирулентных свойствах изучаемой культуры еще до проведения точных исследований. Морфологию колоний целесообразно учитывать так, как указано выше (S-формы, M-формы, R-формы). [2]

Гибель животных, зараженных суспензией патологического материала из паренхи-матозных органов или чистой культурой возбудителя, в зависимости от вирулентности штамма наступает в разные сроки. Достаточно вирулентные штаммы вызывают гибель голубей, кур, белых мышей чаще в течении первых суток, редко- двух суток.

Павших подопытных животных и птиц вскрывают, делают посевы из крови сердца, паренхиматозных органов на простые среды, готовят и окрашивают мазки, микроско-пируют их с последующей идентификацией культуры.

У подопытных животных и птиц при патологоанатомическом исследовании обнару-живают типичные для пастереллеза признаки, особенно у птиц; у белых мышей – вос-палительный очаг на месте инъекции, отечности подкожной клетчатки и мускулатуры, кровоизлияний на эпикарде, увеличенные и отечные лимфатические узлы.

Изолированные и идентифицированные культуры пастерелл необходимо прове-рять на патогенность и вирулентность, которая у различных штаммов неодинакова.

Особенно важно вирулентность выделенных штаммов установить у птиц-пасте-реллоносителей, имеющих большое эпизоотическое значение. С этой целью подо-пытных птиц или белых мышей заражают подкожно или внутримышечно разными дозами изучаемого штамма и в результате определяют среднюю летальную дозу, при которой погибает 50% птиц или белых мышей, взятых в опыт (LD50), при разных спосо-бах заражения. Голубей или цыплят целесообразнее заражать внутримышечно, а бе-лых мышей подкожно, различными разведениями пастереллезных культур.[2]

Серологическая диагностика

Применяется реакция агглютинации.

Ценные данные реакции агглютинации получают при идентификации пастерелл и установлении их различных серотипов, в особенности если в реакции используют вы-сокоактивные сыворотки, полученные гипериммунизацией кроликов или крупного рога-того скота штаммами пастерелл, выделенными от птиц.

РА ставят по общепринятой методике в пробирках на формалинизированном фос-фатном буфере с разведением сывороток 1:10, 1:20 и т.д. дозировка компонентов для реакции такова: 0.5 мл сыворотки + 1 мл взвеси антигена. Реакцию учитывают после инкубирования в течение 18 часов при 37⁰ и выдерживания в термостате в течение 4-5 часов при комнатной температуре. Контролями антигена служат буферный раствор и нормальная кроличья сыворотка. Антиген считается непригодным для реакции, если в одном из контролей наблюдают агглютинацию.[2]

Аллергическая диагностика

Для прижизненной диагностики хронически протекающего пастереллеза птиц мик-робоносительства этого микроба некоторыми авторами были испытаны аллергические препараты, но положительных результатов в производственных условиях не было получено.

В последнее время вопросы аллергической диагностики пастереллеза птиц не изучаются, и в связи с ежегодной заменой поголовья маточных стад вновь выращен-ным молодняком вряд ли в этом есть необходимость.[2]