Задача 5.

1. Для бактерий рода Salmonella характерно наличие следующих ан­тигенов: О-антигена, называемого соматическим, Н-антигена (жгути­кового) и К-антигена (футлярного, или оболочечного).

О-антиген термостабилен, расположен в клеточной стенке, по своей природе является полисахаридно-белково-липидным комплек­сом. Антигенная специфичность О-антигена связана с полисахаридом, который неоднороден и у сальмонелл одного вида состоит из несколь­ких антигенных рецепторов. Антигенные рецепторы обозначаются цифрами 1,2,3,4...и т.д.

Футлярные К-антигены термолабильны, находятся в клеточной стенке более поверхностно, чем О-антиген. У сальмонелл обнаруже­ны относящиеся к К-антигенам М-Аг и Vi-Ar.

Н-антиген термолабилен, по химической природе является бел­ком (флагеллин), располагается в жгутиках. У бактерий одного и того же вида Н-антиген может состоять из двух антигенных комплексов, отличающихся по серологической специфичности. Такие бактерии называются двухфазными и могут существовать в двух фазах, для каж­дой из которых характерно наличие соответствующих антигенных ком­плексов.

2.

Этап	Ход исследования	Результат
Предвари­тельный этап	Посев исследуемого материала на селенитовую среду или среду Мюллера	Рост культуры вызывает помутнение среды
1-й	Посев исходного исследуемого материала или пересев со среды обогащения на чашки со средами Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агар	На чашках выросли различного вида колонии, в том числе полупрозрачные бесцветные лактозонегативные на средах Эндо и Плоскирева; коричневые и черные - на висмут-сульфит агаре
2-й	Пересев подозрительных колоний уколом и штрихом на комбинированные среды суспензируют в дистиллированной, воде и засевают на тест-системы API-20 Е или др.	На среде Кл игл ера: столбик желтый, скошенная часть розового цвета, почернение в нижней части среды (культура lac-,glu+H2S),B среде -пузырьки газа. На среде Рассела: столбик синего Цвета, скошенная часть розовая (культура lac-. glu+), пузырьки газа
	Идентификация выделенной культуры: а) изучение морфологических свойств в мазке, окрашенном по Граму; б) учет биохимического тестирования в тест-системе API-20 E; в) серологическая идентификация: 1. реакция агглютинации на стекле с поливалентной сальмоиеллезной О-сывороткой (рецепторы 0-2, О-4, О-7. 0-9; могут входить и другие рецепторы);	а) при микроскопии видны небольшие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные беспорядочно; б) результаты на API-20 E тест-системе; в) I. При положительной реакции культура относится к ролу Salmonella; 2.0-2 0-4 0-7 0-9
3-й	2. Реакция агглютинации на стекле с отдельными монорецепторными 0- сыворотками, входившими в состав поливалентной сыворотки для определения серогруппы сальмонелл; 3. реакция агглютинации на стекле с монорецепторными Н-сыворотками для определения вида (серовара); г) постановка теста на определение фаготипа д) проверка чувствительности культуры к антибиотикам методом бумажных дисков.	Культура относится к серогруппе… 3. Культура является S..... г) Культура является фаготипом ... д) Учет чувствительности к антибиотикам
4-й	Учет полученных результатов и заключение	Заключение: из ... .(материала) больного выделена культура S...., типичная по свойствам, чувствительна к антибиотикам ...:

3. Серологическая идентификация сальмонелл проводится в ре­акции агглютинации на стекле с агглютинирующими адсорбирован­ными сальмонеллезными О- и Н-сыворотками. Такие сыворотки получают методом адсорбции антител по Кастеллани из видовых им­мунных сывороток (путем насыщения сыворотки родственными бак­териями, на которых адсорбируются группоспецифические антитела). Агглютинирующие адсорбированные сальмонеллезные сыворотки мо­гут быть поливалентными и монорецепторными, т.е. содержать не­сколько различных антител (рецепторов) или только одно.

Последовательность серологической идентификации выделенной культуры:

1. Для установления принадлежности культуры к роду Salmonella, а именно к наиболее распространенным серогруппам - А, В, С, D, Е - культуру испытывают в реакции агглютинации с адсор­бированной поливалентной О-сывороткой, содержащей антите­ла против антигенных рецептеров 2, 4, 7, 9, 3, 10. При необходимости используют монорецепторные О-сыворотки про­тив редких серогрупп. При диагностике брюшного тифа, пара­тифа А и паратифа В можно использовать смесь О-сывороток, содержащих антитела к рецепторам 2, 4, 9.

2. При положительном результате для определения принадлежно­сти испытуемой культуры к определенной серологической группе ставят реакцию агглютинации раздельно с каждой монорецепторной О-сывороткой, входившей в состав поливалентной: ре­цептор 2 (серогруппа А), рецептор 4 (серогруппа В), рецептор 7 (серогруппа С), рецептор 9 (серогруппа D) и т.д.

3. После установления серогруппы, к которой относится культура, определяют ее видовую принадлежность (серовариант) с помо­щью реакции агглютинации с адсорбированными монорецептор­ными Н-сыворотками против Н-антигенов 1-й фазы сальмонелл, входящих в состав данной серогруппы. Далее проводят реак­цию агглютинации с адсорбированными Н-сыворотками против Н-антигенов 2-й фазы и окончательно устанавливают антиген­ную формулу испытуемой культуры.

4. Отравление остатками пищи.

5. Среда Клиглера: комбинированная, дифференциально-диагностическая, плотная, в пробирках в виде скошенного столбика». Цвет среды: красновато-бурый. Компоненты: МПА, лактоза 1%, натрий тиосульфат, индикатор. Назначение: для отсева «подозрительных» колоний.