Объем инъекционных растворов в сосудах

Номинальный объем, мл	Объем заполнения, мл		Количество сосудов для контроля заполнения, шт
	невязкие растворы	вязкие растворы
1,0	1,10	1,15	20
2,0	2,15	2,25	20
5,0	5,30	5,50	20
10,0	10,50	10,70	10
20,0	20,60	20,90	10
50,0	51,0	51,50	5
Более 50,0	На 2% более номинального	На 3% более номинального

Объем раствора, выбранного из сосуда шприцем, после вы­теснения воздуха и заполнения иглы или после выливания в цилиндр не должен быть меньше номинального.

Лекарственные средства для парентерального применения подвергают стерилизации в соответствии с требованиями статьи «Стерилизация» и указаниями частных статей.

Определение рН. Водородным показателем (рН) называется отрицательный десятичный логарифм активности ионов водорода. Измерение рН заключается в сравнении потенциала индикаторного электрода, погруженного в испытуемый раствор, с потенциалом того же электрода в стандартном буферном растворе с известным значением рН.

Потенциометрический метод измерения рН.

Потенциомет­рическое определение рН заключается в измерении ЭДС эле­мента, состоящего из двух электродов: индикаторного, потен­циал которого зависит от активности ионов водорода, и электрода сравнения - стандартного электрода с известной величи­ной потенциала.

В качестве индикаторных электродов для измерения рН на практике применяют стеклянный и хингидронный электроды. В отдельных случаях в качестве индикаторного электрода можно использовать водородный электрод.

Для измерения рН применяют высокоомные потенциометры различных систем или pH-метры, шкала которых градуиро­вана в милливольтах или непосредственно в единицах рН. Калибровка и проверка pH-метров проводится по стан­дартным буферным растворам.

При измерении рН контролируемых растворов отсчет вели­чины рН по шкале прибора производят после того, как показа­ния прибора примут установившееся значение. Время уста­новления показаний определяется буферными свойствами и температурой раствора (обычно время установления показа­ний не превышает 2 мин).

Определение рН проводят при 25+2º С, в противном случае необходимо сделать соответствующие поправки.

При измерении рН сильно кислых и сильно щелочных рас­творов при температурах близких к 0º С, или при измерении рН растворов с очень малой буферной емкостью (например, дистиллированной воды) время установления показаний мо­жет достигать нескольких минут.

При измерении рН в неводных и смешанных раствори­телях, а также в некоторых коллоидных системах следует иметь в виду, что полученные значения рН являются услов­ными.

Колориметрический метод измерения рН. Колориметри­ческий метод определения рН основан на свойстве индика­торов изменять свою окраску в зависимости от активности ионов водорода в определенном интервале рН. Колоримет­рическое определение рН производят при помощи индикато­ров и стандартных буферных растворов.

Сначала определяют приблизительную величину рН ис­пытуемого раствора с помощью универсального индикатора, для чего 2 мл испытуемого раствора смешивают в ма­ленькой фарфоровой чашке с 5 каплями универсального индикатора и полученную окраску сравнивают с цветной шкалой.

После приближенного определения рН испытуемого рас­твора выбирают 5-6 буферных растворов, пригодных для данной области рН и отличающихся друг от друга на 0,2. В одну из пробирок наливают 10 мл испытуемого раствора, в другие - выбранные буферные растворы. Во все пробирки прибавляют по 2-3 капли раствора индикатора и сравнивают окраску испытуемого раствора с окрасками буферных рас­творов.

рН испытуемого раствора равен рН буферного раствора, окраска которого совпадает с окраской испытуемого раствора.

Индикатор следует выбирать таким образом, чтобы пред­полагаемая величина рН попала в центральную часть интер­вала перехода окраски индикатора. Концентрация индикатора в испытуемом и буферном растворах должна быть одина­ковой.

Универсальный индикатор. Состав: бромкрезолового пурпурового – 0,06 г; бромкрезолового зеленого – 0,01 г; метилового оранжевого – 0,02 г; тропеолина 00 – 0,04 г; фенолфталеина 0,04 г; тимолового синего – 0,05 г; бромтимолового синего – 0,1 г. Растворим в 95% спирте. Предназначен для колориметрического определения концентрации водородных ионов. Индикатор изменяет окраску в интервале рН 1,0-10,0.

рН	Окраска	рН	Окраска
1,0	красно-фиолетовая	6,0	зеленовато-желтая
2,0	розово-оранжевая	7,0	желто-зеленая
3,0	оранжевая	8,0	зеленая
4,0	желто-оранжевая	9,0	сине-зеленая
5,0	желтая	10,0	серовато-синяя

Потенциометрический метод имеет преимущества по срав­нению с колориметрическим, он более точен и имеет меньше ограничений, связанных с присутствием в растворе окисли­телей или восстановителей, с белковой или солевой ошибка­ми. Потенциометрический метод в отличие от колориметри­ческого может применяться для определения рН в окрашенных, мутных или гелеобразных растворах.

Стерильность. Образцы готовых лекарствен­ных средств отбирают для контроля от каждой серии в количест­вах, зависящих от вида стерилизации и числа единиц (ампул, флаконов и т. д.) в серии. В случае, если лекарственное средство стерилизуют насыщен­ным паром при избыточном давлении 0,11 + 0,02 МПа (1,1 + 0,2 кгс/ см²) и температуре (121 + 1) °С, образец состоит из 10 единиц. При других видах стерилизации минимальное ко­личество образцов для анализа определяют по формуле п = 0,,где п - число единиц в образце, а N - число единиц в исследуемой серии препарата, при этом п должно быть не менее 3 и не более 40.

Испытание лекарственного средства на стерильность проводят с использованием фильтрационной установки. Испытуемое лекарственное средство растворяют или суспен­дируют (если в этом есть необходимость) в соответствующей стерильной жидкости и полученный раствор или суспензию пропускают через стерильную мембрану. После отмывания мембраны ее извлекают, разрезают стерильными ножницами пополам и одну половину помещают в колбу со 100 мл тиоглеколевой среды, вторую – в колбу со 100 мл среды Сабуро. Питательные среды с помещенными в них фильтрами выдерживают при температуре от 30 до 35ºС (тиогликолевая среда) и от 20 до 25ºС (среда Сабуро) в течение 7 суток при ежедневном просмотре. Посевы просматривают в рассеянном свете ежедневно и по окончании периода инкубации. Наличие роста микроорганизмов в питательных средах оценивают визуально по появлению мутно­сти, пленки, осадка и других макроскопических изменений. Выяв­ленный рост микроорганизмов необходимо подтвердить микроскопированием мазков, окрашенных по Граму. Испытуемый препарат считают удовлетворяющим требова­ниям испытания на стерильность при отсутствии роста микроорганизмов. При обнаружении роста хотя бы в одной пробирке (колбе, флаконе) его подтверждают микроскопированием и пов­торяют испытание на таком же количестве образцов, как и в пер­вый раз. При отсутствии роста микроорганизмов при повторном посеве испытуемый препарат считают удовлетворяющим требова­нию испытания на стерильность. В случае роста микроорганизмов при повторном посеве, морфологически сходных с микроорганизмами, выявленными в первичном посеве, испытуемый препарат ­ считают нестерильным.

Токсичность. Испытание проводят на здоровых белых мышах обоего пола массой 19-21 г, на которых ранее не проводили никаких испыта­ний.

За 24 ч до испытания и во время его проведения животные должны находиться в помещении с постоянной температурой. За 2 ч до взвешивания и отбора животных для проведения испыта­ний у них отбирают корм и воду.

Каждую серию препарата испытывают на 5 мышах. Раство­ритель, концентрация раствора (тест-доза) и способ введения указаны в частных статьях.

Раствор препарата, подлежащего испытанию, подогревают до 37° С и в объеме 0,5 мл вводят в хвостовую вену мыши со ско­ростью 0,1 мл/ с, если в частной статье нет других указаний.

Если в частной статье предусмотрен иной путь введения пре­парата мышам, объем раствора, вводимого в брюшную полость, под кожу или в желудок, может быть увеличен до 1 мл. Введение в желудок производят шприцем посредством инъекционной иглы, на конце которой имеется наплавленная олива, или при помощи другого приспособления, обеспечивающего поступление раствора или взвеси препарата в желудок.

Наблюдение за животными ведут в течение 48 ч, если в част­ной статье нет других указаний.

Препарат считают выдержавшим испытание, если в течение предусмотренного срока наблюдения не погибнет ни одна из по­допытных мышей.

В случае гибели одной мыши опыт повторяют на 5 мышах массой 20±0,5 г; в случае гибели при первоначальном испытании двух мышей повторное испытание проводят на 15 животных. Если при повторном испытании ни одна мышь не погибнет, т. е. суммарная­ гибель животных в двух опытах не превысит 10 %, препарат считается выдержавшим испытание. В противном случае препарат бракуют.

Для испытания на токсичность отбирают по 2 флакона или ампулы от каждой серии, содержащей не более 10000 флаконов или ампул. При количестве в серии флаконов или ампул более 10000 отбирают по 3 флакона или ампулы от каждой серии. Для проведения испытания из отобранных флаконов или ампул готовят общий раствор (смешанная проба). Общее количество отобран­ного лекарственного средства должно быть достаточным для про­ведения трех полных испытаний.

Пирогенность. Испытанию подлежат все лекарственные средства для парен­терального применения при объеме одноразовой дозы 10 мл и более, а также при меньшей дозе, если есть указание в частной статье.

Испытание проводят на здоровых кроликах обоего пола, не альбиносах, массой 2-3,5 кг, содержавшихся на полноценном рационе. Каждый кролик должен находиться в отдельной клетке в помещении с постоянной температурой. Колебания температу­ры не могут превышать +3°С. При уборке клеток и взвешивании животных их оберегают от возбуждения (избегать шума и резких движений) .

В течение недели, предшествующей опыту, кролики не долж­ны терять в массе. Взвешивание их проводят до дачи корма не менее 3 раз через день. Животные, теряющие в массе, к опыту не пригодны. В течение 3 суток перед испытанием у каждого подо­пытного кролика измеряют температуру. Измерения проводят ежедневно утром до дачи корма при помощи медицинского ртут­ного или электротермометра, позволяющего определить темпера­туру с точностью до 0,1° С. Датчик термометра вводят в прямую кишку на глубину 7-9 см (в зависимости от массы кролика) за внутренний сфинктер на время, необходимое для достижения максимальной температуры. Исходная температура подопытных кроликов должна быть в пределах 38,5-39,5°С. Животные с бо­лее высокой или более низкой температурой для опыта непри­годны. Кроме того, кроликов, впервые предназначаемых для испытания лекарственных средств, проверяют на реактивность путем внутривенного введения 10 мл/кг 0,9 % стерильного непи­рогенного раствора натрия хлорида. В случае изменения температуры у кроликов более чем на +0,4°С животные считаются непригод­ными для опыта.

Не позднее чем за 18 ч до опыта кроликов переводят в поме­щение, в котором осуществляют испытание на пирогенность. Оно должно проводиться в отдельной комнате с постоянной темпера­турой, не отличающейся от температуры помещения, в котором кролики постоянно содержались до опыта, более чем на +2° С, и с колебаниями во время испытания, не превышающими 2°С, изолированной от шума, в спокойной обстановке. Вечером нака­нуне опыта у животных отбирают остаток корма. До и во время опыта животные корма не получают (воду дают без ограни­чения) .

Если нет других указаний в частной статье, для испытания отбирают не менее 2 флаконов или ампул от каждой серии, со­держащей от 1000 до 10000 флаконов или ампул. При количе­стве в серии флаконов или ампул более 10 000 отбирают по3 флакона или ампулы от каждой серии. Из отобранных флако­нов или ампул готовят общий раствор (смешанная проба). От серии, содержащей до 1000 флаконов или ампул, для испытания отбирают по 1 флакону или ампуле.

Вода для инъекций или другие применяемые растворители, а также шприцы и иглы должны быть стерильными и непироген­ными. Испытуемые лекарственные средства должны быть сте­рильными. Их вводят кроликам в ушную вену. Другие пути вве­дения указывают в частной статье на лекарственное средство. Для каждого кролика берут отдельную иглу. Растворы испы­туемых лекарственных средств, подогретые до 37°С (при отсут­ствии других указаний в частных статьях), вводят в количествах и растворителях, предусмотренных соответствующими частными статьями. Для испытания на пирогенность воды для инъекций предварительно готовят из нее изотонический 0,9 % раствор натрия хлорида. Натрия хлорид должен быть стерильным и не­пирогенным. Количество вводимого изо­тонического 0,9 % раствора натрия хлорида составляет 10 мл на 1 кг массы кролика. Все количество раствора, предварительно нагретого до 37° С, вводят в течение 2 мин.

Испытуемый раствор проверяют на 3 кроликах. Группа долж­на состоять из животных, близких по массе (отличающихся не более чем на 0,5 кг). Перед введением раствора у кролика дваж­ды с интервалом 30 мин измеряют температуру. Различия в по­казателях температуры не должны превышать 0,2° С. В против­ном случае кролик для испытания не используется. Результат последнего измерения принимают за исходную температуру. Раствор вводят не позднее чем через 15--30 мин после послед­него измерения температуры.

Последующее измерение температуры при внутривенном вве­дении испытуемого раствора проводят 3 раза с промежутками в один час. При других путях введения - 5 раз с промежутками в один час, если в частной статье нет других указаний.

Воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают непирогенными, если сумма повышений температуры у 3 кроликов меньше или равна 1,4° С. Если эта сумма превы­шает 2,2° С, то воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают пирогенными. В случаях, когда сумма повы­шений температуры у 3 кроликов находится в пределах от 1,5 до 2,2° С, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах. В этом случае воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают непирогенными, если сумма повышений темпе­ратуры у всех 8 кроликов не превышает 3,7° С. Если же эта сум­ма равна 3,8° С или больше, воду для инъекций или раствор лекарственного средства считают пирогенными.

Если в частной статье на лекарственное средство нет других указаний, случаи понижения температуры у кроликов принимают за нуль.

Кролики, бывшие в опыте, могут быть использованы для оп­ределения пирогенности повторно, но не ранее чем через 3 сут, если введенный им до этого раствор лекарственного средства или вода для инъекций были непирогенными. Если же введенный раствор лекарственного средства или вода для инъекций оказа­лись пирогенными, кролики могут быть использованы для даль­нейших опытов через 2 нед. При повышении температуры у кро­ликов в подобных случаях на 1,2° С и более они используются через 3 нед. Если исследуемые вещества обладают антигенными свойствами, то одних и тех же кроликов нельзя использовать для испытания повторно (если нет специальных указаний в част­ной статье).

Испытание на механические включения лекарственных средств. Под механическими включениями подразумеваются посторонние нерастворимые частицы в виде ворсинок (кроме пузырьков газа), случайно присутствующие в растворах. Другие твердые частицы не допускаются. Контроль проводится визуальным методом невооруженным глазом на черном и белом фо­нах. Зона контроля при просмотре должна быть освещена электрической лампой накаливания или лампой дневного света соответствующей мощно­сти в зависимости от степени окраски растворов или материалов упаковки согласно таблице 2.

Таблица 2