генетика к 2 кр
.pdf
С-окрашенные хромосомы арабидопсиса
С-окрашенные хромосомы ячменя
Хромосомы пшеницы
Гомеология хромосом пшеницы
|
Стадия |
Условия |
Процесс |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Проращивание |
В чашках Петри в |
Прорастание семян |
|
|
|
|
термостате (24° |
|
|
|
|
C ) |
|
|
|
|
|
|
|
Предобработка и |
Фиксация в |
Обработка удаляет |
|
|
фиксация корешков с |
уксусном |
пуриновые основания |
|
|
дальнейшей мацерацией |
алкоголе 3:1, |
(аденин, гуанин), что |
|
|
|
|
мацерация в 45% |
позволяет разрезать |
|
|
|
уксусной кислоте |
сахарофосфатный остов |
|
|
|
или 0.5% |
ДНК без его разрушения |
|
|
|
ацетокармине |
для снятия |
|
|
|
|
сверхспирализации, |
|
|
|
|
частичное удаление |
|
|
|
|
белков |
|
|
|
|
|
|
Стадия |
Условия |
Процесс |
|
|
|
Дегидратация |
В 95% (100%) |
Дегидратация |
|
этаноле |
|
Денатурация |
В Ba(OH)2 (или |
Благодаря |
|
NaOH) от 5 до 15 |
щелочной среде |
|
минут при |
происходит разрыв |
|
температуре 50- |
водородных |
|
55° C |
связей между |
|
|
основаниями и |
|
|
распаду ДНК на две |
|
|
одноцепочечные |
|
|
нити |
|
Стадия |
Условия |
Процесс |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
Ренатурация ДНК |
В солевом |
Приводит к ренатурации ДНК, |
||
|
|
растворе |
изменяет состояние ДНП. Основа |
|
|
|
цитрата |
С-окрашивания избирательная |
|
|
|
натрия SSC |
устойчивость хроматина к |
|
|
|
(или в NaCl) |
экстрагированию. Ренатурируют |
|
|
|
Время и |
только высокоповторяющиеся |
|
|
|
температура |
участки, уникальная и средне |
|
|
|
зависят от |
повторяющаяся ДНК не |
|
|
|
конкретной |
ренатурирует |
|
|
|
методики |
|
|
|
|
|
|
|
Стадия |
Условия |
Процесс |
Окрашивание |
1. В буферном растворе Гимза |
Избирательное |
|
при периодическом контроле |
связывание |
|
под микроскопом. |
красителя с ДНП |
|
2. Промывка |
|
|
дистиллированной водой. |
|
|
3. Высушивание на воздухе, |
|
|
оставление в ксилоле на ночь. |
|
|
4. Высушивание на воздухе. |
|
|
5. Помещение препарата под |
|
|
покровное стекло с Канадским |
|
|
бальзамом и т.д. |
|
Использование С-бэндинга в научных исследованиях
и его практическое применение
1. Изучение полиморфизма распределения С-бэндов:
1. проведение паспортизации сортов;
2. оценка сорта на гетерогенность;
2. Установление прицентромерных, пара- и перицентрических перестроек, дополнений и замещений:
1. выявление линий и сортов с ценным чужеродным генетическим материалом
3. Позволяет устанавливать эволюцию генома у амфиплоидов
4. Несмотря на свои преимущества, метод в ряде случаев обладает низкой разрешающей способностью
Номенклатура бэндов
Парижская конференция “Standartization in Human Cytogenetics, Birth Defects”, 1971 год.
Каждый ГХ блок идиограммы мягкой пшеницы, когда-либо выявленный, получил свой номер, соответствующий положению на плече
Первоначальный модельный объект – мягкая пшеница сорта Chinese Spring