- •Методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний
- •1. Выделение чистых культур патогенных клостридий
- •2. Причины высокой чувствительности строгих анаэробов к кислороду объясняют следующими обстоятельствами:
- •Результаты посева на среды Плоскирева, Эндо, мпа
- •3. Вопросы к итоговому контролю по теме «Морфология и физиология бактерий».
- •Краткая характеристика основных санитарно-показательных микроорганизмов продуктов питания
- •Правила и техника взятия смывов для санитарно-бактериологических исследований на объектах питания
- •Регистрация чувствительности к антибиотикам выделенной культуры стафилококка
- •Механизм действия антибиотиков
- •Лекарственная устойчивость бактерий
- •Биохимические основы антибиотикорезистентности
- •Определение действия фактора проникновения по распространению краски в коже кролика
- •Определение гемотоксина (на мпа с кровью)
- •Результаты реакции агглютинации
- •Результаты опыта рск
- •Классификация диагностических серологических реакций по природе антигена, технике постановки и механизму протекания
- •Краткая общая схема иммунного ответа и кооперативного взаимодействия макрофагов, т- и в – лимфоцитов.
- •Вопросы к итоговому занятию «Инфекция и иммунитет»
Краткая характеристика основных санитарно-показательных микроорганизмов продуктов питания
1. Под БГКПпонимают грамотрицательные, не образующие спор палочки, сбраживающие лактозу при температуре 36±1 °С с образованием кислоты и газа. При этом учитывают как цитратположительные, так и цитратотрицательные разновидности микроорганизмов.
2. Энтерококки грамположительные кокки, располагающиеся парами, короткими или длинными цепочками, каталазоотрицательные. Типовой видEnterococcus faecalis. Согласно СанПиН 2.3.2.1078-01, количество энтерококков регламентировано в ряде быстрозамороженных готовых блюд:
в блюдах из мяса животных и птиц не более 1000 КОЕ/г;
в блюдах из рубленого мяса животных и птиц, а также в блинчиках с мясом не более 2000 КОЕ/г.
3. Сальмонеллывызывают первичные инфекции у животных и человека, заканчивающиеся нередко летальным исходом, а также осложняют течение заболеваний вирусной и бактериальной этиологии. У переболевших животных длительное время отмечается бессимптомное сальмо-неллоносительство. При употреблении инфицированных продуктов животного происхождения (мяса, молока, яиц) сальмонеллы вызывают у человека пищевые отравления (токсикоинфекции).
4. Сульфитредуцирующие клостридиикрупные неподвижные бациллы длиной 4-8 мкм и шириной 1-1,5 мкм, в живом организме образуют капсулы, а в окружающей средецентральные или субтерминальные овальные споры. Типовой представительClostridium perfringens.
5. Стафилококки бактерии, имеющие сферическую форму и размер 0,5-1,5 мкм, в результате деления более чем в одной плоскости образуют гроздевидные скопления, неподвижные, грамположительные. Типовой видS. aureus. Образуют внеклеточные ферменты и токсины и при определённых условиях могут стать причиной пищевых интоксикаций.
6. Бактерии рода Proteus - полиморфные грамотрицательные палочки размерами 1-3 мкм в длину и 0,4 мкм в ширину. Располагаются попарно или цепочками, спор и капсул не образуют, подвижны. К роду относятся два вида микроорганизмовP. mirabilis иP. vulgaris. Присутствие в пищевых продуктах микроорганизмов этой группыпризнак начала гнилостных изменений. Указанные бактерии также могут быть причиной пищевых токсикоинфекций.
7. Listeria monocytogenes подвижная, грамположительная, микроаэ-рофильная, не образующая спор палочка, патогенная для человека, животных и птиц. Заболевание характеризуется септическими явлениями, поражением центральной нервной системы. Наряду с тяжёлыми клиническими проявлениями встречаются лёгкие формы заболевания и носительство. Листерии длительно сохраняются (в высушенном состояниидо 7 лет) и могут даже размножаться в пищевых продуктах при низких температурах хранения. Как факторы передачи листериоза наибольшую опасность представляют мясные (мясо заражённых свиней) и молочные продукты.
Правила и техника взятия смывов для санитарно-бактериологических исследований на объектах питания
Взятие смывов производится с помощью стерильных увлажненных ватных тампонов. Стерильные ватные тампоны на стеклянных, металлических или деревянных палочках, вмонтированных в пробирки с ватными пробками, заготавливают заранее в лаборатории. В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливается (в условиях бокса над горелкой) по 5 мл стерильного 0,1% водного раствора пептона или изотонического раствора хлорида натрия таким образом, чтобы ватный тампон не касался жидкости. Непосредственно перед взятием смыва тампон увлажняют наклонением пробирки или опусканием тампона в жидкость. В процессе отбора смывов рекомендуется неоднократное смачивание тампонов.
При взятии смывов необходимо пользоваться следующими рекомендациями:
1) Из оборудования следует обращать внимание на разделочные доски, мясорубки, производственные столы для готовой пищи, особенно в цехе приготовления холодных закусок.
2) Смывы с рук, с санитарной одежды, полотенец берутся в основном у работников, имеющих дело с продукцией, не подвергающейся в дальнейшем тепловой обработке (персонал кухни, холодного цеха, раздатчицы, буфетчицы, официанты, продавцы).
3) Смывы с крупного оборудования и инвентаря берут с поверхности в 100 см2, для ограничения поверхностей используют шаблон (трафарет), сделанный из проволоки, металлической пластинки. Трафарет имеет площадь 25 см2, чтобы взять смывы с площади в 100 см2, его накладывают 4 раза в разных местах поверхности контролируемого объекта.
4) При взятии смывов с мелких инструментов обтирается вся поверхность предмета, при заборе смывов с тарелок протирают всю внутреннюю поверхность. При взятии смывов с мелких предметов одним тампоном протирают три одноименных объекта три тарелки, три ложки и т.п. У столовых приборов протирают их рабочую часть.
5) При исследовании стаканов протирают внутреннюю поверхность и верхний наружный край стакана на 2 см вниз.
6) При взятии смывов с рук протирают тампоном ладонные поверхности обеих рук, проводя не менее 5 раз по каждой ладони и пальцам, затем протирают межпальцевые пространства, ногти и подногтевые пространства.
7) При взятии смывов с санитарной одежды протирают 4 площадки по 25 см2нижнюю часть каждого рукава и 2 площадки с верхней и средней частей передних пол спецовки. С различных мест полотенца берут 4 площадки по 25 см2.
После проведения смыва тампон вкладывают в ту же пробирку, погружая в жидкость. На каждой пробирке отмечают порядковый номер. Под тем же номером записывают в протокол наименование объекта, с которого взят смыв. При взятии смывов с рук и санитарной одежды записывают фамилию, имя и отчество сотрудника, выполняемую работу (профессия, участок работы). Смывы доставляют в бактериологическую лабораторию в течение 2 ч. Допускается их хранение и транспортирование не более 6 ч при температуре +1-10 °С.
З А Н Я Т И Е 13
Дата ______________
Тема: Химиопрепараты. Антибиотики. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.
План занятия:
1. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам (разбор схемы).
2. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
а) метод дисков;
б) метод серийных разведений;
в) определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста.
Методические указания
1.Для определения чувствительности бактерий (на примере стафилококка) к антибиотикам взять петлей колонию, размешать ее в пробирке с МПБ, чтобы получилось заметное помутнение бульона. 2-3 капли полученной эмульсии нанести в центр чашки с МПА и тщательно растереть по всей поверхности агара. Разделить дно чашки с тыльной стороны карандашом на 4 сектора, надписать на секторах названия антибиотиков и положить в центр каждого сектора прокаленным и остуженным пинцетом диск с соответствующим антибиотиком.
Измерить и записать в таблицу диаметр зоны задержки роста стафилококка каждым антибиотиком. Сформулировать и записать вывод о степени чувствительности выделенной культуры к различным антибиотикам.