51

Для качественного анализа разработан метод тонко-слойной храмотографии на пластинках “Силуфол” в системе растворителей 95 % этиловый спирт – концентрированный раствор аммиака (16 : 4,5). Для обнаружения органических кислот пластинки обрабатывают раствором бромкрезолового зеленого. На пластинках проявляется 4 пятна желтого цвета на бирюзовом фоне. Для проявления аминокислот используют раствор нингидрина.

Органические кислоты в растении и каланхине находятся в свободном и связанном состоянии, поэтому количественное определение суммы кислот было отработано с использованием метода ионно-обменной хромотографии с последующим титрованием 0,1 М раствором едкого натрия по бромтимоловому синему. В качестве ионно-обменника использовали катионит КУ-2-8.

Расчет содержания веществ кислотного характера в каланхине проводили в пересчете на яблочную кислоты.

Отсутствие систематической ошибки было доказано опытами с добавками яблочной кислоты.

Методы анализа лекарственных форм качественные и количественные унифицированы с методами анализа субстанции каланхина и сырья. Относительная ошибка определения при анализе субстанции – 2,83 %; гранул каланхое – 4,12 %; линимента – 4,28 %. Содержание суммы биологически активных кислотных соединений в пересчете на яблочную кислоту нормируется “не менее 45 %” в субстанции каланхина.

Помимо разработки препарата из сырья одного вида (побеги каланхое перистого) были обследованы коллекционные образцы других видов каланхое. Из представленных образцов получены сухие экстракты с различным содержанием БАВ. Данные представлены в таблице:

NN	Образцы сырья		Влажность сы-	Содержание	Содержание сум-
п/п			рья, %	суммы кислот в	мы кислот в сухом
				сырье, %	соке,%
1	Kalanchoe pinnata Pers.		91,33	2,4331	28,0598
	Syn.
2	Bryophyllum	grandifolium	93,88	2,1141	34,55
	Tent.
3	Kalanchoe mocabica Hort.		95,29	1,5332	32,59
4	K. lugardii Bullock		95,29	1,7968	38,15
5	K.quillaumini	Raymond-	95,11	2,1824	44,63
	Ham

52

6	K.longiflora Schleclt.		91,69	1,9169	23,08
7	K.tubiflora Hamet.		94,94	2,0997	41,49
8	K.brasilienses Cambess.		93,95	1,8965	31,35
9	K.laciniata DC.Pl.		94,93	1,6461	32,47
10	K.somalensis Hook.		93,09	1,5263	22,09
11	K.ambolensis Humbert		92,96	1,3908	18,76
12	K.lugardii Sp.		91,49	1,9101	38,87
13	K.delagoensis Echl.		94,02	1,7702	42,01
14	Bryophyllum	scandens	94,87	1,8843	36,69
	H.Perrier

N.V. Tareeva, V.F.Ohotnikova, T.V.Kachalina, V.I. Glysin

Calanchin – the medicine from the hothous

There hasbeen elabora tel the drug calanchin from sprouts of calanchoe and its appliing forms (ready mode).

АЗАРКОВА А.Ф., ДАВЫДОВА В.Н., БУРОВА А.Е., КИРЬЯНОВ А.А., НЕСТЕРОВ Н.Н. ВИЛАР, Москва, Россия

ИЗУЧЕНИЕ СОСТАВА ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ СУХОГО ЭКСТРАКТА АРНИКИ ОБЛИСТВЕННОЙ (Arnica foliosa Nutt.)

ВВИЛАРе были проведены исследования по технологии получения сухого экстракта арники облиственной. Фармакологическое изучение этого экстракта показало, что он обладает кровоостанавливающим, ранозаживляющим и противоязвенным действием. Проведено качественное и количественное определение состава веществ, входящих в экстракт арники.

Данный экстракт был получен путем экстракции сырья водным спиртом, последующего концентрирования извлечения, очистки и сушки водного остатка в распылительной сушилке.

Вкачестве сырья использовали траву арники облиственной, выращенной на опытном участке ВИЛАРа и собранной в период массового цветения. Трава арники является новым видом растительного сырья. Ранее в его качестве использовали соцветия арники облиственной.

53

Экстракт арники сухой – аморфный порошок от серо-желтого до коричневого цвета, слегка комкуется, гигроскопичен. Растворим в воде и водном спирте.

Состав природных соединений экстракта был изучен путем селективного разделения его веществ и последующей идентификации. Для этого экстракт был фракционирован по методу избирательного извлечения группы веществ органическими растворителями. Водный раствор экстракта последовательно обрабатывали хлороформом, диэтиловым эфиром, этилацетатом и н-бутанолом. Полученные извлечения упаривали досуха, сушили до постоянной массы, взвешивали. Высушенные остатки фракций изучали на присутствие различных соединений с помощью диагностических реактивов, тонкослойной хроматографии (ТСХ), а также УФ- и ИК-спектороскопии.

При изучении хлороформной фракции были обнаружены сесквитерпеновые лактоны и кумарины. Липофильная фракция с 5 % раствором динитробензола в толуоле давала темнокоричневую окраску (сесквитерпеновые лактоны) [1]. Суммарные лактоны были выделены препаративно на пластинках Алуфол (20 х 20 см). Хромотографирование проводили в системе пейтролейный эфир-бензол-хлороформ-метанол (5:4:1:2). Детектирование зоны целевых веществ осуществляли, как описано в работе [2]. Вещества с сорбента элюировали хлороформом. Элюат фильтровали и упаривали досуха, остаток растворяли в капле хлороформа и снимали ИК-спектр в области 1700-1800 см –1. Наличие полосы поглощения при 1740 см –1 подтверждало присутствие сесквитерпеновых лактонов в экстракте арники [2,3].

Распределительной хромотографией на пластинках Силуфол в системе хлороформуксусная кислота-вода (4:1:1) обнаружили два кумарина Rf (0,66) и Rf (0,48). Эти вещества по положению на хроматограмме, флюоресценции в УФ 366 до и после проявления щелочью соответствовали скополетину и умбеллиферону [4,5]. ИК-спектр липофильной фракции, снятый в вазелиновом масле, имел поглощение в области 1700-1733 см –1, которое характерно для кумаринов (карбоксильная полоса сопряженного α -пирона). Находящаяся в спектре полоса поглощения при 1710 см –1 характерна для скополетина [3].

При исследовании эфирной фракции на Силуфоле в системе хлороформ-метанол (8:2), проявитель 20 % раствор серной кислоты были найдены следы лютеолина.

В этилацетатной фракции хромотографией на Силуфоле в системе хлороформ-этил- ацетат-муравьиная кислотавода (20:50:5:45) обнаружили на уровне свидетелей хлорогеновую и кофейную кислоты, а также – следы феруловой кислоты. Пятна этих веществ в УФ366 флюоресцировали голубым, а после проявления щелочью зеленовато-желтым цветом. При хроматографировании в системе хлороформ-метанол-вода (26:14:3) и обработке Силуфола 5 % спиртовым раствором хлорида алюминия было найдено четыре пятна веществ желтой ок-

54

раски, находившихся на хроматограмме в зоне монозидов. Два из них проявлялись на уровне пятен свидетелей цинарозида (лютеолин-7-глюкозид) и космосиина (апигенин-7-0- глюкозид), которые в УФ366 флюоресцировали лимонно-желтым цветом. Два пятна других монозидов имели в УФ366 желтовато-коричневую окраску [4].

Вбутанольной фракции в тех же условиях ТСХ обнаружили в зоне биозидов один флавоноид, пятно которого на хроматограмме имело желтую окраску и в УФ366 флюоресцировало лимонно-желтым цветом [4]. В этой же фракции были обнаружены дубильные вещества. Качественное определение этих веществ проводили с раствором железо-аммониевых квасцов. С данным реактивом бутанольная фракция давала черно-зеленое окрашивание, характерное для конденсированных дубильных веществ [6].

Вводном остатке после извлечения н- бутанолом были найдены белки. Для их обнаружения использовали биуретовую реакцию, проводимую с 0,5 % раствором медного купороса в щелочной среде. По окрашиванию жидкости в фиолетово-синий цвет, благодаря пептидной связи (СО-NH-), судили о наличии этих соединений в экстракте арники [7]. Кроме того, водный остаток давал при нагревании с реактивом Фелинга кирпично-красный осадок, свидетельствующий о присутствии в экстракте свободных сахаров. Из него же были выделены высоко-молекулярные соединения – полисахариды. Для этой цели водный остаток очищали от белков 10 % раствором ацетата свинца по известному методу [8]. Из очищенного водного остатка путем осаждения метанолом была выделена фракция полисахаридов, растворимых в воде [4]. Моносахаридный состав этих веществ был подтвержден положительной реакцией Селиванова [7].

Всухом остатке после отделения полисахаридов и упарки метанола были обнаружены простые сахара и аминокислоты. При двух-кратном хроматографировании этого остатка на пластинках Силуфол в системе хлолроформ-метанол-вода (61:32:7) на уровне свидетелей были найдены фруктоза, сахароза и следы глюкозы. В качестве проявителя использовали 20 % раствор серной кислоты с последующим нагреванием пластинки при температуре 100-110 0 С до появления желто-бурых пятен. В тех же условиях хроматографирования данного остатка в системе этанол-аммиак (16:4,5) и опрыскивания пластинки 0,2 % ацетоновым раствором нингидрина было отмечено шесть розовых пятен аминокислот. Из них четыре пятна находились на уровне пятен свидетелей аспарагиновой и глютаминовой кислот, гистидина и цистина [4]. При этом значительно доминировали аспарагиновая и глютаминовая кислоты.

По массе сухих остатков судили о процентном соотношении отдельных классов веществ, входящих в экстракт арники.По данным фракционирования следует, что в экстракт арники сухой примерно входит: 3-5 % липофильных веществ (сесквитерпеновые лактоны,