стоматИностр2012 / Модуль1РУС / Практическая работа №8

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА № 11

Тема: „Химиотерапевтические препараты. Антибиотики.”

Химиотерапия инфекционных заболеваний - это лечение бактериальных, вирусных, грибковых и протозойных заболеваний с помощью химиотерапевтических средств. Эти вещества имеют очень важное свойство - избирательность действия против патогенных микроорганизмов в условиях макроорганизма. В случае, когда такие же лечебные средства используют с профилактической целью, это - химиопрофилактика.

Современному врачу нужно не только правильно назначить антибиотик или другой антибактериальный препарат, но и четко придерживаться дозы и ритма его введения. Концентрация антибиотика в тканях и жидкостях организма вместе с антимикробной активностью есть одним из основных параметров, которые определяют эффективность антибиотикотерапии.

Цель (общая): уметь оценивать антибиотикограмму для правильного назначения и выбора эффективного препарата для лечения инфекционных болезней, воспалительных процессов на следующих кафедрах.

Конкретные цели:

• Уметь объяснить единицы измерения антимикробной активности антибиотиков и определение их химиотерапевтического индекса.

• Характеризовать методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.

• Анализировать антибиотикограмму возбудителя заболевания.

• Трактовать понятие минимальной подавляющей концентрации антибиотиков.

• Оценивать концентрацию антибиотиков в биологических жидкостях.

• Трактовать принципы рациональной антибиотикотерапии.

Базовый уровень знаний - умений:

1. Готовить кратные разведения биологической жидкости, определять их концентрацию в полученных разведениях (кафедра биохимии).

2. Объяснять строение бактерий, грибов и актиномицетов (кафедра медицинской биологии).

3. Трактовать генетические механизмы лекарственной резистентности.

4. Объяснять особенности структур эукариотической клетки от прокариотической.

Для того, чтобы Вы могли понять, отвечает ли базовый уровень ваших знаний-умений необходимому, предлагаем выполнить ряд задач.

Задача 1. Если в пробирку с 1 мл биологической жидкости прибавить 9 мл физиологического раствора, то получаем разведение 1:10. Как получить разведение 1:100?

Задача 2. Объясните, пожалуйста, характерные морфологические особенности актиномицетов.

Задача 3. Как называется фактор, который поддерживает лекарственную резистентность в бактериальной клетке.

Задача 4. Различия строения прокариотической клетки от эукариотической.

Информацию для пополнения знаний-умений можно найти в следующих учебниках:

1. Березов Т.Т., Коровкин В.Ф. Биологическая химия.- М.Медицина.-1998.-С.

2. Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А. Гистология, цитология и элогия.-М.:Медицина.-1999.-

3. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология под ред. Л.Б.Борисова.-Медицинское информационное агенство.-Москва.-2002.-С. 30-32, 96.

Теоретические вопросы, на основе которых возможно выполнение целевых видов деятельности:

1.Понятие о химиотерапии и химиопрофилактике.

2.Свойства химиотерапевтических препаратов. Химиотерапевтический индекс.

3.Определение понятия "антибиотики". История открытия антибиотиков.

4.Классификация антибиотиков по происхождению. Примеры.

5.Классификация антибиотиков по механизму действия. Привести примеры.

6.Классификация антибиотиков по спектру действия.

Литература:

1.Медицинская микробиология , вирусология и иммунология. Под ред. Л.Б.Борисова, М.:Медицина,2002с. 160-180.

2. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. Под ред. Л.Б.Борисова, М.: Медицина, 1984.

Ориентировочная основа действия при выполнении практической работы.

1.Познакомились с основными свойствами химиотерапевтических препаратов:

а) безвредность (определяется по химиотерапевтическому индексу)

min терапевтическая доза

ХТИ= ---------------------------------- < 1

max переносимая доза

если индекс < 1,препарат может быть использован для лечения, если > 1, то введение препарата будет сопровождаться токсическими явлениями. Пользуясь таблицами, рассчитать ХТИ для двух антибиотиков. Определить, какой из них менее вредный.

б) избирательное действие на микроорганизмы (антимикробный спектр).

С помощью таблицы привести примеры антибиотиков каждой группы ( 2-3) названия.

- на Гр - бактерии;

- на Гр + бактерии;

- на патогенные грибы и т.и.

в) бактериостатическое действие – угнетение роста и размножения микробов;

бактерицидное действие – вызывает гибель бактерий;

Записать в протокол названия антибиотиков каждой группы.

г) формирование лекарственно-устойчивых форм микроорганизмов.

Пользуясь учебником определить и записать в протокол основные механизмы лекарственной устойчивости микроорганизмов.

2.Определение чувствительности к антибиотикам S.aureus методом стандартных дисков.

На поверхность питательной среды в чашке Петри ”газоном” засеять исследуемую культуру. Поместить на равном расстоянии один от другого стандартные бумажные диски, которые содержат определенные дозы разных антибиотиков. Сделать измерение диаметра зоны задержки роста культуры S.aureus вокруг дисков с антибиотиками. Результаты занести в протокол. С помощью табл.1 (приложение)определить степень чувствительности культуры к антибиотикам. Дать рекомендации относительно назначения антибиотиков для лечения больного.

3.Определить МПК антибиотика методом серийных разведений. Для этого готовят основной раствор, который содержит 1000 Ед/мл бензилпеницилллина, а также потом его несколько двукратных разведений в МПБ. Прибавляют к каждому разведению 0,1 мл суспензии S.aureus, что содержит 1 млрд микробных клеток в 1 мл. Культивируют в термостате 18-24 часа.Изучают результаты: последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на концентрацию антибиотика, который содержится в ней. Результаты занести в протокол.Используя таблицу №2 (приложение),сравнить МПК in vitro с той, что достигается в крови. Сделать вывод о целесообразности лечения данным антибиотиком.

4. Определить концентрацию антибиотика (тетрациклина) в крови человека. В штатив установлен 2 ряда пробирок: 1 ряд - разведение эталонного штамма антибиотика (тетрациклина),2 ряд - разведение крови, взятой в больного, которого лечат тетрациклином. В каждую пробирку внесенная суспензия S.aureus, который вырос на среде Гисса с глюкозой. Посевы инкубируют сутки. Результаты оценивают по помутнению среды и ее окраски индикатором вследствие расщепления глюкозы стафилококком. Концентрация антибиотиков мкг/мл определяется умножением наибольшего разведения крови, которая задерживает рост стафилококка, на минимальную концентрацию эталонного антибиотика, который задерживает рост этого микроба. Делается вывод об эффективности проведенной антибактериальной терапии.

Учебные задачи:

1. У больного на основании обследования установлен предварительный диагноз - „пиодермия”. Какие дополнительные исследования необходимо назначить перед антибиотикотерапией ?

2. Из крови больного с клиническим диагнозом „сепсис” выделена культура клебсиэлы. МПК полимексина в МПБ составляет 7 мкг/ мл. Какую дозу антибиотика в сутки необходимо вводить больному? (таблицы в „дополнениях”).

3. У послеоперационных больных хирургического отделения в 55% случаев заживление ран осложняется нагноительными процессами. Какие исследования необходимо провести, чтобы проявить источник заболевания?

Приложение 2

Образец протокола:

Задание1. Познакомились со свойствами химиотерапевтических препаратов

1.безвредность для человека

Названия антибиотиков:

1.

2.

ХТИ (1)= ; ХТИ(2)= .

Вывод: менее вредным является ______________________

2.избирательное действие на микроорганизмы (антимикробный спектр):

- на Гр - бактерии___________________________

- на Гр + бактерии ____________________________

- на патогенные грибы __________________________

- на простейшие __________________________

3.бактериостатическое действие или бактерицидное действие

бактериостатическое ____________________

бактерицидное действие _____________________

4.формирование лекарственно-устойчивых форм микроорганизмов _________

___________________________________________________________

Задание 2.Определение чувствительности к антибиотикам S.aureus методом стандартных дисков.

Название антибиотиков	Диаметр зоны задержки роста (мм)	Степень чувствительности

Вывод: для лечения больной рекомендован антибиотики ____________________________________________________________________________

______________________________________ , так как ____________________________

Задание 3. Определение чувствительности бактерий к антибиотику методом серийных разведений (определение МПК)

Название бактерий	Доза бензилпеницилллина мкг/мл									Контроль МПБ
	500	250	125	62,5	31,2	15,6	7,8	3,9	1,9	0
S.aureus

(+) - рост микробов

(-) - задержка роста

Вывод: задержка роста S.aureus наблюдается при концентрации бензилпенициллина ___мкг / мл. Т.о. МПК антибиотика ___________.

Задание 4. Определение антибиотика (тетрациклина) в крови

Учет исследования (тест-микроб) - S.aureus

Компоненты	Разведение компонентов (№ пробирок)
	1	2	3	4	5	6	7
Эталонный антибиотик (тетрациклин) мкг / мл	16	8	4	2	1	0,5	0,25
Учет результатов
Исследуемая жидкость (кровь) в разведениях	1:8	1:32	1:64	1:128	1:256	1:512	1:1024
Учет результатов

Учет: (+) - рост микробов

(-) - задержка роста

Вывод: _______________________________________________________________

Дата _____________ Подпись преподавателя ______________________

Таблица 2. Минимальные подавляющие концентрации антибиотиков.

Антибиотики	Содержимое антибиотика в диске, мкг	МПК, мкг/мл
		стойкие	чувствительные
Бензилпенициллин	6	-	0,1
Ампицилин	10	-	0,2
Карбеницилин	25	32	16
Метицилин	10	_	3
Оксацилин	10	-	3
Цефалексин	30	32	10
Цефалотин	30	32	10
Стрептомицин	30	15	6
Неомицин	30	-	10
Канамицин	30	25	6
Мономицин	30	-	10
Гентамицин	10	6	4
Ристомицин	30	-	5
Сизомицин	10	6	4
Тетрациклин	30	12	2
Доксициклин	10	12	2
Эритромицин	15	8	2
Линкомицин	15	8	2
Левомицетин	30	15	8
Рифампицин	5	8	2
Фузидин	10	16	2
Полимиксин	300 ОТ	50ОТ/мл

Таблица 3.

Значение граничных концентраций антибиотиков в крови для деления микроорганизмов на чувствительные и стойкие

Антибиотик	Терапевтическая концентрация в крови (мкг/мл) при использовании средних доз.	Антибиотик	Терапевтическая концентрация в крови (мкг/г.ч) при использовании средних доз
Бензилпенициллин	0, 5-2 (Ед/мл)	Эритромицин	3-5
Метицилин	10-15
Оксацилин	4-6	Ванкомицин	10-15
Ампицилин	15-25	Фузидин	10-20
Карбеницилин	до 250 для до 32 для и др.м/о	Тетрациклин Левомицетин Стрептомицин	3-5 5-Ю 20-25
Цефалотин	15-25	Канамицин	15-20
Цефалооидин	15-25	Гентамицин	6-8
Цефалексин	15-25	Тобрамицин	6-8
Линкомицин	10-15	Сизомицин	6-8
Рифампицин	15-25	Полимиксин	10-15

Таблица 4.

Изменение концентрации антибиотиков в крови в зависимости от примененных доз.

Антибиотик	Средне -суточная доза	Метод введения	Концентрация антибиотика в крови, мкг/мл	Максимальная суточная доза	Метод введения	Концентрация антибиотика в крови, мкг/мл
Бензилпенициллин	500000 Ед	в/м	0,5 Ед/мл	500000 Ед натриевой или калиевой соли	в/м	5 Ед/мл
Эритромицин	1,5	рег 05	5	1,5	в/в	15
Олеандомицин	2,0		2	2	-//-	5
Новобиоцин	1,5	-//-	20	3	РЕГ 05	40
Тетрациклин	1.0	-//-	2	2	в/в	10
Левомицетин	2,0	-//-	15	-	-	-
Стрептомицин	1,0	в/м	10	3	в/м	С
Каначицин	1, 0-1,5		20	2	-//-	40
Полимиксин В	0.1-1,5	-//-	1-2.5	0,2	-//-	4-8