Ориентировочная основа действий при выполнении практической работы

1. Определение общего количества бактерий (микробное число), в пробе питьевой воды методом мембранных фильтров. Этапы исследования воды методом мембранных фильтров изучаются на демонстрационном материале: преподаватель демонстрирует фильтр Зейтца, мембранные фильтры, чашку Петри с засеянными фильтрами. Студенты подсчитывают количество выросших колоний. Для доказательства принадлежности выросших микроорганизмов к БГКП (бактерии группы кишечной палочки) преподаватель демонстрирует готовый окрашенный по Граму мазок и проводит определение оксидазной активности, демонстрирует полужидкую среду с глюкозой, засеянную культурой из бесцветных оксидазоотрицательных колоний. Студенты делают вывод об общем микробном загрязнении вводы и ее соответствии санитарным нормам.

2. Определение бактерий группы кишечных палочек (коли - индекс, коли - титр) бродильным методом.

Исследование проводится по типу решения задачи. Студенты делятся на группы по 3 человека, каждая группа получает зашифрованную пробу питьевой воды и оснащение, необходимое для определения микробного числа и коли - индекса бродильным методом.

Для определения микробного числа студенты самостоятельно готовят разведения пробы воды и делают посев. Самостоятельно каждая группа производит засев необходимых объемов воды во флаконы и пробирки с ГПС (глюкозо-пептонной средой). Для лучшего улавливания газообразования во флаконы вместо поплавков помещены кусочки ваты, которая всплывает в случае образования газа при расщеплении глюкозы. Сделанные посевы студенты помещают в шкаф. В протоколе отмечается проделанный этап работы.

Каждая группа студентов получает папку с методическими и законодательными документами, с которыми знакомится по мере необходимости.

Преподаватель акцентирует внимание студентов на необходимости изучения ГОСТов, СанПиНов, других материалов по воде: ГОСТ18963-73»Вода питьевая. Методы санитарно-бактериологического анализа»; ГОСТ2874-82»Вода питьевая. Гигиенические требования и контроль за качеством»; СанПин №4630-888»санитарные правила и нормы охраны поверхностных вод от загрязнения».

Студенты определяют коли- индекс и коли- титр, заполняют протокол и делают заключение (по таблице 3) о санитарном состоянии воды, возможности ее использования в качестве питьевой.

3. Определение общей микробной обсемененности (микробное число) и санитарно-показательных микроорганизмов седиментационным методом.

Группа студентов получает 2 чашки с МПА, 2 чашки с ЖСА и 2 чашки с кровяным агаром. Положить чашки Петри с питательными средами на уровне дыхания на горизонтальную повехность и открыть на 20 мин. (для определения общего микробного обсеменения) и на 40 мин. (для учета кокковой микрофлоры). Чашки поместить в шкаф до следующего занятия. Рассмотреть засеянные ранее аналогичным способом чашки со средами, подсчитать количество выросших колоний, данные занести в протокол

4. Определение микробного числа и санитарно- показательных микроорганизмов аспирационным методом.

Исследование проводится параллельно с выполнением задания 1. студенты получают 2 чашки с МПА, 2 чашки с ЖСА и 2 чашки с кровяным агаром. Чашки последовательно помещают в аппарат Кротова и прокачивается 100 л. воздуха для определения микробного числа (скорость прокачивания 25л /мин. и 250л- для определения санитарно-показательных микроорганизмов. Чашки поместить в шкаф до следующего занятия.

Учесть результаты посевов, сделанные раньше. Рассчитать микробное число по формуле: Х= а х 1000

У

а - количество выросших на чашке колоний;

у - объем пропущеного через прибор воздуха (скорость всасывания воздуха 25л/мин.);