Номенклатура

В 1980 Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) пересмотрела систему номенклатуры. Она включает ряд существенных параметров: 1) тип вируса; 2) естественный хозяин, если это не человек; 3) географическое происхождение, 4) номер лабораторного штамма 5) год выделения, 6) для вируса типа А затем следует в круглых скобках антигенное описание гемагглютинина и нейраминидазы. Например, вирус гриппа А: Хабаровск / 90 / 77 (H1N1).

Имеется 13 различных H антигенов и десять N антигенов. Только H1-H3 и N1-N2 были пока обнаружены у вирусов человека, остальные выделяются от животных и птиц.

Антигенная структура: антигены вируса гриппа могут классифицироваться на внутренние и поверхностные антигены, внутренний антиген – рибонуклеопотеид и, следовательно, называется РНП–антиген. Так как он обнаруживается в свободном виде в инфицированных тканях и в надосадочной жидкости после центрифугирования вируссодержащей жидкости, он также назывался растворимым (англ. soluble) S-антигеном. S-антиген может выявляться реакцией связывания комплемента и реакцией иммунопреципитации, он является типоспецифическим, и в зависимости от S-антигена вирусы гриппа классифицируются на типы A, B и C. Рибонуклеопротеидные антигены типов А, B и C различаются, но все штаммы каждого типа обладают одинаковым антигеном. S-антиген стабилен и не проявляет существенной антигенной изменчивости. Антитела к этому антигену образуются во время инфекции, но не всегда у лиц, иммунизированных убитыми вакцинами.

Термин «вирусный», «вариабельный» или V-антиген использовался раньше для обозначения поверхностного антигена вируса гриппа. Антитела к V-антигену определяются в реакции связывания комплемента. V антиген фактически состоит, по крайней мере, из двух кодируемых вирусом белков, гемагглютинина и нейраминидазы, эти два белка были выделены и очищены.

Гемагглютинин - гликопротеид, составленный из трех мономеров. Он ответствен за гемагглютинацию и гемадсорбцию и обеспечивает адсорбцию вируса как на мукопротеиновых рецепторах эритроцитов, так и на клетках респираторного эпителия. Антитела-антигемагглютинины образуются после инфекции и иммунизации. Это - защитные антитела, предотвращающие адсорбцию вируса к клеткам. Гемагглютинин - штаммоспецифический антиген и способен к значительной вариации. К настоящему времени идентифицировано 13 различных подтипов гемагглютинина у вирусов гриппа, инфицирующих человека, животных и птиц (их называют H1 - H13).

Нейраминидаза – гликопротеиновый фермент, который разрушает рецепторы клетки в результате гидролиза. Она состоит из четырех мономеров. Антитела к нейраминидазе образуются после инфекции и иммунизации. Они не столь эффективны, как антигемагглютинины. Они не предотвращают адсорбцию вируса на клетках, но могут подавлять выход вирусного потомства и, может таким образом вносить вклад в ограничение инфекции. Нейраминидаза - штаммоспецифический антиген проявляет изменчивость. Пока идентифицировано десять различных подтипов нейраминидазы (N1- N10).

Вирус гриппа обладает общими антигенами с изоантигеном А эритроцитов человека, что и обусловливает неспособность некоторых людей продуцировать против него антитела.

Культивирование. Вирусы гриппа хорошо размножаются в амниотической и аллантоисной оболочках куриных эмбрионов, первично трипсинизированных культурах почек обезьян, эмбриона человека и др.

Резистентность. При комнатной температуре вирус гриппа инактивируется через несколько часов, от нагревания до 65 °С погибает в течение 5- 10 мин. Очень чувствителен к высушиванию, быстро разрушается в кислой, а также щелочной среде, легко обезвреживается под влиянием эфира, дезоксихолата натрия, а также всеми дезинфицирующими веществами: хлорной известью, хлорамином, формалином и др. Губительное действие оказывают на вирус гриппа ультрафиолетовые лучи и ультразвук.

Патогенность для животных. Свиньи, лошади, и некоторые птицы естественно восприимчивы к некоторым типам вируса гриппа. Вирусы типа А и В легко приспосабливаются к многим видам домашних животных во время эпидемий, но их эпидемиологическое значение для человека недостаточно изучено. Из экспериментальных животных наиболее восприимчивыми оказались африканские хорьки. После заражения у них через 2 дня повышается температура, развиваются катары верхних дыхательных путей, отмечаются выделение из носа секрета гнойного характера, чиханье. Мыши и молодые свиньи также восприимчивы к гриппу.

Патогенез заболевания у человека. Входные ворота – респираторный тракт. При экспериментальной инфекции у добровольцев очень малые дозы (приблизительно три жизнеспособных частицы) могут вызывать инфекцию, если попадают аэрозольно. Бóльшие дозы требуются при заражении интраназально. Вирусная нейраминидаза облегчает инфекцию, уменьшая вязкость пленки слизи, выстилающей респираторный тракт и освобождает рецепторы поверхности клетки для адсорбции вируса. Мерцательные клетки дыхательных путей - главные места вирусной инфекции. Эти клетки повреждаются и удаляются, оставляя оголенными базальные клетки в трахее и бронхах. Это делает респираторный тракт высоко уязвимым к бактериальной инвазии.

Вирус гриппа - строго пневмотропен и размножается только в клетках эпителия дыхательных путей. Поскольку вирус размножается и развивается инфекция, постепенно вовлекаются в процесс бронхи, бронхиолы, и альвеолярные эпителиоциты. Поврежденный мерцательный эпителий теряет свои реснички, в результате этого лишается своей защитной функции. Это создает благоприятную среду для проникновения вторичной бактериальной флоры (стрептококков, стафилококков, H. influenzae, микоплазм и др.) которые вызывают осложнения (бронхит, пневмонию, плеврит, энцефалит, гриппозный менингит). Кроме того, грипп активизирует хронические заболевания (туберкулез) и значительно понижает иммунитет к многим инфекциям.

Вирусная пневмония, отмечаемая только в более тяжелых случаях, связана с гиперемией и уплотнением альвеолярных стенок, внутритканевой инфильтрацией лейкоцитами, капиллярным тромбозом и экссудацией лейкоцитов. В некоторых случаях формируется гиалиновая мембрана, заполняющая альвеолярные протоки и альвеолы. В последних стадиях имеется инфильтрация макрофагами, которые озахватывают и удаляют десквамированные альвеолярные клетки.

Болезнь обычно ограничивается респираторным трактом, очень редко во время пандемии 1957 года вирус изолировался из селезенки, печени, почек и других органов.

Клинические особенности. Инкубационный период короткий – 12 - 72 часа. Тяжесть заболевания варьирует от умеренного ринита до молниеносной и быстро заканчивающейся смертью пневмонии, большинство заболеваний протекает субклинически. При типичной клинике начало резкое с лихорадкой, головной болью и общей миалгией. Обычно на первый план выступают дыхательные симптомы и серьезная общая слабость. Могут быть боли в животе и рвота, особенно при гриппе типа В у детей, которые могут давать картину острого живота. Неосложненная болезнь заканчивается через 2 - 7 дней.

Наиболее важное осложнение - пневмония, которая главным образом развивается из-за вторичной бактериальной инфекции или реже, вызвана непосредственно вирусом. Кардиальные осложнения типа застойной недостаточности или миокардита и неврологических поражений типа энцефалита бывают редко.

Иммунитет. Иммунитет к специфическому подтипу вируса, развивающийся после вспышки гриппа, продолжителен. Он обусловлен суммарно местными антителами (IgA) в секретах слизистых дыхательных путей и специфическими IgG антителами в сыворотке. Иммунитет к инфекции, особенно типом А, строго специфичен к сероподтипу и обеспечивает небольшую или вообще не создает невосприимчивости к сероподтипам, обладающим иммунологически отличными белками гемагглютинина или нейраминидазы.

Доказательством стойкости иммунитета при гриппе может служить следующее. В 1977 г. возвратился вирус H1N1 после 20-летнего отсутствия. Эпидемия началась в Китае. Заболевали почти исключительно лица моложе 20 лет, т.е. родившиеся после 1957 г., когда прекратилась циркуляция этого вируса среди населения. Кроме того, иммунитет к вирусу гриппа типа С, который не имеет антигенных вариантов, обычно является пожизненным.

Эпидемиология. Эпидемии, которые были вызваны, вероятно, вирусами гриппа, были описаны уже более 2000 лет назад. Как правило, наблюдается внезапное появление случаев респираторного заболевания; они длятся в течение нескольких недель и затем внезапно прекращаются. Эпидемии происходят часто с неодинаковыми интервалами и, как думали одно время, были под влиянием звезд, отсюда и название – «грипп» (итал. влияние). Хорошо известно, что эпидемии изменяются по тяжести. Большая пандемия 1918-19 г.г. (испанка) была особенно серьезной, она унесла жизнь от 20 до 40 миллионов людей, поскольку она распространялась во всем мире. Именно из-за этого большие усилия были направлены на попытку выяснить причину болезни. Успех пришел в 1933 г., когда Кристофер Эндрю и др. выделили вирус гриппа А.

Длительные исследования по выделению и изучению выделенных вирусов, позволили понять связь между поведением при эпидемии и изменениями вируса. Стало также возможным установить на основании феномена первичного антигенного греха, какие вирусные антигены были распространенны прежде, чем стало возможным выделять вирус. Это означает, что инфекция, вызванная текущим вирусным типом, стимулирует образование антител к ранее циркулировавшим штаммам. Таким образом мы можем установить, какие антигенные компоненты были распространены в конце прошлого столетия путем изучения антител у пожилых лиц.

1890 

1900 

1918 

1957 

1968 

1977

1990

H2N2

H3N8

H1N1 (испанка)

H2N2 (азиатский грипп)

H3N2 (гонконгский грипп)

H3N2 + H1N1

H3N2 + H1N1

Крупные пандемии связаны с антигенным шифтом - когда меняются вирусные H или N, или же оба сразу. Это изменение является слишком большим, чтобы быть результатом мутации, и анализ вирусной РНК указывает, что изменение является результатом приобретения нового полного 4-го и, или 5-го сегмента РНК. В лабораторных условиях легко показать, что, если клетка инфицирована двумя различными штаммами вируса, потомство будет содержать вирус, молекулы РНК которого получены от каждого родителя. Таким образом, «новый» вирус может быть результатом пересортировки, рекомбинации.

Вирусы гриппа А могут быть выделены от птиц, включая морских птиц и уток, и это наводит на мысль что, если такой вирус ко-инфицирует (то есть совместно заражает) клетку с циркулирующим человеческим штаммом, гибридизация может приводить к тому, что вирус гриппа человека приобретает новые оболочечные антигены.

Данные о том, что антигенные варианты, вызывавшие инфекцию в прошлом, были обнаружены у человека или других видов животных, дают возможность сделать вывод о существовании ограниченного числа антигенов. До 1977 это было правилом, что, когда появлялся «новый» вирус, «старый» исчезал. но начиная с этого времени циркулировали одновременно два подтипа, а именно H3N2 и H1N1. Последний антигенный вариант не обнаруживался начиная с 1950-го года.

У вирусов гриппа B не обнаруживается антигенного шифта, как нет и резервуара среди животных и, хотя эпидемии происходят с интервалом в 3-6 лет, они никогда не достигают размеров пандемии, и их распространение обычно ограничивается небольшими коллективами типа школ - интернатов или домов престарелых. Антигенные изменения являются результатом мутации, также, как и обнаруживаемые у вируса гриппа А после появления «новых» вирусных штаммов, изменения обусловлены дрейфом антигенов.

Периодичность вспышек гриппа характерна, но увеличение распространенности всех респираторных вирусных инфекций осенью и зимой в странах с умеренным климатом может маскировать эпидемиологическую картину гриппа. Заболеваемость гриппом может достигать 20-40%, и распространение вспышки может быть быстрым. Вероятно, вдыхание холодного воздуха зимой может снижать активность мерцательного эпителия в верхних дыхательных путях и таким образом увеличивать заболеваемость респираторными инфекциями. Массовое скопление людей, например в новогодних компаниях, может облегчать распространение вируса. Кроме того, по некоторым данным, количество клеточных рецепторов к вирусу может быть различной в зависимости от сезона.

ВОЗ контролирует грипп А и B во всем мире, чтобы обнаружить появление вариантов. Таким образом, можно проследить распространение подтипа варианта в мире, обычно с востока на запад. Тяжесть и распространение можно установить путем расчета показателей смертности.

Пиковые количество случаев отмечается с появлением нового штамма. Это связано с появлением с интервалом в год-два вируса, который антигенно «дрейфовал» от материнского типа. Далее дрейф может приводить к последующим эпидемиям разной степени.

Высокие показатели заболеваемости отмечаются у дошкольников, заболеваемость ниже даже у пожилых. Однако, пожилые пациенты в домах престарелых, если они не иммунизированы, являются группой особого риска тяжелого заболевания и внезапной смерти. Таким образом, даже если показатель заболеваемости и низкий, коэффициент смертности высок. Инфекция может быть занесена персоналом, посетителями или другими пациентами.

Вирус гриппа типа C не ассоциируется с эпидемиями, но дает повышение заболеваемости острыми респираторными инфекциями, особенно у детей. Большинство инфекций являются бессимптомными.

Лабораторная диагностика. Основана на вирусологическом и серологическом методах исследования. Вирусологический метод используется с целью выделения вируса и его идентификации. Носоглоточными смывами, к которым для подавления бактериальной микрофлоры добавляют антибиотики или подвергают ультрацентрифугированию, заражают 9—11-дневные куриные эмбрионы или клеточные культуры. После 3—4 сут культивирования вирус гриппа обнаруживают с помощью реакции гемагглютннации в аллантоисной и амниотической жидкостях куриного эмбриона, а в тканевых культурах—реакцией гемадсорбпии.

Идентификация вируса проводится с помощью реакций торможения гемагглютинадии и нейтрализации вируса с использованием специфических иммуявых-сывороток.

Серологическая диагностика предусматривает обнаружение нарастания титра специфических антител в сыворотках больных в динамике заболевания при помощи реакций торможения гемагглютинации, связывания комплемента и нейтрализации вируса. Для постановки этих реакций кровь берут в первые дни болезни и-в период выздоровления. У переболевших гриппом людей титр антител увеличивается в 4 раза и более.

Кроме описанных методов, для диагностики гриппа используют экспресс-метод, основанный на применении прямой и непрямой иммунофлюоресценции. Для этого готовят мазки-отпечатки из отделяемого верхних дыхательных путей (носоглотки), в котором находятся клетки цилиндрического эпителия, и обрабатывают их типоспецифическимн сыворотками, меченными флюорохромами. При просмотре мазков в люминесцентном микроскопе при наличии вируса гриппа в клетках цилиндрического эпителия обнаруживается зеленовато-желтое свечение.

Лечение. Применяют комплексную терапию, направленную на подавление репродукции вируса гриппа в организме и нейтрализацию токсинов. Хороший результат получен при введении в первые дни болезни противогриппозного донорского иммуноглобулииа, сухой противогриппозной сыворотки, лейкоцитарного интерферона, а также химического препарата ремантадина. Предупреждение осложнений достигается использованием антибиотиков в сочетании с сульфаниламидами.

Профилактика. Грипп передается воздушно-капельным путем. Источник инфекции – больной гриппом, который может инфицировать здоровых людей при чихании, кашле, и разговоре.

Предупреждение гриппа осуществляется путем изоляции больных, систематического проветривания помещений и уборки их влажным способом (раствором хлорамина), закаливания организма, занятия физкультурой и спортом, предотвращения сквозняков в жилых и рабочих помещениях.

Вакцинация. Гриппозные вакцины использовались в течение многих десятилетий. Первоначально вакцины состояли из вируса, который выращивали в аллантоисной полости куриных эмбрионов, частично очищенного и инактивированного формалином. Из-за присутствия яичного белка, эта вакцина может вызывать реакции у больных с аллергозами. Цельная вирусная вакцина вызывает лихорадку и местную болезненность. Субъединичные вакцины были предложены, чтобы уменьшить токсические реакции. Очищенный вирус разрушают обработкой эфиром или дезоксихолатом так, чтобы вакцина содержала иммуногенные субъединицы гемагглютинина и нейраминидазы.

Главная трудность в иммунопрофилактике гриппа - частые изменения антигенных составляющих вируса. Вакцины не могут быть произведены в больших количествах и про запас, поскольку появление нового варианта будет делать старую вакцину устаревшей В странах холодного климата, где необходимо обеспечить защиту старым людям и лицам других групп высокого риска, на практике необходимо иммунизировать их вакциной, содержащей самые последние штаммы вирусов типа A и B.

Наиболее важное показание для иммунопрофилактики - то, когда новый вирус угрожает пандемией. Здесь, время, необходимое для изготовления вакцины с новым вариантом критическое, поскольку вирус, вероятно, распространится быстро и инфицирует целые населенные пункты прежде, чем вакцина становится доступной. Кроме того, наиболее свежие изоляты (выделенные вирусы), не растут хорошо в куриных эмбрионах, пока они не прошли последовательное пассирование. Чтобы преодолеть эти препятствия, была предложена рекомбинантная вакцина. Рекомбинант обладает особенностями роста старых стабилизированных штаммов и несет поверхностные антигены нового варианта. Рекомбинант будет расти хорошо в куриных эмбрионах, что облегчает производство вакцины.

В то время как убитые вакцины стимулируют формирование циркулирующих антител, они не приводят к какой-либо местной защите в дыхательных путях.

Для создания специфического местного иммунитета использовались живые вакцины. Самая ранняя живая вакцина готовилась из вируса, аттенуированного последовательными пассажами на куриных эмбрионах. Она применялась интаназально. Однако, она иногда вызывала заболевание, особенно у детей.

Другой подход к получению живых вакцин - использование чувствительных к температуре мутантов. Могут быть легко выделены мутанты, которые способны развиваться при более низкой температуре слизистой оболочки носоглотки (при 32 -34 C) но не в легких при 37 " C. Такие ts- мутанты авирулентны. Рекомбинантые живые вакцины могут быть получены путем гибридизации между ts-мутантами стабилизированных штаммов и новым антигенным вариантом.

Эффективна химиопрофилактика ремантадином, который подавляет адсорбцию вируса гриппа типа А к клеткам. Применяют также интерферон и противогриппозный иммуноглобулин.

Лабораторный диагноз.

1. Обнаружение вирусного антигена. Быстрый диагноз гриппа может установлен путем обнаружения вирусного антигена на поверхности клеток носоглотки методом иммунофлюоресценции. Из мазков, взятых тампоном из носа и отделяемого носоглотки или осадка после центрифугирования носоглоточных смывов готовят мазки-препараты, обрабатывают люминесцирующей сывороткой против вируса гриппа и исследуют под люминесцентным микроскопом. Обнаруживаются клетки, флюоресцирующие из-за присутствия на их поверхности вирусных антигенов. Этот метод не является ни столь же надежным, ни столь же чувствительным, как выделение вируса.

2. Выделение вируса. Выделить вирус достаточно легко от больных в течение первых двух или трех дней болезни, но обычно не в более поздних стадиях. Носоглоточные смывы собирают, используя подходящий солевой буферный раствор. Если материал не может быть обработан немедленно, его нужно хранить при 4 ºС , или, если срок задержки большой, при – 70 ºC. Исследуемый материал нужно обработать антибиотиками, чтобы уничтожить бактерии. Выделять вирус можно на куриных эмбрионах или в культуре клеток почек обезьяны.

Материал вводят в амниотическую полость 11-13 дневных куриных эмбрионов, используя по крайней мере шесть эмбрионов для каждого исследования. После инкубации в 35 ºC в течение трех дней, эмбрионы охлаждают и собирают раздельно амниотическую и аллантоисную жидкости. Их испытывают в реакции гемагглютинации, используя параллельно эритроциты морской свинки и куриные эритроциты при комнатной температуре и при 4 ºС. Некоторые свежевыделенные штаммы вируса гриппа типа A склеивают только эритроциты морской свинки. Вирусы типа В агглютинируют оба вида эритроцитов, в то время как штаммы вируса типа С склеивают только куриные эритроциты при 4 ºС.

Если нет гемагглютинации, проводят «слепой» пассаж гомогенатов легких и печени эмбриона через другую партию эмбрионов, что иногда приводит к восстановлению вируса. Изоляты идентифицируют и типируют в реакцией связывания комплемента с антисыворотками к типам A, B и C. Идентификация сероподтипа проводится в реакции торможения гемагглютинации (РТГА). Часть современных штаммов типа A может быть выделена при первичном введении клинического материала в полость аллантоиса 9-11 –суточных куриных эмбрионов. Однако, вирусы типов B, и C не будут обнаружены, если применяется только заражение в полость аллантоиса.

Заражение культур клеток почек обезьяны или других пригодных перевиваемых культур клеток почти столь же эффективно, как и заражение куриных эмбрионов для выделения вируса типа А и немного более чувствительно для штаммов типа В. Размножение вируса может быть обнаружено при исследовании культуральной жидкости в реакции гемагглютинации и гемадсорбции. Быстрые результаты могут быть получены при выявлении вирусного антигена в зараженных клетках в реакции иммунофлюоресценции.

3. Серологическая диагностика.

Для серологической диагностики гриппа используются реакция связывания комплемента и реакция торможения гемагглютинции. Существенно исследовать парные сыворотки, выявляя нарастание титра антител. Реакции связывания комплемента с РНП антигеном типов вируса гриппа A, B и C очень полезны, поскольку антитела образуются при инфекции, но не после иммунизации инактивированными вакцинами. Реакция связывания комплемента может также быть поставлена с использованием V - антигенов для выявления штаммоспецифических антител. Из-за своей сложности, РСК используется теперь редко.

Реакция торможения гемагглютинации - удобноая и чувствительная реакция для серологического диагноза гриппа. Однако, она имеет некоторые недостатки. Поскольку антитела-антигемагглютинины являются специфичными к сероподтипу, необходимо использовать в качестве антигена-диагностикума штамм, вызвавший инфекцию в настоящее время.

Главное препятствие - частое присутствие в сыворотке неспецифических ингибиторов гемагглютинации. Сыворотки, соответственно обработанные для удаления неспецифических ингибиторов, разбавляются последовательно в лунках плексигласовых планшетов для гемагглютинации и в каждую лунку добавляют суспензию вируса гриппа, содержащую 4 ГАЕ (гемагглютинирующих единиц). Затем добавляют куриные эритроциты. Наибольшее разведение сыворотки, которое подавляет гемагглютинацию является титром сыворотки.

Антитела к нейраминидазе можно определить в реакции нейтрализации нейраминидазной ферментативной активности. Однако, они слишком трудоемки для обычного использования.

Реакция радиальной иммунодиффузии агарозном геле была описана для идентификации антител к РНП антигену, гемагглютинину и нейраминидазе. Однако, они более полезны как тесты для выявления скрытой формы заболевания чем для обычного диагноза.

ПАРАМИКСОВИРУСЫ

В семейство Paramyxoviridae включены три рода – Paramyxovirus, Morbilivirus и Pneumovirus, содержащих патогенные для человека вирусы.

Вирусы имеют сферическую форму, диаметр 100 - 300 нм. Нуклеокапсид окружен липидно-углеводно-протеиновой оболочкой. Обладают гемагглютинирующей, гемолитической и нейраминидазной активностью, способностью образовывать синцитий в клеточных культурах и эозинофильные цитоплазматические включения; в антигенном отношении характеризуется многообразием. У людей парамиксовирусы вызывают парагрипп, эпидемический паротит, корь и РС-инфекцию.

Парагриппозные вирусы

Парагриппозные вирусы человека включают этиологические агенты, которые выделены в разных странах при поражениях респираторного тракта. Вирус парагриппа был изолирован впервые в США Р.Чаноком в 1956 г.

Морфология.

Полностью соответствует описанной выше характеристике семейства парамиксовирусов.

Культивирование. Парагриппозные вирусы человека не репродуцируются в куриных эмбрионах, хорошо развиваются на тканевых культурах почечного эпителия обезьян и эмбриона человека, а также на фибробластах человеческого эмбриона. Некоторые штаммы могут быть адаптированы к субинокуляции Hep-2, HeLa и других культур клеток. Если в культуральную жидкость внести эритроциты, они прилипнут к поверхности содержащих вирус клеток (феномен гемадсорбции). Доказано, что вирусы парагриппа . человека могут вызывать хроническую инфекцию клеточных культур.

Антигенная структура. Парагриппозные вирусы подразделяются на пять самостоятельных типов. В составе вирусов парагриппа имеются антигены, свойственные клеткам-хозяевам. Вирусы агглютинируют эритроциты морской свинки, курицы, человека.

Резистентность. Парагриппозные вирусы чувствительны к эфиру. Довольно быстро погибают от нагревания и дезинфицирующих средств.

Патогенез заболевания у человека. Передача инфекции происходит воздушно-капельным путем. Инкубационный период - от 3 до 6 дней, в течение который вирус распространяется местно в пределах респираторного тракта.

Вирусы парагриппа выделяются от детей, страдающих заболеваниями верхних дыхательных путей типа ринита, фарингита, и бронхита, которые сопровождаются повышением температуры. Парагриппозные вирусы обычно ассоциируются также с крупом, резким отрывистым кашлем детей, знакомым многим матерям как раздражитель " середины ночи ". Он развивается при комбинации трахеита и ларингита, но вирусы парагриппа могут также вызывать и малую болезнь верхних дыхательных путей. Они ответственны за 6-9 % инфекций дыхательных путей, для которых может быть установлена вирусная этиология.

Многие заболевания происходят у младенцев в присутствии материнских антител, но нет данных, что это как-то отражается на тяжести заболевания.

Очень редко вирусы парагриппа являются причиной серьезных болезней у взрослых, обычно они вызывают заболевания дыхательных путей средней тяжести. Весьма часто вирусы парагриппа выступают в ассоциации с вирусом гриппа и аденовирусами.

Лабораторная диагностика. Дифференциальный диагноз гриппа и парагриппозных инфекций затруднителен. Он основывается преимущественно на вирусологических и серологических исследованиях. Для выделения вируса используют однослойные культуры из почек обезьян или эмбрионов человека. Наличие вируса в культуре ткани определяется гемадсорбцией. Идентификация выделенных штаммов производится реакцией нейтрализации и реакцией задержки гемадсорбции на культуре ткани, реакциями торможения гемагглютинации и связывания комплемента. Для серологической диагностики парагриппозных заболеваний применяют реакции торможения гемагглютинации и связывания комплемента с парными сыворотками больных. Обнаружение вируса в клетках верхних дыхательных путей возможно с помощью иммунофлюоресценции с типоспецифическими мечеными сыворотками.

Респираторно-синцитиальный вирус.

Вирус выделен в США в 1956 г. Дж. Моррисом от обезьян, затем от детей с заболеваниями дыхательных путей. Название его (RS-Respiratory syncytial) дано в связи с тем, что при размножении вируса в клеточных культурах образуется синцитий клеток - «сетчатая ткань».

RS-вирус относится к роду Metamyxovirus. Диаметр вириона 90 -120 нм, он чувствителен к эфиру и неустойчив к замораживанию, инактивируется при 56°С в течение 30 - 40 мин. RS-вирус не размножается в куриных эмбрионах, непатогенен для лабораторных животных. Он культивируется на перевиваемых линиях клеток опухолевых и нормальных тканей человека, штаммах диплоидных клеток человека, а также первичных культурах почек обезьян. Цитопатическое действие проявляется на 3 - 5-й день в виде возникновения округлых клеток с повышенной лучепреломляемостью, симпластов и отростчатых клеток, связанных между собой цитоплазматическими отростками (синцитий).

У человека RS-вирус вызывает острые респираторные заболевания, бронхит, пневмонию, ринит. Инкубационный период продолжается 4 - 9 сут, длительность болезни 5 - 6 дней. Заболевания принимают характер эпидемических вспышек продолжительностью 2 - 3 мес. Они обычно наблюдаются среди детей в зимне-весенний период. В детских коллективах переболевают почти все дети. В отличие от парагриппозных заболеваний, имеющих эндемический характер и развивающихся несколько раз в году, эпидемии, вызываемые RS-вирусами, повторяются ежегодно.

Лабораторная диагностика такая же, как и при парагриппе. Специфическое лечение я профилактика не разработаны.

Вирус эпидемического паротита.

Возбудитель открыт К. Джонсоном и Э. Гудпасчуром в 1934 г. Он относится к роду Paramyxovirus.

Морфология. Вирусы в электронном микроскопе имеют куполообразную неправильную форму. Размеры вириона 150 - 175 им в диаметре.

Культивирование. Вирусы репродуцируются в куриных эмбрионах. Свежевыделенные штаммы вируса хорошо развиваются в первичных человеческих эмбриональных почечных культурах клеток. Цитопатическое действие характеризуется образованием многоядерных клеток.

Аитигенная структура. Вирус эпидемического паротита не имеет серологических вариантов, он содержит два антигена: S-антиген, растворимый, связанный с рибонуклеопротеидом, и V-антиген, состоящий из поверхностных вирусных структур.

Вирус эпидемического паротита обладает гемагглютинирующими и гемолизирующими свойствами в отношении эритроцитов человека, обезьян, барана, лошади, кур, гусей, уток и др.

Резистеатность. Вирус сохраняется при низких температурах (-25 ° и - 70 °С) более 10 месяцев, малоустойчив к действию физических и химических факторов. Он погибает при температуре 55 – 60 °С в течение 20 мин, быстро инактивируется ультрафиолетовыми лучами, разрушается от воздействия 0,1 % раствора формалина, 1 % раствора лизола, 50 % спирта или эфира.

Патогениость для животных. В естественных условиях вирус эпидемического паротита не вызывает заболеваний у животных. При экспериментальном заражении он поражает некоторые породы обезьян: у них возникает заболевание, сходное с паротитом у людей. Вирус может быть адаптирован к некоторым животным (хомяки, белые мыши, белые крысы) путем заражения в мозг однодневных сосунков: у них развиваются тяжелые энцефалиты, заканчивающиеся летально.

Патогенез заболевания у человека. Вирус паротита обусловливает лихорадку, вызывает воспаление околоушных, подъязычных и подчелюстных желез. Заболевают главным образом дети. Паротит (свинка) - очень контагиозная болезнь, но у 50% зараженных болезнь протекает бессимптомно. В тяжелых случаях возникает вирусемия. При эпидемическом паротите, кроме слюнных желез, вирус проникает в другие органы и вызывает орхит и менингит. В качестве осложнений могут развиться полиневриты, парезы ушного и лицевого нервов, нарушения функций органов слуха и зрения.

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет стойкий, сохраняющийся в течение всей жизни. В сыворотке крови появляются антитела, связывающие комплемент и вызывающие торможение реакции гемагглютинации.

Лабораторная диагностика. Осуществляется путем выделения вируса из мочи, слюны, центральной нервной системы с последующей идентификацией его в реакции торможения гемагглютинации и иммунофлюоресценции, а также реакцией связывания комплемента и торможения гемагглютинации с сыворотками больного. Антитела обнаруживаются через неделю от начала заболевания, титр их нарастает интенсивно. Лучший результат дает исследование парных сывороток.

Лечение. Больным вводят гамма-глобулин, который облегчает течение болезни, но не предупреждает развитие менингита и орхита.

Профилактика. Общие меры включают изоляцию пациентов до их выздоровления. Все дети моложе 10 лет, бывшие в контакте изолируются на срок в 21 день (самый продолжительный инкубационный период). Больные выписываются из стационара только после того, как все клинические проявления болезни исчезают. Дезинфекция не проводится. Специфическая профилактика проводится живой вакциной, которая создает иммунитет, подобный приобретенному после заболевания.

Вирус кори.

Вирусная природа кори доказана в 1911 г. Т. Андерсеном и Дж. Гольдбергом. Вирус выделен в 1954 г. Дж. Эндерсом и Т. Пиблсом. Он относится к роду Morbillivirus.

Морфология. Размеры вируса 120 - 250 нм. Нуклеокапсид имеет спиральный тип симметрии. Вирион обладает гемагглютинирующим свойством, не содержит нейраминидазы.

Культивирование. Вирус культивируется на различных тканях и на однослойных культурах почечного эпителия человека, обезьяны, собаки. Цитопатогенный эффект был получен на культурах клеток амнинона человека.

Антигенная структура. Среди штаммов вируса кори разновидностей и типов не обнаружено.

Резистентность. Возбудитель при 58 °С быстро погибает. Вне организма вирус кори сохраняется не более 30 мин. Весьма чувствителен к действию солнечного света. В связи с этим дезинфекцию при кори не проводят.

Патогенность для животных. В естественных условиях животные корью не болеют.

Удалось воспроизвести заболевание у обезьян.

Патогенез заболевания у человека. Единственным источником инфекции является больной человек, который становится заразным с 1-го дня продромального периода и до 4 - 5-го дня после высыпания. Общая продолжительность заразного периода 8 - 10 сут. Корь передается воздушно-капельным путем. Наиболее часто заболевания регистрируются в зимний период. Скученность способствует увеличению заболеваемости.

Заболевание корью сопровождается снижением иммунитета к гриппу, туберкулезу, дифтерии, коклюшу, скарлатине и другим заболеваниям. При кори развивается состояние аллергии. Вследствие изменения иммунологической реактивности довольно часто возникают самые разнообразные осложнения, вызываемые. как вирусом кори, так и вторичной бактериальной флорой.

Вирус проникает через верхние дыхательные пути, затем попадает в кровь, поражает ткани дыхательных путей. Болезнь сопровождается вирусемией, лихорадкой, сыпью. Заболеванию подвержены преимущественно дети. Однако корью могут болеть и взрослые, ранее ею не переболевшие.

Например, не было случаев кори за период 49 лет на Колымском нагорье. Она была занесена в 1901 г., и все жители заболели, в результате чего около 7 % погибло. Эпидемия кори произошла на островах Фиджи в 1875 г., когда заболело 150 000 человек и 40 000 из них умерли. Эти факты свидетельствуют о чрезвычайно высокой восприимчивости людей всех возрастов к кори.

У детей, которым с профилактической целью вводились противокоревой иммуноглобулин, корь протекает в легкой (митигированной) форме.

После перенесения кори вирус не исчезает из организма переболевшего, по-видимому, персистирует в клетках мозговой ткани и лимфатических узлов. В отдельных случаях такой длительно персистирующий вирус может активизироваться и вызвать развитие подострого склерозирующего панэнцефалита, заканчивающегося обычно летально. Персистирование вируса наделяет данный организм иммунитетом против кори.

Вирус кори может проникнуть через плаценту, инфицировать плод и вызвать мертворождение или уродства у новорожденных.

Иммунитет. Перенесение кори сопровождается стойким и длительным иммунитетом. Повторные заболевания почти не встречаются. В организме переболевших в течение всей жизни продуцируются антитела, вызываемые вирусом, который после выздоровления переходит в латентное состояние.

Лабораторная диагностика. Распознавание кори производят на основании клинических и эпидемиологических данных. В качестве лабораторного метода диагностики используют риноцитологические исследования методом люминесцентной микроскопии отпечатков со слизистой оболочки носа, в которых обнаруживают гигантские клетки овальной или неправильной формы; внутри клеток находятся включения, флюоресцирующие ярко-красным цветом при обработке препаратов акридином оранжевым.

Для выделения вируса от больных берут кровь из пальца (0,5 мл), носоглоточные смывы и мочу. Посевы производят на первичные культуры ткани из клеток почек обезьян и амниона человека. Вирус в зараженных клеточных культурах удается выявить иногда только через 1 – 1 ½ мес.

Выделение вируса от больного возможно только в продромальный период или в 1-й день высыпания.

Применяют также исследования парных сывороток с целью выявления нарастания титра антител. Антитела против вируса кори можно обнаружить в реакциях нейтрализации цитопатического эффекта в тканевых культурах, а также в реакциях связывания комплемента или торможения гемагглютинации.

Лечение. Специфического лечения нет. При осложнениях назначают антибиотики.

Профилактика. Больные дети обычно не госпитализируются, а изолируются на дому. Только живущие в общежитиях или при тяжелом течении болезни помещаются в больницу.

Дети бывшие в контакте с очагом кори и не получившие иммуноглобулин, изолируются на срок 17 дней, в то время как получившие иммуноглобулин – на 21 день. Если больной не был изолирован, изоляция здоровых контактных детей продлевается еще на 5 дней.

Комнаты, в которых находятся больные корью, нужно проветривать и следить за их гигиеническим состоянием.

Для серопрофилактики кори используют противокоревой иммуноглобулин в дозе 1,5 или 3 мл, получаемый из донорской или плацентарной сыворотки. Иммуноглобулин не дает эффекта, если его вводить позже 7-го дня инкубационного периода. Продолжительность пассивного иммунитета 30 дней. Если ребенок повторно находился в контакте с больным корью, ему снова вводят иммуноглобулин.

Иммуноглобулин обычно не предупреждает болезни, а только отодвигает срок заболевания, в значительной степени смягчает его тяжесть и предупреждает летальный исход.

В СССР для специфической профилактики применяется противокоревая живая вакцина из штамма Ленинград-16. Ее вводят подкожно однократно.Пикорнавирусы

Семейство Picornaviridae включает большое количество очень мелких (pico - маленький) РНК-содержащих вирусов. Все они – безоболочечные вирусы, размером 20-30 нм, устойчивые к эфиру и другим растворителям липидов. Пикорнавирусы, имеющие значение для человека, это прежде всего энтеровирусы, паразитирующие в кишечном тракте и риновирусы, которые инфицируют слизистую оболочку носа. Два других рода пикорнавирусов имеют значение для ветеринарии – афтовирусы, вызывающие ящур крупного рогатого скот и кардиовирусы мышей, включая вирус энцефаломиокрадита.

ЭНТЕРОВИРУСЫ

Энтеровирусы включают: полиовирусы типа 1-3, вирусы Коксаки A - типы 1-24 (тип 23 аналогичен ECHO 9), вирусы Коксаки B - типы 1-6, ECHO вирусы типы 1-34 (ECHO 10 теперь классифицируется как реовирус 1 типа, ECHO 28- как риновирус IA, и ECHO 34 как Коксаки A 24) и энтеровирусы типов 68-72.

Полиомиелит был известен с давних времен как паралитическая болезнь детей (детский паралич). Однако только к концу от 19-ого столетия он был охарактеризован как самостоятельная нозологическая форма, способная вызывать эпидемии, при которых число скрытых бессимптомных инфекций значительно превышает число паралитических случаев. Landsteiner и Popper (1909) сообщили об экспериментальной передаче заболевания обезьянам путем ведения интрацеребрально взвеси спинного мозга от безнадежных больных полиомиелитом. Экспериментальное изучение болезни было ограничено тем, что обезьяны были единственными лабораторными животными, восприимчивыми к вирусу. Прогресс также тормозился догмой, в то время общепринятой, что полиовирусы строго нейтротропны и способны размножаться только в нервной ткани. Главным крупным достижением было обнаружение Эндерсом, Уэллером и Роббинсом (1949) способности полиовирусов размножаться в культурах клеток эмбрионов человека, не относящихся к нервной ткани, вызывая цитопатическое действие. Они были удостоены Нобелевской премии в знак признания основополагающей важности этого открытия в развитии вирусологии в целом.

Новый тип вирусов был выделен Долдорфом и Сиклсом (1948) из кала детей с паралитическим полиомиелитом, от которых был также выделен и полиовирус 1 типа. Вирус вызывал параличи у мышат-сосунков. Этот вирус был назван вирусом Коксаки, так как больные прибыли в Нью-Йорк из селения Коксаки. С тех пор было выделено много подобных вирусов из кала и зева больных с различными заболеваниями и здоровых. Их назвали вирусами Коксаки, разделенными на группы А и В на основании патологических изменений, развивающихся у мышат-сосунков.

Введение методов культуры тканей в вирусологическую диагностику привело к выделению нескольких цитопатогенных вирусов из кала как больных, так и здоровых людей. Они были названы вирусами «сиротками», поскольку они не могли быть связаны с каким-либо определенным заболеванием. Они теперь известны под описательным термином «enteric cytopathogenic human orphan - цитопатогенные человеческие вирусы-сиротки» (ECHO).

Классификация энтеровирусов на вирусы Коксаки и ECHO не совсем удовлетворяет, но названия стали так хорошо укоренились, что их нельзя уже было заменить. Поэтому было решено, что с 1969 г. любой новый идентифицированный энтеровирус не будет определяться в какую-либо из этих групп, а были просто назначены номера типов энтеровирусов, начиная с 68 типа (потому что 67 типов энтеровирусов уже к тому времени были классифицированы - три типа вирусов полиомиелита, 30 – вирусов Коксаки и 34 – вирусов ECHO). Следовательно теперь есть пять новых типов энтеровирусов, 68-72. Энтеровирус 72 - вирус, вызывающий инфекционный гепатит (гепатит типа A). Из-за его особого положения мы рассмотрим его в лекции по гепатитам.

Большинство энтеровирусов специфично для хозяев, поражают один или несколько родственных видов. Нет общего группового антигена для энтеровирусов, хотя некоторые из них обнаруживают перекрестные антигенные реакции.