Друге заняття

План роботи

1. Визначення біомаси.

2. Визначення рН середовища.

3. Визначення загальної кислотності.

4. Визначення вмісту цукру по Бертрану.

5. Визначення лимонної, щавлевої й глюконової кислот й їхній розрахунок.

Для реєстрації результатів роботи формується нижчеподаний журнал спостереження.

Таблиця 4.

Волога

Загальна кислотні-сть

рН середо-вища

% РВ

Концен-трація лимон- ної кислоти

Концен-трація щавеле-вої кислоти

Концен-трація глюконо- вої кислоти

Маса пустого бюкса

Маса бюкса з наважкою

Маса після висушуван-ня

1.Визначення біомаси

Метод заснований на висушуванні наважки суспензії мікроорганізмів до постійної маси. Зважити чисті бюкси з погрішністю не більше 0,0003 г. Перший метод: суспензію мікроорганізмів ретельно перемішати й швидко, не даючи біомасі осісти, відібрати піпеткою 1 мл у підготовлений бюкс. Бюкс із суспензією зважити, потім помістити в сушильну шафу. Висушування проводити до постійної маси. Другий метод: взяти фільтрувальний папір висушити до постійної маси, зважити й відфільтрувати через цей папір суспензію.

Вміст абсолютно сухих речовин у суспензії (X) у відсотках розраховується за формулою:

де М – маса порожнього бюкса або фільтра; M₁ – маса бюкса або фільтра з наважкою;

М₂ – маса бюкса або фільтра з наважкою після висушування.

2. Визначення рН середовища

рН середовища визначається потенціомтерично

3. Визначення загальної кислотності

Відбирають 5 мл аналізованого розчину, розбавляють його дистильованою водою до 150 мл, додають 3 – 4 краплі фенолфталеїну й титрують 0,025н розчином лугу.

Вміст лимонної кислоти (X) в % обчислюють за формулою:

де А – кількість лугу,який витратився на титрування, у мл; F – фактор лугу по лимонній кислоті (1 мл 0,1н розчину NaОН відповідає 0,007 г лимонної кислоти).

При використанні 0,025н розчину NaОН перераховують фактор лугу по лимонній кислоті

1 мл 0,1 н NaOН – F_0,1 = 0,007 лимонної кислоти;

1 мл 0,025н NaОН – F_0,025 = X .

Тоді F_{0,025H NaOH} = 0,00175 г.

1 мл 0,025н NaОН еквівалентний 0,00175 г лимонної кислоти.

4. Визначення вмісту цукру в культуральній рідини по Бертрану

У процесі життєдіяльності гриба основна маса цукру перетворюється в лимонну кислоту й споживається в процесі енергетичного обміну, у зв'язку із чим визначення цукру можна вести безпосередньо в культуральній рідині без розведення.

Гідроліз також не проводиться, тому що в кислому середовищі й під дією інвертази сахароза середовища повністю перетворюється в інвертний цукор.

На визначення залишкового цукру по методу Бертрана береться 10 мл культуральної рідини.

Розраховується кількість цукру в 100 мл культуральної рідини (%).

Приклад розрахунку. В аналізованій пробі було знайдено в 10 мл культуральної рідини, наприклад, 20,8 мг РВ, тоді у всій пробі буде залишкового цукру (С_зал):

де 10 мл – узята на аналіз кількість культуральної рідини; 100 мл – загальний обсяг культуральної рідини; 1000 – коефіцієнт перерахування в грами.